鼠疫F1-V重组蛋白疫苗滴鼻免疫应答效果的研究

目的 以重组霍乱毒素B亚单位（rCT-B）为鼠疫F1-V重组蛋白的佐剂制备黏膜疫苗，观察小鼠诱导的黏膜免疫和系统免疫应答效果。方法以制备的鼠疫黏膜疫苗滴鼻免疫小鼠4次免疫后，采用间接ELISA检测血清特异性抗F1-V的IgG和IgA抗体及抗体亚型分类，检测鼻咽喉、肺、小肠及阴道灌洗液中特异性抗F1-V的黏膜分泌型IgA；采用流式细胞术检测鼻相关淋巴组织淋巴细胞、脾淋巴细胞、肠系膜淋巴结及小肠PP结T淋巴细胞表型的变化。结果以rCT-B为佐剂的鼠疫F1-V重组蛋白黏膜疫苗滴鼻免疫后，能够诱导血清中IgG、IgA抗体比正常对照组显著升高（P〈0．01），同时诱导鼻咽、肺、小肠和阴道内特异性黏膜抗体升高，尤其是肺和生殖道冲冼液内抗体升高极为显著（P〈0．01）。与单纯的F1-V组相比，不同剂量比例疫苗组都能诱导较高、较快的血清IgG、IgA和黏膜sIgA，其中1：2疫苗组能诱导更强的系统免疫和黏膜免疫，但是相比之下，5：1疫苗组是最合适的免疫剂量。结论rCT-B佐剂不仅能提高鼠疫F1-V黏膜疫苗的系统全身免疫应答，还能促进诱导呼吸道、消化道和生殖道等局部黏膜sIgA抗体，增强局部免疫应答，提示rCT-B佐剂能显著提高鼠疫感染的免疫应答作用，这为下一步疫苗的免疫保护评价奠定了基础。     

水通道蛋白3在人胎盘和胎膜中的表达及分布

目的 研究正常妊娠晚期人胎盘和胎膜水通道蛋白3(AQP3)的表达及分布.方法 收集5例正常足月妊娠剖宫分娩的胎盘和胎膜样本,用RT-PCR测定AQP3 mRNA在胎盘和胎膜组织中的表达;用Western印迹和免疫组织化学方法检测AQP3蛋白质水平在胎盘和胎膜的表达.结果 RT-PCR显示AQP3 mRNA在胎盘和胎膜组织均有表达.Western印迹结果显示胎盘组织在29 000左右有一特异性条带.免疫组织化学结果显示AQP3表达于合体滋养细胞,而在羊膜上皮细胞未见表达.结论 AQP3在胎盘母儿液体平衡中可能发挥重要作用.     

人类胚胎生殖细胞体外分化为心肌细胞的研究

胚胎生殖（EG）细胞是来源于胚胎原始生殖细胞（PGCs）的多潜能干细胞。采用无饲养层细胞、无细胞因子等的基础培养液（DMEM＋20％NBS＋0．1mM 2Me）培养EG细胞，部分在基础培养液添加10μmol／LRA＋0．75％DMSO或10μmol／L 5-氮胞苷（5-AZA）诱导人类EG细胞向心肌细胞分化，以检测其是否具有向心肌细胞自发分化的能力。9例（8．49％，9／106）胎儿EG细胞在体外分化得到20个节律性心脏跳动样细胞团，其搏动节律为20～120次／min，体外维持节律性搏动最短2d，最长至15d，呈PAS，Myoglobin，α-actin阳性；对K^＋、Ca^＋、肾上腺素等具有与在体心脏相似的反应性；透射电镜观察具有心肌细胞样结构。添加DMSO和RA或5-AZA诱导未得到跳动样心肌细胞，但可提高心肌α-actin免疫组织化学染色阳性率；表明人类胚胎生殖细胞具有向心肌细胞分化的潜能。     

口服鼠疫F1-V重组融合基因DNA活菌疫苗的构建及免疫原性研究

目的 构建携带鼠疫耶尔森菌F1-V融合基因的重组减毒沙门菌苗,口服免疫Balb/c小鼠检测其免疫原性,为口服鼠疫活载体DNA疫苗研究打下基础.方法 将F1-V融合基因克隆到真核表达载体asd-pVAX1,进一步依次将重组质粒转化减毒沙门菌X3730、X4550得到重组沙门菌X4550(asd-pVAX1/F1-V),提取重组质粒转染COS-7细胞并做免疫组化和Western-blot检测F1-V融合蛋白在细胞中的表达.以1×109CFU/只的剂量3次口服免疫Balb/c小鼠,ELISA方法检测血清中抗体水平.结果 构建的重组减毒沙门菌转染COS-7细胞后,免疫组化和Western-blot试验证明F1-V融合蛋白在细胞中得到了瞬时表达,ELISA检测到免疫小鼠血清有特异性抗体IgG产生.结论 构建的重组沙门菌能运送DNA疫苗到体内并成功释放质粒刺激机体产生特异性免疫应答,为口服鼠疫活载体DNA疫苗的黏膜免疫研究打下了基础.     

Toll样受体2在人胎盘和胎膜组织中的表达

目的 检测正常胎盘和胎膜组织中Toll样受体2(TLR2)的表达.方法 收集5例足月剖宫分娩胎盘和胎膜样本,运用RT-PCR法检测胎盘和胎膜组织中TLR2 mRNA的表达,运用免疫组织化学和Westen blot印迹方法检测TLR2蛋白质在胎盘和胎膜组织中的表达.结果 RT-PCR显示在mRNA水平,胎盘和胎膜组织中均有TLR2表达;Westen blot印迹显示TLR2抗体在胎盘和胎膜组织中相对分子质量为50000左右的位置有一条明显的条带;免疫组化研究显示TLR2在胎盘的合体滋养细胞、胎膜的羊膜上皮细胞及平滑绒毛膜滋养细胞中有表达.结论 TLR2在人胎盘和胎膜组织中的表达,提示其在妊娠期先天性免疫中可能发挥重要作用.     

原发性红斑性肢痛症致病基因研究进展

原发性红斑性肢痛症是一种罕见的常染色体单基因遗传病，国际范围内仅报道过6个家系及一些散发病例。该病虽无生命危险但严重影响患者生活，以肢端阵发性剧烈灼烧样疼痛以及对温度敏感为主要特征，但其发病机制一直不明。Drenth等通过家系分析于2001年将原发性红斑性的致病基因定位于Zq31-q32。在此基础上，我国学者杨勇等进一步研究发现该病的致病基因可能为1个钠离子通道基因scn9a，其他研究组针对该基因进行基因敲除后的结果也提示了该可能性。然而，由于该疾病可能具有遗传异质性，该致病基因尚未在其他家系中得到确证。更深入的分子遗传学研究结果将为原发性红斑性肢痛症的正确诊断和合理治疗提供依据。     

基于组合评价法的公立医院大型医用设备购置评价分析

目的:基于层次分析法(AHP)和模糊综合评价法的组合评价法,量化公立医院大型医用设备购置评价内容和方式。方法:通过分析公立医院购置大型医用设备现状,选择数字减影血管造影(DSA)设备购置前评价论证为实例,采取主观法中的AHP和客观法中的模糊综合评价法组成组合评价法,运用组合评价法建立数学模型,组建论证小组,确定因素集、评价集、判断矩阵和评价矩阵4要素,并进行量化打分,计算出是否需购置DSA设备。结果:通过确定判断矩阵、计算特征向量和评价一致性等数学计算,设备前期论证的结果属于很好的隶属度最大(0.4689224),根据隶属度最大原则,确定应当购置DSA设备。结论:基于组合评价法的大型医用设备购置评价模型,可为医院决策提供客观、可靠和符合实际的设备购置需求结论。     

不同年龄肥育驴肉的营养成分分析

对断奶、1.5岁、成年不同年龄驴分7组采用不同营养水平饲喂63～113 d,各组将接近平均体重的3头屠宰,取股二头肌、眼肌和臂三头肌肉样进行营养成分测定,结果表明.驴肉与其它肉类相比为高蛋白、低脂肪、低热能肉品,蛋白质质量优异,全价性好;断奶、1.5岁、成年退役驴肉中各成分平均值(％)为干物质(25.28±2.67),粗蛋白(21.19±2.06),粗脂肪(2.38±2.18),粗灰分(1.10±0.12),热能(1.441±0.129) kcal/g;随年龄增加,驴肉中干物质、脂肪、能量上升,粗蛋白、灰分下降.驴肉氨基酸总量平均为20.08g/100g,含量比《食品成分表》所列(15.99～19.57g/100g)要高;其中精氨酸、酪氨酸、组氨酸与猪肉、马肉相比差异达极显著水平(P＜0.01);限制性赖氨酸与猪肉、羊肉、牛肉相比差异也达极显著水平(P＜0.01);鲜味氨基酸中的天门冬氨酸和谷氨酸试驴驴肉与猪肉、羊肉、马肉相比差异也达极显著水平(P＜0.01);衡量肉品蛋白质质量的色氨酸驴肉(0.662g/100g)远高于其它家畜肉中含量.1.5岁试驴驴内不饱和脂肪酸和必需脂肪酸含量(％)平均为(61.09±0.71),必需脂肪酸(亚油酸、亚麻酸、花生四烯酸)含量(％)平均为(21.25±3.73);两者与猪肉、牛肉相比差异达极显著水平(P＜01),后者与羊肉相比差异也达显著水平(P＜0.05);试验数据同时表明,不饱和脂肪酸和必需脂肪酸含量1.5岁试驴驴内股二头肌均高于臂三头肌和眼肌.1.5岁试驴眼肌肉中胆固醇含量较低为79.20 mg/100g,比猪肉、羊肉、牛肉含量低;不同部位脂肪中胆固醇含量不一.1.5岁试驴眼肌肉中维生素含量与其它家畜肉相近,而微量元素则较多.     

不同年龄和营养水平下驴肥育性能测定

选择断奶佳米驴、1.5岁驴及当地成年退役驴70头,用传统饲料或全价料加不同粗料肥育,分7个小群,饲喂63 d或113 d。结果表明,63 d日增重1.5岁驴（444.44～560.16）g,成年退役驴（611.11～670.15）g,断奶驴为（185.17～292.86）g;83 d日增重,1.5岁驴（423.42～566.08）g,成年退役驴（493.75～562.00）g。1.5岁驴日增重,以A2全价料加部分苜蓿效果好,与传统料A1群差异极显著（P<0.01）,与全价料不加部分苜蓿而加青贮A3群差异显著（P<0.05）。优质肉比例,饲养63 d断奶驹平均为57.03%,饲养113 d,1.5岁佳米驴平均为57.52%,成年退役驴平均为61.92%。1.5岁驴和成年退役驴,屠宰率分别为,43.37%～50.94%,46.64%～50.63%;净肉率分别为34.85%～38.32%,36.03%～36.14%;骨肉比3.19%～4.02%,4.00%～5.45%;脂肉比20.70%～22.65%,4.09%～8.01%。皮厚和皮重,饲养63 d断奶驴分别为（0.60～0.75）cm,（8.27～9.00）kg;肥育113 d 1.5岁佳米驴分别为（0.79～0.99）cm,（9.50～10.33）kg,退役成年驴分别为（0.85～1.04）cm,（10.00～11.60）kg,呈现皮厚随年龄增厚,皮重随年龄营养增重趋势。试驴内脏重量随年龄增大而增加,同龄不同营养群间内脏重量互有高低。试验认为,断奶驴不宜肥育肉用;成年退役驴以63 d强度肥育较好;1.5岁驴可短期（63 d,83 d）强度肥育生产优质驴肉,或肥育数月生产高中档驴肉。     

金铁锁根中2个新的麦芽酚苷类化合物

目的研究金铁锁Psammosilene tunicoides根的化学成分。方法经硅胶、Sephadex LH-20凝胶、ODS反相硅胶等柱色谱方法进行分离,并运用NMR、HR-ESI-MS等波谱学方法进行化合物的结构鉴定。结果从金铁锁根80%乙醇水提取物中分离得到2个麦芽酚苷类化合物,分别鉴定为麦芽酚-3-O-[6-O-(4-O-α-L-吡喃鼠李糖基)-Z-p-香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)和麦芽酚-3-O-[6-O-(4-O-α-L-吡喃鼠李糖基)-E-p-香豆酰基]-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)。结论化合物1和2为新的麦芽酚苷类化合物,分别命名为金铁锁酚苷A和B。