rhBMP-2、PRF和自体骨分别复合珊瑚羟基磷灰石成骨效能的比较研究

目的：通过建立动物骨缺损模型,比较重组人骨形成蛋白-2（rhBMP-2）与珊瑚羟基磷灰石（CHA）复合物、富血小板纤维蛋白（PRF）与珊瑚羟基磷灰石复合物、自体骨与珊瑚羟基磷灰石复合物以及单纯珊瑚羟基磷灰石这四种骨移植材料在骨缺损中的成骨效能。方法：在比格犬双侧胫骨干骺端制备四个相同的骨缺损区,在缺损区分别植入rhBMP-2/CHA、 PRF/CHA、自体骨/CHA及CHA （对照）;3个月后处死动物,行大体标本观察;拍牙科CT,观察各植骨区骨密度情况;制作石蜡切片、 HE染色,比较各植骨区骨组织学特点及新骨形成量。结果：大体标本见四组骨缺损间隙均完全关闭。 X线示自体骨/CHA组和PRF/CHA组骨密度较致密, rhBMP-2/CHA组致密性低于前两者, CHA组未见明显骨致密影。 HE切片见四组新生骨与宿主骨连接紧密,新生骨小梁不规则,粗细不一,排列无序;复合型骨移植材料的新生骨小梁比对照组更密集、粗大,连续性更好;四组植骨区成骨量比较：自体骨/CHA组〉PRF/CHA组〉rhBMP-2/CHA组〉CHA组。结论：复合型骨移植材料成骨效应明显优于单纯珊瑚羟基磷灰石;三种复合型材料中自体骨/CHA成骨效应最好,其次为PRF/CHA, rhBMP-2/CHA最差。     

不同浓度尼古丁对种植体骨愈合的影响

目的：探讨不同浓度的尼古丁干预,对种植体周围骨组织的愈合情况和骨保护素（OPG）及骨形成蛋白2（BMP-2）表达情况的影响。方法：选取24只3月龄SD大鼠,雌雄不限,随机数表法分为实验组和对照组,尔后分别采用不同浓度（2mg/kg、0.2mg/kg、0.02mg/kg）的尼古丁和等量生理盐水干预,每天2次背部皮下注射。2周后,大鼠左右胫骨近骺端均植入表面喷砂蚀刻处理的钛合金种植体,并继续施加干预因素。种植后第2、4周分别行X线、 CT、电镜观察和qRT-PCR检测。采用SPSS17.0软件对数据进行单因素方差分析（One-Way ANO-VA test）,组内比较行t检验。结果： X线灰度值显示,除高浓度尼古丁组（HDN）与对照组存在差异（P＜0.05）外,各组组间差异不明显。 CT-BMD值观察,在高浓度或长期尼古丁刺激下种植体周围骨组织矿化程度明显低于对照组,且实验各组差异明显（P＜0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,2周时随着尼古丁干预浓度的增加,种植体周围基因表达量逐渐降低,且与对照组差异明显（P＜0.05）,仅低尼古丁浓度（LDN）组与对照组中的BMP-2的表达无明显差异（1/0.93＆#177;0.17, P＞0.05）;实验第4周,各尼古丁组的基因表达量均出现下调（P＜0.05）。扫描电镜（SEM）观察发现,随着尼古丁浓度和干预时间的增加,骨小梁结构发生改建障碍,多呈纤维骨或编织骨,骨基质分布不均匀且纤维结构排列紊乱无定向。结论：尼古丁对种植体周围骨愈合的抑制作用可能与其下调相关骨活性基因的表达关系密切,且抑制作用受尼古丁干预时间和浓度的影响明显。     

应用于萎缩上颌后牙区的多孔状短种植体（长5mm和7mm）：一份5年的前瞻性单队列研究报告

目的：本前瞻性研究是为了确定应用于萎缩上颌后牙区的多孔状短种植体的5年存活率。必要情况下植入种植体需结合上颌窦底内提升术．术中常常添加无机牛骨粉。材料和方法：在87例牙列缺损患者中植入110颗多孔状短种植体并随访5年。使用的种植体包括两种长度（5mm和7mm）和两种直径（4．1mm和5mm）．根据患者牙槽骨的高度和宽度进行选择。在47个植牙部位实施了上颌窦底内提升术（其中8例直接提升窦底黏膜．39例提升同时加入异体移植骨）．未负载的愈合期为6个月。总共63颗种植体用单冠修复．47颗相邻种植体联冠修复。观察指标是有无修复体和种植体失败,任何并发症和种植体周围边缘骨吸收。结果：种植体修复后5年内无患者退出研究。11颗种植体失败：2颗发生于种植体未负载时,9颗发生在修复体负载后。11例患者（占12．6％）都失败了1颗种植体。6名患者（占6．9％）发生了修复体失败（种植体单冠修复）。1例手术并发症（膜穿孔）发生,但种植体正常植入。愈合期间无并发症发生。3名患者种植体负载后发生严重种植体周围炎而不得不拔除种植体。2颗基台松动和1颗烤瓷冠崩瓷。随访期末的种植体存活率是90％,修复重建的成功率是93．1％。平均种植体周围边缘骨吸收为1．4mm。结论：上颌后牙区使用多孔状短种植体治疗5年的研究报告显示具有可接受的临床结果．但仍需要更长时间的随访来证实这些结果。     

牙周非手术治疗对慢性肾病伴牙周炎患者牙周状况及血清C反应蛋白的影响

目的：探讨牙周非手术治疗对慢性肾病（CKD）伴牙周炎患者牙周状况及血清C反应蛋白（CRP）的影响。方法：分两组,A组为无全身严重疾病的牙周炎中老年患者38例,B组为伴慢性肾病的牙周炎中老年患者46例,两组均进行牙周非手术治疗,于牙周治疗前、后3个月分别检测其血清CRP及牙周指标。结果：A组治疗前牙周状况与B组相比,差异非常显著（P〈0.01）。两组患者治疗后牙周状况与治疗前均有改善,差异非常显著（P〈0.01）,A组的治疗效果好于B组,差异有显著性（P〈0.01）。治疗后A组患者血清CRP与治疗前有明显降低,差异非常显著（P〈0.01）,B组患者CRP与治疗前也有降低,差异有显著性（P〈0.05）。患者血清CRP与BOP、PD、AL等指标均呈正相关（P〈0.05）。结论：牙周非手术治疗可能通过改善牙周状况而降低慢性肾病伴牙周炎患者的血清CRP水平。     

低分子量猪釉原蛋白和氟离子共同作用对磷灰石晶体矿化作用的研究

目的：利用双膜体外矿化模型研究低分子量猪釉原蛋白（LMWPA）与氟离子（F）共同作用对磷灰石晶体矿化的作用。方法：将LMWPA,LMWPA＋1mg／LF,LMWPA＋2mg／LF分别加入双膜系统的反应空间内反应,同时设DDW（双蒸水）,BSA（牛血清白蛋白）,BSA＋1mg／LF,BSA＋2mg／LF组作为对照,37℃,反应3d后,扫描电镜（SEM）、能谱分析（EDX）,X线衍射法（XRD）检测矿化产物。结果：与空白对照组相比,BSA和LMWPA的加入均能显著改变晶体的形态,但对晶体成份无明显作用,均为磷酸八钙（OCP）。与氟离子共同作用后,LMW—PA组形成了磷灰石晶体,而BSA组则形成了透钙磷石。结论：LMWPA与氟离子的共同作用可能是釉质矿化过程中重要的调控机制。     

异丙酚全身麻醉对老年患者血清神经元特异性烯醇化酶、S100B蛋白及认知功能的影响

目的探讨异丙酚全身麻醉对老年患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100B蛋白水平及认知功能的影响。方法选取择期手术的老年患者121例,随机分为观察组61例和对照组60例,观察组采用异丙酚全身麻醉,对照组吸入异氟烷麻醉。观察2组患者麻醉诱导前(T_0)、手术结束即刻(T_1)、术后1 d(T_2)、术后2 d(T_3)时刻血清S100B蛋白和NSE水平,并观察2组患者术前1 d、术后1 d及术后2 d简易智能状态检查量表(MMSE)评分。结果 2组T_1、T_2时刻NSE水平、血清S100B蛋白均较T_0时刻升高,T_1时刻达到最高,但观察组低于对照组,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。2组T_3时刻恢复至T_0时刻水平,与T_0时刻差异无统计学意义(P0.05)。2组术后1 d MMES评分均下降,但观察组高于对照组,差异有统计学意义(P0.01),2组术后2 d MMES评分均恢复至术前水平,差异无统计学意义(P0.05)。结论异丙酚较异氟烷麻醉对患者术后NSE水平、血清S100B蛋白和术后早期的认知功能影响较小。     

丝素蛋白在脂肪组织工程中的研究进展

外伤、肿瘤切除术后、先天及后天性畸形等造成的软组织缺损,不仅影响缺损部位的功能和外观,还会影响患者的身心健康.软组织缺损的修复一直是整形外科的难点之一.随着组织工程技术的进步和成熟,构建组织工程脂肪为软组织缺损的填充提供了新思路.构建工程化脂肪组织有3大要素：种子细胞、生长因子和支架材料.     

乌司他丁对单肺通气患者血浆IL-8、IL-10及肺AQP1、AQP4的影响

目的观察肺癌根治术患者单肺通气(OLV)时白细胞介素(IL)-8、IL-10及肺水通道蛋白(AQP)1、AQP4的变化及乌司他丁对其影响。方法择期行肺癌根治术,且术中OLV2h患者30例,ASA Ⅰ或Ⅱ级,采用随机数字表法,将患者随机均分为三组。OLV前10min A、B组分别泵注乌司他丁5 000U/kg及10 000U/kg,用生理盐水稀释至20ml;C组泵注生理盐水20ml,10min泵完。于麻醉诱导后给药前1min(T1)、OLV 30min(T2)、60min(T3)、90min(T4)、120min(T5)和恢复双肺通气(TLV)30min(T6)时抽取桡动脉血行IL-8、IL-10浓度测定,以及于开胸OLV时、肺叶离体时取肺组织测定肺AQP1、AQP4表达。结果与T1时比较,三组T4～T6时IL-8浓度、T2～T6时IL-10浓度明显升高(P0.05)。与C组比较,A、B组T3、T4时IL-8浓度明显降低、T2～T5时IL-10浓度明显升高(P0.05)。与B组比较,A组T4、T5时IL-8浓度明显升高、而T3～T5时IL-10浓度明显降低(P0.05)。与开胸OLV时比较,肺叶离体时A组和C组肺组织AQP1表达和C组AQP4表达明显降低(P0.05)。与C组比较,肺叶离体时B组肺组织AQP1表达和A、B组肺组织AQP4表达明显升高 (P0.05)。与B组比较,肺叶离体时A组肺组织AQP1表达明显降低(P0.05)。结论乌司他丁能降低IL-8浓度,升高IL-10的浓度,促使AQP1、AQP4的表达增强,且呈剂量依赖性。从而表明了乌司他丁对单肺通气所致的肺损伤有保护作用。     

硼替佐米对K562细胞增殖、凋亡及其对XIAP表达的影响

目的 研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomi)对白血病细胞株K562细胞的增殖、凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达的影响.方法 将不同浓度的硼替佐米作用于K562细胞,采用WST-1法测定细胞增殖活性,瑞特-吉姆萨染色观察细胞形态学变化,用流式细胞术、原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,RT-PCR法检测XIAP mRNA表达,SP免疫组化法检测XIAP蛋白的表达.结果 5、10、30、50、100 nmol/L硼替佐米作用于K562细胞24 h,细胞增殖抑制率分别为(13.6±0.2)%、(28.7±0.5)%、(55.4±1.1)%、(68.1±1.1)%、(81.4±0.1)%,空白对照组为(1.2±0.0)%(P＜0.05),24 h IC50值为24.6 nmol/L.30 nmoL/L硼替佐米作用于K562细胞12、24、36、48 h,细胞增殖抑制率分别为(29.1±0.9)%、(55.4±1.1)%、(57.8±0.8)%、(59.8±1.2)%,12 h组与24 h组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),但24 h组与36、48 h组比较差异有统计学意义(P＞0.05);30 nmol/L硼替佐米作用于K562细胞24 h,镜下可见细胞核固缩、核边集、核碎裂,胞质中见大量空泡及凋亡小体,对照组细胞形态正常.TUNEL检测法显示凋亡细胞阳性率为49.0%,空白对照组阳性率2.3%(P＜0.05).10、30、100 nmoL/L硼替佐米作用于K562细胞24 h,AnnexinⅤ-FTTC/PI双标法显示其凋亡率分别为(32.2±1.2)%、(53.9±1.3)%和(81.3±2.8)%,均高于对照组(0.3±0.6)%(P＜0.05).RT-PCR法检测结果显示随硼替佐米浓度增高,XIAP mRNA表达下调明显.免疫组化结果显示硼替佐米组XIAP蛋白表达下调,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 硼替佐米呈时间、浓度依赖性抑制K562细胞增殖,并可能通过下调XIAP的表达诱导细胞凋亡.

Abstract：

Objective To investigate the effect of proteasome inhibitor bortezomib on proliferation,apoptosis of K562 cells and the expression of XIAP. Methods K562 cells were treated with bortezomib at different concentration. Cell proliferation was analyzed by WST-1 assay, cell apoptosis by flow cytometry and TUNEL, XIAP mRNA expression from 5 - 100 nmol/L by RT-PCR, and XIAP protein expression by SP immunohistochemistry. Results K562 cells were treated with bortezomib at different concentrations for 24 h respectively, the cells growth was significantly inhibited with inhibition rates from( 13.6 ±0.2)% to (81.4 ±0. 1 ) %, respectively, being markedly higher than that of control ( 1.2 ± 0. 1 ) % ( P ＜ 0. 05 ). IC50 was 24.6 nmol/L of bortezomib treated for 24 h. When K562 cells were treated with 30 nmol/L of bortezomib for 12 - 48 h, the inhibition rates were (29.1 ± 0. 9) % to (59.8 ± 1.2 ) %, respectively, the differences being statistically significant( P ＜0.05 ) between 12 h group and 24 h group, while there was no statistical difference between 24 h, 36 h and 48 h groups. K562 cells treated with 30 nmol/L bortezomib for 24 h showed nuclear condensation, nuclear margination, nuclear fragmentation, cytoplasmic vacuoles and a large number of apoptotic body formation. The apoptotic cells rate was 83.67% in bortezomib treated group, and 2.33% in untreated group (P ＜ 0.05 ). The expression of XIAP mRNA was decreased in a dose-dependent manner, and the expression of its protein was down-regulated. Conclusion Bortezomib can inhibit the proliferation of K562 cells, and induce apoptosis by down-regulating the expression of XIAP, providing the laboratory evidence for the targeted therapy in acute leukemia.     

尿足细胞及其标志蛋白podocalyxin测定对2型糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨尿足细胞及其标志蛋白(podocalyxin,PCX)测定对2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的诊断价值。方法选取160例临床确诊为2型糖尿病的患者,依据尿清蛋白(Alb)/肌酐(Cr)比值(UACR)将患者分为正常清蛋白尿组(NA)、微量清蛋白尿组(MA)和大量清蛋白尿组(LA);选取同期体检健康者50人作为对照组。用流式细胞术检测尿中足细胞,ELISA法检测尿中PCX含量,两者之间相关性采用pearson相关分析。结果 NA组、MA组、LA组以及健康人对照组尿足细胞检测结果分别为(0.96±0.36)、(3.09±0.86)、(5.53±1.44)和(0.65±0.31)units/μL,尿PCX检测结果分别为(0.62±0.13)、(1.49±0.47)、(2.19±0.47)和(0.46±0.08)ng/μmol Cr,糖尿病患者尿足细胞及PCX显著高于健康人对照组,差异有统计学意义(P0.05),且随着病程进展而升高。Pearson相关分析结果表明,尿足细胞和PCX呈正相关(r=0.86,P0.01)。在NA患者中,足细胞及PCX阳性率分别为51.9%、73.1%,差异有统计学意义(P0.05);两者联合检测阳性率为76.9%。结论糖尿病患者肾损伤时尿足细胞和PCX明显增加,两者联合检测对于2型糖尿病肾病早期诊断具有重要价值。