基于高通量测序技术研究药食两用薏苡仁中污染真菌多样性

目的:调查药食两用薏苡仁中污染真菌多样性,为其安全使用提供参考依据。方法:收集薏苡仁样品18批,提取真菌DNA并扩增ITS2序列,基于Illumina MiSeq PE250平台进行高通量测序。结果:共检测到4门18纲44目99科149属的真菌,子囊菌门Ascomycota是最优势菌门,镰刀菌属Fusarium(3.05%~60.32%)是属水平最优势属,其次是曲霉属Aspergillus(2.20%~45.44%)、白僵菌属Beauveria(0.07%~63.21%)、链格孢属Alternaria(0.80%~11.92%)、Arachnomyces(0.03%~39.36%)和青霉属Penicillium(0.24%~8.03%)。此外,共检测到5种潜在产毒真菌,分别是烟曲霉A.fumigatus、土曲霉A.terreus、梨孢镰刀菌F.poae、囊状青霉P.capsulatum和展青霉P.paxilli。结论:高通量测序技术可以快速有效地检测薏苡仁中污染真菌种类,为薏苡仁污染真菌毒素提供风险预警。     

基于灰色关联度分析和聚类分析的3种滇产重楼抗肝癌作用谱效关系探索

目的:研究长柱重楼、滇重楼和南重楼的HPLC指纹图谱与其抗肝癌作用的谱效关系,为明确重楼抗肝癌作用的物质基础提供实验依据。方法:采用HPLC建立3种重楼提取物的指纹图谱,流动相乙腈(A)-水(B)梯度洗脱(0～10 min,20%A; 10～20 min,20%～25%A; 20～30 min,25%～30%A; 30～40 min,30%～35%A; 40～50 min,35%～40%A; 50～60 min,40%A; 60～75 min,40%～45%A; 75～80 min,45%～60%A),流速0. 9 m L·min~(-1),检测波长203 nm;利用噻唑蓝(MTT)比色法测定3种重楼提取物对肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用,计算半数抑制浓度(IC_(50));运用聚类分析(HCA)和灰色关联度分析(GRA)研究3种重楼指纹图谱和抗肝癌作用的关系,找出对抗肝癌作用贡献较大的成分。结果:在3种重楼的HPLC指纹图谱中,确定其中11个色谱峰为共有峰。作用时间72 h时长柱重楼、滇重楼、南重楼的IC_(50)分别为148. 33,178. 87,208. 09 mg·L~(-1),其中长柱重楼的抗肝癌活性最强。灰色关联度结果显示,滇重楼共有峰中关联度较高的为1～10号峰,长柱重楼共有峰关联度较高的为1～7号峰,南重楼共有峰中关联度较高的为1～4,6～10,N1号峰,与IC_(50)关联度均0. 7。各重楼变量的聚类分析结果显示,可与IC_(50)聚为一类的色谱峰的关联度均 0. 7。结论:建立了3种重楼的HPLC指纹图谱,重复性良好。3种重楼中的1～4,6和7号色谱峰对抗肝癌药效贡献最大。     

基于MAPKs和NF-κB信号通路的麻黄-桂枝药对抗炎作用机制研究

目的:考察麻黄-桂枝药对对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症反应的影响及其分子机制。方法:体外培养RAW264.7细胞,CCK8法确定麻黄-桂枝作用的最适浓度,设定正常对照组、模型对照组(LPS组)、实验组(25、50、100、200μg/mL的麻黄-桂枝+LPS组),实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)检测iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA的表达,Western blot法检测MAPKs和NF-κB通路中关键蛋白的表达水平。结果:麻黄-桂枝作用的最适浓度为25μg/mL～200μg/mL。与正常对照组比较,模型对照组NO、PGE_2、TNF-α、IL-6含量显著升高,iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,麻黄-桂枝100μg/mL～200μg/mL组iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6 mRNA表达水平显著下降(P<0.05或P<0.01)。LPS致炎后,与正常对照组比较,模型对照组30 min P-p65、P-IκB-α、P-p38、P-ERK、P-JNK蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,麻黄-桂枝各组30 min P-p65、P-IκB-α、P-JNK蛋白表达显著降低、P-ERK显著升高(P<0.01)、P-p38无显著差异,12 h后P-p38和P-ERK表达明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:麻黄-桂枝可能通过对炎症细胞因子和促炎介质的调控来减轻炎症反应;并通过调控NF-κB信号通路中p65、IκB-α以及MAPKs信号通路中p38、ERK、JNK蛋白的磷酸化来发挥抗炎作用。     

昆仙胶囊联合糖皮质激素治疗狼疮性肾炎的临床研究

目的评价昆仙胶囊联合糖皮质激素治疗狼疮性肾炎(LN)的疗效及安全性。方法将66例LN患者随机分为环磷酰胺(CTX)组和昆仙组,每组33例。所有患者均给予泼尼松或等效激素治疗,在此基础上CTX组加用CTX 0.4 g/2周静脉滴注,昆仙组加昆仙胶囊1.8 g/d口服,疗程均为24周。治疗前及治疗后4、12、24周时使用系统性红斑狼疮疾病活动度评分表(SLEDAI)、24 h尿蛋白定量、血补体C3、C4评估LN病情活动情况,血清抗苗勒氏管激素(AMH)评价患者生殖系统毒性,同时记录药物不良反应发生情况。结果治疗后两组患者SLEDIA评分、24 h尿蛋白定量、AMH随时间逐渐降低,血清C3、C4逐渐升高(P0.05),具有时间依赖性;两组间同一时间SLEDAI评分、24 h尿蛋白定量、血补体C3、C4、血清AMH水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。昆仙组不良反应发生率[30.0%(9/30)]低于CTX组[56.7%(17/30),χ~2=4.344,P0.05]。结论昆仙胶囊和环磷酰胺联合糖皮质激素治疗LN疗效相似,可改善患者病情活动度,但昆仙胶囊不良反应更低。     

钙剂加小剂量肠溶阿司匹林治疗妊娠期高血压的临床效果分析

目的探究和分析钙剂加小剂量肠溶阿司匹林治疗妊娠期高血压临床效果。方法选取在2017年1月至2018年1月在我院就诊的106例妊娠期高血压患者,随机分为两组,每组53例,实验组采取钙剂加小剂量肠溶阿司匹林的治疗方法,对照组单纯采取钙剂治疗方法,对比两组的临床疗效、平均动脉血压、尿蛋白等数据。结果统计实验数据发现,与对照组相比,实验组的临床疗效较好,治疗有效率较高,以上数据差异具有统计学意义(P <0.05);实验组的平均动脉血压及尿蛋白降低幅度较大,以上数据差异具有统计学意义(P <0.05)。结论钙剂加小剂量肠溶阿司匹林治疗妊娠期高血压疾病的临床效果较好,值得在临床广泛推广。     

妇科肿瘤患者紫杉醇脂质体3周方案给药后关键药代动力学参数Tc>0.05与不良反应的相关性研究

目的探讨妇科肿瘤患者紫杉醇脂质体3周方案给药后关键药代动力学参数Tc> 0. 05(血药浓度0. 05μmol/L以上时间)与不良反应的相关性。方法选取2017月3月至2018年3月间苏州大学附属常州肿瘤医院收治的76例妇科肿瘤患者,采用纳米增强免疫比浊法检测紫杉醇脂质体化疗后18～30h的血药浓度,应用群体药物动力学模型计算Tc> 0. 05值,观察患者化疗后的不良反应。结果 76例患者共进行152次化疗,有效周期152次(Tc> 0. 05)。共发生不良反应76例次,包括骨髓抑制、胃肠道反应和乏力等,无因不良反应中断治疗者。Fisher精确检验结果:紫杉醇脂质体给药后Tc> 0. 05值<38h和Tc> 0. 05值≥38h两组患者的不良反应发生率中,乏力、恶心呕吐和便秘发生率比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);白细胞降低、中性粒细胞降低、血红蛋白降低和血小板降低发生率比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论通过计算紫杉醇脂质体Tc> 0. 05值可了解紫杉醇脂质体在患者体内的暴露情况,判断骨髓抑制的发生风险。