药物非临床研究常规检测指标与计算机系统直连

药物非临床研究中常用检验检测数据与计算机系统无缝直连,对研究资料的保真性,不易更改性,减轻工作量,资料存储都显示出其计算机信息系统的优越性.     

大安颗粒的抗惊作用和对获得性记忆障碍影响的实验研究

大安颗粒 (实验用其流浸膏 ,棕褐色 ,3 .0g(生药 )·ml 1)由成都中医药大学科技中试中心提供 ,以生理盐水配制成 1 3 5 %、67.3 %和 3 3 .7%浓度供实验用。　　 1、将一级SR小鼠以YLS 1A多功能小鼠自主活动记录仪输出方波电流刺激小鼠双耳出现发愣、竖尾、惊叫、跳动或伴有抽搐等持续 1 0”以上的模型小鼠1 0 0只 ,按体重、性别分为阴性对照组 (灌服生理盐水 )、阳性对照组 (灌服 0 .5 6%卡马西平溶液 3 0ml·kg 1,即 1 68mg·kg 1) ,高、中、低大安颗粒 (流浸膏 )组分别以 1 3 5 %、67.3 %和 3 3 .7%浓度灌服 3 0ml·kg 1(相当临床拟日…     

肠出血性大肠杆菌O157:H7溶血素保护性片段(HlyAN436)克隆、表达、初步纯化与生物学活性研究

目的获取重组表达肠出血性大肠杆菌O157的溶血素（Ehx）保护性片段，并研究其基本的生物学及免疫学特性。方法PCR法从EHECO157-SMR2菌株克隆O157：H7的HlyA亚单位的N端片段（436个氨基酸），T-A克隆后构建表达载体pET-28a（＋）-HlyAN436，测序鉴定后转化到E.coliBL21（DE3），IPTG诱导表达，初步纯化后免疫动物。结果Hly-AN436成功地在大肠杆菌表达系统表达，动物实验证实其具有良好的免疫原性和反应性以及一定的免疫保护性。结论Hly-AN436蛋白有可能用于肠出血性大肠杆菌O157基因工程疫苗的研究。     

不同剂量的甘露醇对血浆渗透压的影响

目的 观察不同剂量甘露醇对血浆渗透压的影响，以指导临床合理用药。方法 33例颅内压增高的病人随机分成二组，第1组17例，给予20％甘露醇0．5g/kg；第2组16例，给予20％甘露醇1．0g/kg，两组均6-8h输注一次。监测两组病人每日首剂甘露醇前、后的血浆渗透压数值。结果 两组病人甘露醇使用前、后血浆渗透压差值比较有统计学意义（P〈0．01）。连续多日反复使用甘露醇后，可引起血浆渗透压基础值逐渐增高，且使用时间越长，血浆渗透压基础值越高。结论 对于甘露醇，切莫盲目使用大剂量。从安全的角度考虑，提倡使用小剂量的甘露醇，有条件者应在用药期间监测血浆渗透压。     

含吐温-80的中药注射剂对2例猴血压、心电图影响的初步观察

目的:观察含吐温-80的中药注射液对麻醉猴血压和心电图的影响.方法:给两个品种麻醉猴静脉滴注含吐温-80的青银注射液,监测血压和心电图的变化.结果:含吐温-80的青银注射液对麻醉猴的血压和心电图无明显影响.结论:猴对吐温-80引起过敏反应可能不敏感.     

MMP-2及CD147在侵袭性垂体腺瘤中的表达及其相互关系的研究

目的检测基质金属蛋白酶(MMP-2)及CD147在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达,以探讨其与肿瘤侵袭发生的关系及两者之间的相关性。方法用免疫组化SP法和RTPCR方法对55例垂体腺瘤患者标本MMP2及CD147的表达进行检测。结果免疫组化显示,侵袭性垂体腺瘤的MMP-2强阳性及阳性表达率明显高于非侵袭性垂体腺瘤(65.6%和93.8%,13.0%和43.5%,P<0.05),CD147强阳性及阳性表达率明显高于非侵袭性垂体腺瘤(53.1%和96.9%,21.7%和52.2%,P<0.01)。侵袭性垂体腺瘤组MMP-2及CD147mRNA的表达(1.126±0.081,0.887±0.043,P<0.01),明显高于非侵袭性垂体腺瘤组(0.425±0.083,0.179±0.051,P<0.01)。侵袭性腺瘤组中MMP2与CD147的表达成正相关(r=0.73,P<0.05),非侵袭性腺瘤组中MMP-2与CD147的表达无明显相关性(r=0.34,P>0.05)。结论MMP2及CD147的高表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关。MMP-2和CD147可以作为垂体腺瘤侵袭性的2项有效指标。在肿瘤侵袭过程中CD147与MMP-2的产生关系密切。     

糖尿病2545例血脂检测结果与临床分析

目的　总结糖尿病患者血脂异常的规律 ,分析血脂异常与某些慢性并发症的关系。方法　建立计算机管理糖尿病资料库 ,血脂测定及并发症筛查。结果　 2 5 4 5例糖尿病患者中 ,血脂 4项正常组 882例 ,占 35 0 % ;血脂异常16 6 3例 ,占 6 5 0 % ,其中总胆固醇 (TC)和甘油三酯 (TG)都升高者占 2 2 8%。高血压检出率正常组 39 2 % ,血脂异常组4 8 3% ,其中高TC和高TG组高达 5 3 2 %。大血管病变的检出率与血脂正常组 (2 4 0 % )比较 ,高TC高TG组为33 6 % ,P <0 0 1。肾脏病变检出率血脂正常组为 2 3 2 % ,高TC组为 2 9 3% ,P <0 0 5 ;高TC高TG组为 30 6 % ,P <0 0 1。高TC组黄斑病变检出率较高 ,为 10 2 % (P <0 0 5 )。神经病变的检出率在血脂异常各组与血脂正常组均无显著性差别。结论　本组糖尿病患者血脂异常的发生率高达 6 5 % ,血脂异常以TC和TG均升高较多。高血压的检出率与血脂异常有一定相关性 ,舒张压升高更明显     

EHEC O157:H7志贺毒素ⅡA1亚单位蛋白的构建表达与免疫原性鉴定

目的 构建表达GST-STX2A1融合蛋白并鉴定其免疫原性.方法 通过PCR反应从EHEC O157:H7 EDL933标准株菌中扩增STX2A1基因,将此基因克隆到GST融合蛋白原核表达载体PGEX-6p-1,得到阳性克隆PGEX-6p-1/STX2A1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导GST-STX2A1融合蛋白的表达,采用亲和层析纯化该蛋白,SDS-PAGE分析其表达量、表达形式和纯度;用纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,免疫双向扩散鉴定抗血清效价,Western blotting鉴定抗血清的特异性.结果 成功构建重组质粒PGEX-6p-1/STX2A1,经DNA测序证实插入序列与设计完全一致,并在大肠杆菌中表达出Mr约为5.3×104大小的可溶性目的 蛋白,经亲和层析纯化后纯度可达90%,免疫Balb/c小鼠产生的抗血清效价为1:16,Western blotting表明可与天然STx2A蛋白反应.结论 在大肠杆菌中成功表达了可溶性的GST-STX2A1融合蛋白,该蛋白具有较好的免疫原性,为O157:H7亚单位疫苗及制备抗STX2A1的单克隆抗体提供了必要的物质基础.     

EHEC O157:H7志贺样毒素Ⅱ结合亚单位Stx2B的基因克隆、表达与纯化

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157H7志贺样毒素B亚单位(Shiga liketoxin 2B,Stx2B),并对其初步纯化.方法设计引物采用PCR法自EHEC O157H7基因组扩增志贺样毒素B亚单位的编码基因stx2b,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22b(+)-stx2b,经测序鉴定后转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,以Tricine-PAGE和Western blot分析目的蛋白的表达,并采用固相镍离子亲和层析纯化重组蛋白.结果扩增的stx2b基因约210 bp;原核表达质粒pET-22b(+)-stx2b经酶切和测序鉴定与预期序列一致;并在E.coli BL21(DE3)中得到高效可溶性表达,蛋白表达率约30%;PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(Mr)约7×103;经固相镍离子亲和层析纯化后,蛋白纯度可达90.1%.结论EHEC O157H7志贺样毒素B亚单位的高效表达与初步纯化,有利于进一步的生物学性质研究.     

EHEC O157:H7志贺样毒素Ⅱ(Stx2)的克隆表达与活性研究

目的克隆表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7志贺样毒素Ⅱ(Shiga like toxinⅡ,Stx2),并鉴定其生物学活性。方法采用PCR法自EHEC O157：H7基因组扩增志贺样毒素Ⅱ的编码基因stx2,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-11c(+)-six2,经测序鉴定后转化E．coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,以SDS-PAGE、Western blot分析目的蛋白的表达。以EHEC O157：H7野生菌株作对照,通过对HeLa细胞的细胞毒作用及对小鼠攻毒实验,鉴定重组蛋白的生物学活性。结果扩增的stx2基因约1230bp；原核表达质粒pET-11c(+)-stx2经酶切和测序鉴定与预期序列一致；并在E．coli BL21 (DE3)中得到表达,蛋白表达率约25％；PAGE初步测定目的蛋白的相对分子质量(M_r)约72×10~3；重组蛋白Stx2对HeLa细胞具有细胞毒作用,CD_(50)为35pg/ml；Stx2对小鼠致死剂量LD_(100)为10μg。结论成功克隆并表达了Stx2重组蛋白,为探讨O157：H7菌的感染机制及其防治研究奠定了一定的基础。