血小板裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞生长的影响

背景:血小板裂解液是将浓缩血小板进一步裂解后所获得的液体成分,含有多种生物活性因子.有研究认为血小板裂解液可促进成骨细胞的增殖,而其对骨髓间充质干细胞生物学功能的影响还不太了解.目的:探讨血小板裂解液对大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖的影响.设计、时间及地点:独立样本观察,于2007-09/2008-01在山西省医用组织库完成实验.材料:清洁级成年健康Wistar大鼠8只.方法:取2只大鼠股骨,全骨髓培养法传代扩增骨髓间充质干细胞.自6只大鼠心内采血,采用3次离心结合反复冻融法制备血小板裂解液.取第5代骨髓间充质干细胞,以含10%胎牛血清的L-DMEM/F12作为基础培养基组,在此基础上分别加入血小板裂解液至终浓度为1%和5%作为条件培养基组.主要观察指标:ELISA法测定血小板裂解液中生长因子含量.CASY细胞分析仪计数活细胞.双缩脲法全自动生化分析仪检测细胞总蛋白含量.倒置显微镜动态观察细胞形态变化与生长状况.结果:[1]血小板裂解液中的血小板衍生生长因子、转化生长因子B 1、胰岛素样生长因子1和血管内皮细胞生长因子含量分别为(300±30), (140±25), (80±35), (70±20)ng/L.[2]自培养第3天开始,条件培养基组活细胞数均明显高于基础培养基组(p<0.05),且含5%血小板裂解液的条件培养基组升高幅度尤为显著,于第3天达到对数生长期,比基础培养基组提前约1d,细胞总数在第4,9天时达基础培养基组的近3倍.[3]培养1周后条件培养基组每106个细胞中的总蛋白含量均显著高于基础培养基组(P<0.05).[4]骨髓间充质干细胞在不同浓度血小板裂解液培养条件下,细胞形态基本一致,多为长梭形,类似于成纤维细胞.结论:血小板裂解液是多种生长因子的承载体系,具有丝裂原功效,可在体外促进大鼠骨髓间充质干细胞的生长增殖,且该效应存在一定程度的剂量依赖性.     

重视外科引流物的理化特性和生物学效应

外科引流经过长期的临床实践，积累了丰富的经验，建立了引流的原则。但是，现在临床上仍然存在着某些引流不当的问题。某些方面学术界可能仍存在着争论和分歧，不属本文讨论的范畴。为更好的应用外科引流，达到临床预期目的，防止和减少引流不当带来的问题，现简要回顾引流物的理化特性，外科外引流物和引流物的生物学效应。     

Klotho蛋白在肾脏疾病中研究进展

肾脏疾病已成为威胁人类健康的公共卫生问题之一,其发病机制尚不非常清楚,治疗手段有限.Klotho蛋白是体内Klotho基因编码的一种单向跨膜蛋白,主要在肾小管上皮细胞中表达,可在血液和尿液中检测到.Klotho蛋白具有多种生物学效应,包括调节矿物质代谢、抗凋亡和抗衰老等[1].近年的研究提示Klotho蛋白水平降低可能在急性肾损伤（acute kidney injury, AKI）的发生发展中起着重要作用,并有可能作为AKI诊断和判断预后的一个新的标志物[1].同时Klotho蛋白对钙磷代谢的调节作用也为慢性肾脏病（chronic kidney disease, CKD）的治疗提供了新的方向.本文就近年来Klotho蛋白在肾脏疾病发病机制、诊断和治疗等方面的研究现状作一综述.     

抗-HIV酶联免疫检测的HOOK效应及对策

目的 探讨ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV HOOK效应及对策。方法 分别使用双抗原夹心一步法、双抗原夹心二步法检测抗-HIV阳性高值标本及倍比稀释后的标本，比较结果的差异。结果 双抗原夹心一步法的HOOK效应十分明显，双抗原夹心二步法无此现象。结论 双抗原夹心二步法是减少HOOK效应的有效方法。血站系统检测HIV抗体时，至少应选用一种二步法试剂，以避免HOOK效应造成的强阳性标本漏检。     

针刺预处理对全脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡的影响

目的:观察手针和电针预处理对全脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡的影响,并与缺血预处理结果进行比较。方法:①实验于2005-02/2005-9在黑龙江中医药大学实验中心完成。①选用雄性健康Wistar大鼠108只。采用4-动脉阻断法复制大鼠全脑缺血模型。按随机抽签法将大鼠分为6组(每组18只):正常组(正常饲养,不予任何处置),假手术组(仅暴露双侧椎动脉及双侧颈总动脉),脑缺血组(热凝双侧椎动脉及动脉夹夹闭双侧颈总动脉10min),脑缺血预处理组(热凝双侧椎动脉及动脉夹夹闭双侧颈总动脉3min,24h后全脑缺血10min),手针预处理组(术前7d用0.25mm×40mm毫针针刺大鼠双侧足三里穴,直刺进针5mm;双侧曲池穴,直刺进针4mm,0.25mm×25mm毫针针刺百会穴,平刺约3mm。针刺预处理组间歇5min捻转一次,平补平泻,1次/d,干预30min,预处理后24h全脑缺血10min),电针预处理组(术前7d采用全能脉冲电疗仪,对足三里、曲池穴进行电针针刺,频率为1Hz,电压为2V,强度以肢体轻微抖动为度,1次/d,干预30min。预处理后24h全脑缺血10min)。②术后24,48,72h各组各处死鼠6只,取脑,采用细胞凋亡原位末端标记法检测大鼠脑组织的细胞凋亡情况。③组间计量资料比较采用方差分析。结果:大鼠108只均进入结果分析。大鼠大脑皮质及海马CA1区细胞凋亡数:脑缺血预处理组、手针预处理组、电针预处理组、假手术组、正常组明显少于脑缺血组(P<0.05);电针预处理组大鼠大脑皮质细胞凋亡数明显少于手针预处理组(P<0.05),与脑缺血预处理组相近。结论:针刺预处理可以通过抑制神经细胞凋亡,且电针干预效果与脑缺血预处理相近,优于手针干预后。     

参丹健胰丸改善2型糖尿病胰岛素抵抗的机理研究

目的:观察具有益气养阴活血功效的中药参丹健胰丸,对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗的改善作用,并初步探讨其作用机理.方法:采用小剂量尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)加高热量饮食方法,建立类似于2型糖尿病(DM)的大鼠模型40只,分4组,每组10只,正常对照组10只.正常对照组:自由饮水、摄食.模型对照组:自由饮水、摄食.参丹健胰丸组:每日以参丹健胰丸按体重0.6g/100g灌胃.二甲双胍组:每日以二甲双胍按体重0.15g/100g灌胃.参丹健胰丸合二甲双胍组:每日以二甲双胍按体重0.15g/100g及参丹健胰丸按体重0.6g/100g灌胃.测定各组大鼠治疗前后的糖耐量及治疗后的血清胰岛素水平(Ins)、胰岛素敏感指数(ISI).结果:参丹健胰丸可以改善2型糖尿病模型大鼠的糖耐量;降低2型糖尿病模型大鼠的血胰岛素水平;增加2型糖尿病模型大鼠的敏感性.结论:参丹健胰丸对2型糖尿病模型大鼠胰岛素抵抗具有整体防治功能.推测其机理为参丹健胰丸可改善胰岛β细胞的功能,增强组织对胰岛紊的敏感性,从而有效发挥药物改善胰岛素抵抗的综合效应.     

猪后肢枪弹软组织贯通伤致心血管远达效应的实验研究

目的通过制作猪后肢枪弹软组织贯通伤模型,利用计算机容积成像(volume computed tomography,VCT)观察致伤后心脏形态学改变,结合相关血管活性物质(血管紧张素Ⅰ、血管紧张素Ⅱ、内皮素)及病理、电镜观察,分析枪击对猪心血管系统的影响,以期为平战时肢体枪弹伤伤病员的早期全面救治提供参考依据。方法 7只健康雌性平原猪枪击后肢致软组织贯通伤,分别于枪击前及枪击后瞬时、枪后5’、30’及60’行VCT检查,并抽取猪耳缘静脉血,分别进行血管紧张素Ⅰ(AngiotensinⅠ,AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)及内皮素(endothelin,ET)检测。结果①枪击后冠脉血管直径在短时间内即会发生改变,以枪击后30min改变最为显著,表现为心脏冠脉VCT在枪击后显影质量很差,可出现冠脉血管的痉挛或者局部的狭窄、或者血管中断不连续,管壁显示不清等表现,猪冠状动脉图像重建质量评价在枪击后瞬间基本在II级以上,仅1(7)只猪的冠脉血管图像重建质量评价为I级。且在枪击30min后冠脉直径最小,之后冠脉直径逐渐恢复,到枪击后60min可恢复到接近枪击前的水平;②枪击后AngⅠ在枪击前的水平与其他4个时间点比较发生显著变化(P<0.05),枪后60’与枪后5’发生明显变化(P<0.05);AngⅡ:枪击前与枪后30’比较,具有统计学意义(P<0.05);ET:枪击前与枪击瞬时、枪后5’及30’之间变化明显,枪击后60’与枪击瞬时、枪击后5’及30’之间有变化(P<0.05)。结论猪后肢枪弹软组织贯通伤后可致心脏远达效应,在致伤全过程中,AngⅡ及ET起了重要作用;致伤瞬间,由于应激反应及冲击波的血流扰动影响,可导致血管内皮受损;VCT在心脏冠状动脉扫描对心脏远达效应损伤早期诊断有一定的参考价值。     

隐源性脑脓肿的CT诊断及临床分析

本文报导隐源性脑脓肿22例,均经系统抗炎治疗后有效,绝大多数痊愈,其中部分加用抗囊虫病药物治疗,多数病例以症状性癫痫为主要症状,主要CT征象为：平扫示边界较清楚的低密度区,灶中所见高密度灶,增强后见环状强化,占位效应不明显.     

TJU103体外诱导造血干细胞移植的免疫耐受

目的:前期研究表明,吲哚亚甲基异烟腙(简称TJU103)可以明显降低异基因造血干细胞移植小鼠移植物抗宿主病的发生率和程度,明显延长小鼠移植后的生存期.实验拟观察TJU103诱导造血干细胞移植免疫耐受和对移植物抗白血病的影响,探索一条既能降低移植物抗宿主病又能保留移植物抗白血病的移植途径.方法:实验于2007-07/10在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.①实验材料:人急性髓系白血病细胞株KG1a由中国医学科学院血液学研究所宋增璇教授惠赠.10份自愿捐献的健康人外周血白细胞由广州市中心血站提供,等分为供者与受者.②实验方法:采用梯度密度沉淀法常规分离人外周血单个核细胞.以供者外周血单个核细胞作为反应细胞,受者正常外周血单个核细胞作为刺激细胞,体外建立异基因造血干细胞移植中供、受者间的单向混合淋巴细胞反应体系,应用TJU103阻断CD4 T细胞激活的抗原信号通路,设单独刺激细胞和反应细胞对照以及1640完全培养基空白对照.③实验评估:于培养第1、3、5天应用MTT检测TJU103对供者淋巴细胞的增殖活性的影响,于第5天用乳酸脱氢酶释放法分别检测10∶1, 20∶1,40∶1效靶比时供者淋巴细胞对受者单个核细胞和急性髓系白血病细胞KG1a的细胞毒活性影响,同时采用流式细胞仪检测CD4 CD25 T细胞的百分比.结果:第3天和第5天实验组A值低于对照组 (P < 0.05).单向混合淋巴细胞5 d后实验组各效靶比供者T细胞杀伤受者外周血单个核细胞的活性明显低于对照孔 (P < 0.05);二者对KG1a细胞的杀伤活性差异不显著 (P > 0.05).TJU103对供者CD4 CD25 T细胞无影响.结论:TJU103降低T淋巴细胞增殖反应的同时并不影响其抗白血病效应,有望用于临床异基因造血干细胞移植中移植物抗宿主病和移植物抗白血病的免疫调节.     

肿瘤细胞“温伯格效应”及其相关检测的研究进展

自从Otto Warburg于1920年观察到肿瘤细胞倾向于糖酵解的代谢改变现象以来,肿瘤的代谢重组一直是人们研究的热点。2011年,肿瘤细胞的代谢重组(即"温伯格效应")被认为是肿瘤十大特征之一,相关检测技术和理论也在不断发展。该文归纳肿瘤细胞的"温伯格效应"及其相关的检测方法的研究进展,旨在为今后该领域的研究提供依据。