血浆微生物游离DNA 宏基因组下一代测序在感染性疾病中的研究进展

宏基因组下一代测序（metagenomic next-generation sequencing，mNGS）技术被广泛地应用于各种感染性疾病。血浆微生物游离DNA（microbial cell-free DNA，mcfDNA）近年来备受关注，其无创性和易获得性有助于识别人体内大部分来源的感染。了解血浆mcfDNA mNGS在感染性疾病诊断中的临床性能，不仅可加深对高通量测序的理解，还可为预防和治疗常见及罕见感染提供新的诊断途径。该文介绍了感染性疾病中血浆mcfDNA的生物学特点，血浆mcfDNA mNGS 在感染性疾病诊治中的实践应用以及面临的挑战。血浆mcfDNA mNGS作为一项新兴技术，有望提升感染性疾病预测、临床诊断和预后判断能力，特别是在传统诊断方法有局限性的领域。     

微量法检测念珠菌对三唑类药物敏感性与交叉耐药性

目的应用美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐微量法测定酵母菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并检验其重复性和准确性，观察氟康唑耐药株对伊曲康唑是否存在交叉耐药性。方法参照ＮＣＣＬＳ推荐的药敏试验方案微量稀释法（１９９５年版），检测２５株氟康唑耐药性白念珠菌及４８株临床分离株对氟康唑及伊曲康唑的敏感性。结果２５株氟康唑耐药白念珠菌中只有３株菌对伊曲康唑耐药（ＭＩＣ值≥４μｇ／ｍｌ），占１３．０４％，只有少数菌对伊曲康唑存在交叉耐药。４８株临床分离白念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的ＭＩＣ值呈正态分布，有４６株对伊曲康唑的ＭＩＣ值介于０．００７５～４μｇ／ｍｌ，其半数抑菌浓度（ＩＣ５０）为０．１２５μｇ／ｍｌ，有４３株对氟康唑的ＭＩＣ值介于０．２５～１６μｇ／ｍｌ，其ＩＣ５０为２μｇ／ｍｌ。结论ＮＣＣＬＳ微量稀释法有较好的可重复性和稳定性，少数氟康唑耐药株对伊曲康唑有交叉耐药性。     

重症监护病房中耐甲氧西林金葡菌的流行

目的调查耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（ＭＲＳＡ）在重症监护病房（ＩＣＵ）的流行情况。方法将临床分离２８株ＭＲＳＡ包埋于琼脂块中，原位溶解细菌，ＳｍａⅠ消化染色体ＤＮＡ，经脉冲场凝胶电泳（ＰＦＧＥ）分离，比较染色体限制性内切酶图谱，确定菌株的亲缘关系。结果２８株ＭＲＳＡ的ＰＦＧＥ图谱有Ｋ、Ｍ、Ｌ、Ｎ４型，以Ｋ型为主（１８株）。ＩＣＵ本次流行期间的ＭＲＳＡ分离株均为Ｋ１亚型（１４株），与前次流行株Ａ１亚型完全不同。采集２０位ＩＣＵ医护人员鼻拭子，分离到２株ＭＲＳＡ，阳性率１０％，其ＰＦＧＥ图谱与流行株一致。结论ＭＲＳＡ在ＩＣＵ流行情况十分严重，及时采取有效措施控制这种流行及播散是至关重要的     

MicroscanAS—4自动微生物分析仪在细菌室间质控中的评价

应用 Microscan AS- 4(以下简称为 AS- 4)自动微生物鉴定 /药敏测试系统 ,对细菌室间质评中的 39株不同质控菌株进行鉴定 ,并作了 110对次平行药敏试验。AS- 4对质控菌株鉴定的总正确率为 89.7%。对肠杆菌科、非发酵菌、苛养菌、弧菌科以及葡萄球菌、链球菌属鉴定具有较稳定的良好效果 ;对真菌 (酵母菌 )、李斯特菌属鉴定较局限 ;对马红球菌、棒状杆菌属不能鉴定。对沙门菌属、志贺菌属仍须借助血清学分型鉴定。 AS- 4检测的 MIC与质控测定菌株药敏靶值的完全符合率达 98.2 % ,比药敏纸片的 K- B法测定符合率略高。     

女性泌尿生殖道支原体感染160例药敏试验分析

目的：了解女性泌尿生殖道支原体对抗生素的耐药情况。方法：使用珠海丽拓公司支原体试剂检测。结果：160例支原体感染中检出144例解脲脲原体（Uu），16例解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）混合感染。药敏结果显示：Uu对强力霉素的耐药率为2．1％；Uu和Mh混合感染对美满霉素的耐药率为4．0％。结论：女性泌尿生殖道感染主要是解脲脲原体（Uu），其次为人型支原体（Mh），解脲脲原体（Uu）对强力霉素的耐药率最低，解脲脲原体（Uu）和人型支原体（Mh）混合感染对美满霉素的耐药率最低。     

正确认识抗生素

给宝宝治病时,一提到抗生素,妈妈们马上提高警惕,变得格外紧张.其实,抗生素并没有想像中的那么可怕,只要在医师指导下正确地使用,它完全可以成为宝宝的良药. 什么是抗生素? 抗生素原称抗菌素,是一种能够对抗细菌、真菌、支原体等病原微生物的化学物质,主要用于治疗各种细菌感染或抑制致病微生物感染的药物.使用抗生素后,药物需要从肝脏代谢或经肾脏排泄出来,但宝宝的器官发育还未成熟,抗生素药物毒性较大,很容易损伤宝宝的肾脏等器官,严重的话,还会引起肾功能衰竭.目前儿童常用的抗生素主要有青霉素类、罗红霉素类、以及第二、三、四代头孢菌类药物,这些抗生素相对来说副作用较小,比较适合宝宝使用.     

藏药二十五味鬼臼丸微生物限度检查方法验证

目的建立二十五味鬼臼丸的微生物限度检查方法。方法分别采用常规法、培养基稀释法和薄膜过滤法对4种阳性菌进行回收率试验。结果根据回收率试验结果,二十五味鬼臼丸有较强的抑菌作用,必须采用薄膜过滤法才能彻底消除其抑菌作用,3种细菌的回收率均能达到70%。结论二十五味鬼臼丸微生物限度检查方法的验证表明其细菌计数应按薄膜过滤法,霉菌、酵母菌数和各控制菌均可采用常规法测定。     

儿童血培养分离肺炎链球菌的耐药性

目的分析某儿童医院临床送检血标本分离的侵袭性肺炎链球菌耐药特点,指导临床合理用药。方法回顾性分析该院2007年4月—2011年6月临床分离的63株侵袭性肺炎链球菌的药敏资料。结果 63株肺炎链球菌对青霉素的敏感率为22.22%,对红霉素和复方磺胺甲口恶唑的敏感率低,分别为8.93%和28.57%;对阿莫西林、头孢曲松和头孢噻肟的敏感率较高,分别为85.71%、80.96%、85.71%;未检出万古霉素或利奈唑胺不敏感菌株。结论侵袭性肺炎链球菌耐药率高,应做好对其的耐药性监测,以指导临床合理用药,积极有效地治疗侵袭性肺炎链球菌疾病。     

连续4年鲍曼不动杆菌感染分布及耐药性变迁

目的了解某院鲍曼不动杆菌（AB）在医院感染中的分布及耐药性变迁,为临床合理用药提供依据。方法对2008年1月-2011年12月住院患者送检的各类标本进行细菌培养分离,采用VITEK 2 compact全自动微生物仪进行菌株鉴定, K B纸片扩散法检测抗菌药物的敏感性。结果4年共分离AB 597株。AB在革兰阴性杆菌中所占比率,2008-2011年分别为：7.00%、8.35%、9.75%和12.66%,2011年较2008年明显上升,差异有统计学意义（χ2=32.77,P<0.05）。标本来源以痰标本最多,占70.86%;主要分离自老年病房（177株,29.65%）、肿瘤科（115株,19.26%）和神经内科（93株,15.58%）。AB对常用抗菌药物的耐药率在4年间均有逐年上升趋势（P<0.05）;2011年AB对美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素的耐药率较低,分别为8.56%、6.95%、5.35%。结论AB的感染率和耐药率不断升高,加强对AB的监测,有利于临床合理选择抗菌药物,减少耐药菌株的产生与传播。     

耐甲氧西林溶血葡萄球菌耐药性及耐药基因研究

目的了解安徽省宿州地区临床分离的耐甲氧西林溶血葡萄球菌（MRSH）耐药性、耐药基因携带状况及诱导型克林霉素耐药的发生率。方法采用ATB STAPH5药敏试验板微量肉汤法对42株MRSH进行16种抗菌药物敏感性测定;聚合酶链反应（PCR）法检测MRSH中mecA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、TetM耐药基因;D 试验检测诱导型克林霉素耐药表型。结果42株MRSH对万古霉素、呋喃妥因100%敏感,对利福平、米诺环素、奎奴普丁/达福普汀、替考拉宁的敏感率＞90%;而对庆大霉素、诺氟沙星、左氧氟沙星的耐药率＞70%,对青霉素、苯唑西林、红霉素耐药率为100.00%。mecA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、TetM基因阳性率分别为100.00%（42株）、64.29%（27株）、59.52%（25株）、40.48%（17株）、28.57%（12株）、9.52%（4株）。D 试验阳性13株,诱导性耐药占30.95%。结论安徽宿州地区分离的MRSH呈多重耐药性,临床治疗应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物。