粘液表皮样癌细胞中脆性组氨酸三聚体基因异常表达的研究

目的：检测粘液表皮样癌细胞中FHIT基因的异常表达。方法：应用逆转录巢式聚合酶链反应（RT－PCR）及DNA测序技术检测粘液表皮样癌和粘液表皮样癌细胞中FHIT基因表达情况。结果：粘液表皮样癌细胞系细胞中存在FHIT基因部分缺失，产生异常转录本，大小约247bp.FHIT基因mRNA异常转录本为多个外显子缺失所致，E1－E8全部缺失。结论：FHIT基因在粘液表皮样癌细胞中的异常表达可能在粘液表皮样癌的发生和发展中起作用。     

碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对Balb/c胎鼠下颌突外胚间充质细胞增殖的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子（EGF）对Balb/c胎鼠下颌突外胚间充质细胞增殖的剂量效应和时间效应。方法：用体外细胞培养技术和噻唑蓝（MTT）比色法，观察不同浓度和不同时间bFGF和EGF对外胚间充质细胞增殖的影响。结果：0.1-100ng/mL bFGF,0.1-10ng/mL EGF对细胞有促增殖作用，并呈浓度依赖性,两种生长因子均在10ng/mL浓度时作用最强，并于培养第5d达到促增殖高峰。结论：bFGF和EGF能促进外胚间充质细胞的增殖。     

牙齿发育基因调控中的综合思维

牙齿的发育是一包括牙齿的生长、钙化和萌出 ,复杂而又连续的过程[1] ,也是一个始终存在着基因调控的过程。用综合思维方式来观察、分析这一过程 ,可以在基因水平上掌握牙齿发育的过程 ,对牙病的发生和预防有重要的指导意义。1　整体掌握牙胚发育基因调控———矛盾规定的统一性　　综合思维是在对事物内部各种矛盾进行周密分析的基础上 ,从矛盾整体上认识对象多种规定的统一性。人们对牙齿发育的认识也是一个动态的、发展的过程。从一开始对牙胚发育中蛋白质作用的认识 ,到现代应用分子生物学理论和技术 ,了解到牙胚发育的结构基因和调节基…     

永生化成釉细胞瘤细胞株TAM-1的建立

目的：建立永生化的成釉细胞瘤细胞株。方法：应用基因转染方法将SV40Tag整合到体外培养的成釉细胞瘤细胞基因组中，用PCR和RT－PCR检测SV40Tag的表达，单克隆培养筛选出永生化的成釉细胞瘤细胞株。结果：未转染细胞体外存活51d。转染SV40Tag的肿瘤细胞的寿命延长，克隆细胞生长良好，呈小多边形，传代25次后仍保持生长旺盛，命名为TAM－1。结论：SV40Tag可整合到釉细胞瘤细胞基因组中，并获得稳定表达，转染SV40Tag的成釉细胞 瘤细胞株TAM－1获得了永生性。     

贝复济喷剂治疗复发性口疮的疗效观察

本文用贝复济 (碱性成纤维细胞生长因子ｂＦＧＦ)对复发性口疮进行局部治疗 ,收到了较好的临床效果。　一、临床资料收集 1999年～ 2 0 0 0年在本院口腔科门诊就诊的复发性口疮患者 6 0例 ,患者年龄 8岁～ 74岁 ,其中男性 2 3例 ,女性 37例 ,溃疡复发史最短 1年 ,最长 30年。所有患者排除全身其他疾病 ,就诊前 3个月未使用过任何免疫制剂。所有病例系常规治疗效果不佳者。二、治疗方法将患者分为两组 ,治疗组用贝复济喷剂 (由珠海东大生物制药有限公司提供 ) ,采用喷湿小棉球后局部涂擦 ,每天 3～ 4次 ,每次 0 .5分钟。对照组用我科近年来常…     

组织工程化牙本质种子细胞的研究进展

成牙本质细胞是牙齿发育的重要细胞,寻找形成成牙本质细胞的种子细胞,获得稳定可靠的细胞来源是组织工程化牙本质研制的先决条件.牙胚、牙乳头、牙髓,甚至脱落的乳牙牙髓里都存在形成牙齿的前体细胞.本文就近年来组织工程化牙本质种子细胞的研究现状进行了综述.     

同源盒基因HOXC 13在成釉细胞瘤中的表达

目的研究HOXC13 mRNA在成釉细胞瘤（ameloblastoma，AB）中的表达，探讨其发生的意义。方法采用原位杂交法检测47例AB（原发AB 29例，复发AB 14例，恶变AB 4例），同时选取骨纤维异样增殖症2例，牙源性角化囊性瘤（keratocystic odontogenic tumor，KCOT）10例，正常口腔黏膜上皮7例作对照。结果HOXC13 mRNA AB中阳性率为97．9％（46／47），10例KCOT中7例为HOXC13 mRNA阳性表达，但在7例正常口腔黏膜细胞中仅3例为HOXC13 mRNA阳性表达，AB、KCOT、正常黏膜三组间差异有统计学意义（χ^2=21．665，P=0．001），但角化及颗粒样变退化细胞却为阴性。在部分AB间质成纤维细胞质中也有阳性表达，2例骨纤维异常增殖症纤维也为阳性。结论在AB中存在HOXC13的高表达；HOXC13 mRNA在AB上皮中的表达有异质性，该基因可促进上皮的增殖，其丢失可导致上皮细胞的角化和退变。     

涎腺腺样囊性癌与黏液表皮样癌中耐药、转移相关基因表达的比较研究

目的应用基因芯片对腺样囊性癌（adenoid cystic carcinoma，ACC）以及低分化来源的黏液表皮样癌（mucoepidermoid carcinoma，MEC-1）进行基因筛查，并对3种重要的基因进行实时定量PCR检测，以便为临床早期诊断和合理治疗提供依据。方法应用基因芯片筛查，选出3个重要的基因，利用实时定量PCR进行检测。结果多药耐药基因（multidrug resistance gene，MDR）1含量MEC-1〉ACC—M〉ACC-2；多药耐药蛋白（multidrug resistance protein，MRP）1含量MEC-1〉ACC-M〉ACC-2；CCD1基因含量MEC-1〉ACC-M〉ACC-2。结论MEC-1耐药性与MDR-1基因含量较高相关；ACC—M高转移性与MRP-1基因含量较高和CCD1基因含量较低相关；ACC-2低转移性与MRP1基因含量较少相关。     

HSV-TK自杀基因对涎腺多形性腺瘤细胞治疗的实验研究

目的研究单纯疱疹病毒胸苷激酶基因(Herpes simplex virus thymidine kinase，HSV-TK)／丙氧鸟苷(ganciclovir，GCV)系统对人涎腺多形性腺瘤体外基因治疗的作用。方法采用腺病毒包装重组脂质体介导的含有HSV-TK全长的cDNA真核表达质粒PDC312-HSVTK转染人涎腺多形性腺瘤细胞，通过RT-PCR检测TK基因在转染细胞中的表达；用MTT法检测HSV-TK／GCV系统对多形性腺瘤细胞的杀伤作用和旁观者效应：采用倒置显微镜、组织学染色等观察HSV-TK／GCV系统作用细胞后的形态学改变。结果HSV-TK基因转染24小时后，肿瘤细胞开始出现空泡性变；转染48小时后，RT-PCR从转染的细胞中成功扩增出1150bp的特异性TK基因片段。转染36小时后加入不同浓度的GCV治疗，细胞出现核固缩，胞浆裂解，随之细胞死亡、脱壁的现象。细胞存活率随HSV-TK／GCV作用时间延长而逐渐下降，当加入10^-4mol／LGCV治疗7天时，HSV-TK／GCV系统的杀伤作用最强，细胞存活率为10．3％。当TK阳性的细胞占细胞总数50％时，其旁观者效应最明显，细胞存活率为31．7％。结论HSV-TK／GCV系统对涎腺多形性腺瘤细胞具有明显的杀伤作用和旁观者效应。     

c血清型变形链球菌致龋相关基因/DNA片段的批量克隆与高通量筛选

目的筛选含致龋相关基因／DNA片段的阳性克隆，为探究变形链球茵致龋的分子机制奠定基础。方法将抑制消减杂交方法获得的高毒力株特异的消减PCR产物与T／A栽体pCR2．1连接，将连接产物转化E．coli TOP0F’感受态细胞，进行蓝白筛选。对96个转化子进行Colony PCR，将PCR产物点样于同一尼龙膜上，分别与地高辛标记的变形链球茵高、低毒力株基因组DNA／AluI酶切产物杂交，高通量筛选阳性克隆。结果随机挑取了96个白色或白色中央有蓝色的茵落，经过Colony PCR，其中有1个转化子的扩增产物为双带，其余均为0．2～2kb之间的单一条带。经过杂交，以与高毒力株基因组有杂交信号，而与低毒力株基因组无杂交信号或信号明显弱的转化子为阳性克隆。筛选的阳性率为50％左右，阳性克隆中含有c血清型变形链球茵致龋相关的基因／片段。结论对抑制消减杂交方法获得的变形链球茵高毒力株特异的消减PCR产物进行批量克隆和高通量筛选，获得了致龋相关的基因／DNA片段。