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91.
脑源性神经生长因子促进成年大鼠脑海马神经干细胞定向分化的浓度选择 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨培养基中表皮生长因子与血清两者浓度一定的条件下,不同浓度的脑源性神经生长因子对成年大鼠脑海马神经干细胞向神经元分化的影响。
方法:实验于2007—08在中国医科大学神经解剖研究室完成。①材料:清洁级雄性成年SD大鼠1只,由中国医科大学实验动物部提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。实验过程中应用的表皮生长因子、脑源性神经生长因子均由R&D公司提供:(多实验方法:无菌条件下分离大鼠脑海马组织,剪碎后胰蛋白酶消化,过滤、离心、弃上清,加入含2%B27、20μg/L表皮生长因子、20μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12无血清条件培养基体外培养神经干细胞,传至第4代时利用有限稀释法进行单克隆培养,100倍镜下克隆球直径约为200μm时制备单细胞悬液,稀释后滴加于96孔板内,设立两组,全量新鲜培养基组加入刚配置未使用过的DMEM/F12无血清培养基100μL,半量条件培养基组加入上述曾用于神经干细胞培养且含有其代谢产物的1/2DMEM/F12无血清培养基100斗L。(劲实验评估:观察神经干细胞的单克隆培养增殖情况。对克隆球行巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶、胶质原纤维酸性蛋白免疫细胞化学染色。按培养基中脑源性神经生长因子终浓度的不同将所培养细胞设立0,50,100,150,200μg/L组,各组均加入20μg/L表皮生长因子和体积分数为0.1的胎牛血清,1周后行神经元特异性烯醇化酶免疫细胞化学染色,检测神经干细胞向神经元分化情况。
结果:①神经干细胞单克隆培养结果:单克隆培养开始时神经干细胞增殖缓慢,半量条件培养基组细胞增殖速度快于全量新鲜培养基组,随着细胞数的增多,两组细胞增殖速度也相应加快,分别在培养后第12天、第15天形成直径为200μm的克隆球。②神经干细胞免疫细胞化学染色结果:单克隆培养后克隆球表达巢蛋白,诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质原纤维酸性蛋白均呈阳性表达:③各组神经干细胞分化为神经元的比例:与0μg/L脑源性神经生长因子组比较,50,100μg/L脑源性神经生长因子组的神经干细胞分化为神经元比例均明显增高(t=2.502~5.025,P〈0.05);而浓度为150,200μg/L时均无明显变化(t=0.420~1.857,P〉0.05)。
结论:向含有B27、表皮生长因子、碱·性成纤维生长因子的DMEM/F12条件培养基中加入20μg/L表皮生长因子和体积分数为0.1胎牛血清的情况下,脑源性神经生长因子促使神经干细胞向神经元分化的较佳浓度为50μg/L。 相似文献
92.
目的:探讨2型糖尿病视网膜病变患者TMS-4角膜地形图中反映角膜规则性的参数改变及其与视功能的关系.方法:选择2003-06/2004-06在解放军第三军医大学西南医院眼科和内分泌科就诊的2型糖尿病患者69例(133眼),均知情同意.分为2组,单纯性糖尿病视网膜病变组36例(70眼),增殖性糖尿病视网膜病变组33例(63眼).选择年龄、性别与入选病例相匹配的正常对照组34例(67眼).采用TMS-4角膜地形图系统拍摄角膜地形图像,记录角膜表面不对称性指数、角膜表面规则性指数、散光及平均角膜屈光度等参数.将荧光素钠滴入患者结膜囊,嘱患者眨眼数次后观察角膜荧光素染色的情况.将角膜分为4个象限,每个象限染色程度分为无、轻、中、重4级,计为0~3分,共计0~12分.并对角膜表面规则性指数、角膜表面不对称性指数与角膜荧光素染色程度的相关性进行分析.结果:单纯性糖尿病视网膜病变组36例,增殖性糖尿病视网膜病变组33例及正常对照组34例全部进入结果分析.①角膜表面规则性指数和角膜表面不对称性指数:增殖性糖尿病视网膜病变组、单纯性糖尿病视网膜病变组均显著高于对照组[(0.62&;#177;0.23;0.47&;#177;0.18;0.26&;#177;0.16);(0.49&;#177;0.22;0.37&;#177;0.12;0.26&;#177;0.10)(P<0.01)];增殖性糖尿病视网膜病变组显著高于单纯性糖尿病视网膜病变组(P<0.01).②角膜荧光素染色评分:增殖性糖尿病视网膜病变组与单纯性糖尿病视网膜病变组评分显著高于对照组[1.44&;#177;1.35,0.66&;#177;0.68,0.13&;#177;0.34,(P<0.01)];增殖性糖尿病视网膜病变组评分显著高于单纯性糖尿病视网膜病变组(P<0.01).③糖尿病患者的角膜表面规则性指数、角膜表面不对称性指数与角膜荧光素染色评分呈显著正相关性(r=0.754,0.480,P<0.01).结论:糖尿病患者可出现TMS-4角膜地形图参数变化,且角膜荧光素染色评分较正常对照显著增高,提示糖尿病患者角膜上皮细胞易发生缺损、脱落.TMS-4角膜地形图系统的角膜表面规则性指数和角膜表面不对称性指数等指标,可用于检测糖尿病患者的泪膜功能,评价角膜的光学质量. 相似文献
93.
内窥镜鼻窦手术治疗慢性化脓性鼻窦炎、鼻息肉 ,其优越性已为绝大多数学者所接受〔1、2、3〕,也得到了大多数相关患者 ,特别是曾多次接受传统手术未愈 ,最后经内窥镜鼻窦手术治愈者的欢迎。由于各种因素 ,内窥镜鼻窦手术后的部分患者亦发生并发症 ,其中窦腔粘连 ,窦口狭窄或窦口闭锁等是较常见也是较重的术后并发症之一 ,是手术后鼻窦炎症状不能改善的重要原因。为探讨内窥镜鼻窦手术治疗上颌窦炎的手术方式及可能机理 ,本文对 98例患有双侧上颌窦炎、鼻息肉患者 ,采用两种不同的手术方式开放上颌窦并观察其疗效 ,对可能的机理予以讨论。1 … 相似文献
94.
目的:采用扫描电子显微镜对不同清洁方式处理后的义齿树脂基托表面进行观察以分析不同清洁方式对义齿树脂基托的影响。方法:制作圆形树脂基托样本(14mm×14mm×3mm)16个,随机分为4组,A组为对照组置于清水中,B、C、D组为实验组,其处理方式及时间分别为:牙刷+清水组/30s、牙刷+牙膏组/30s、义齿清洁片溶液浸泡组/5min,重复该处理过程1080次。结果:结果显示B、C组树脂基托表面呈现条纹状摩擦沟及划痕结构改变,C组变化尤为明显,A组及D组无明显改变。结论:牙刷+牙膏清洁方式对义齿基托表面形态改变较为明显,义齿清洁片溶液浸泡对基托表面影响较小,几乎不会对其表面造成明显裂纹及划痕。 相似文献
95.
回顾性分析我们两所医院2 0 0 0年2月—2 0 0 4年3月收治的2 3例肺栓塞( pulm onary em bolism ,PE)患者的诊治情况,报告如下。1 临床资料1.1 一般资料:共2 3例,其中男19例,女4例;年龄2 5~78岁,平均5 8.5岁。慢性反复性PE3例,慢性栓塞性肺动脉高压5例,其余均为急性PE(其中临床诊断为大面积PE7例,次大面积和非大面积PE 8例)。1.2 基础疾病:下肢深静脉血栓或静脉炎15例次,心力衰竭6例次(其中肺源性心脏病2例,肥厚型心肌病1例,冠心病合并心房颤动2例,高血压合并冠心病1例) ,高血压病4例次,风湿性心脏瓣膜病3例次,手术后患者4例次(脑胶… 相似文献
96.
如何提高小儿静脉穿刺的成功率 总被引:6,自引:0,他引:6
静脉穿刺术是护士最基本的护理操作技术之一,小儿静脉注射是儿科疾病治疗和抢救中一项具有一定难度的基本操作。在儿科抢救中静脉穿刺做到一针见血,不仅能保证静脉通路的顺利开通,为抢救和治疗赢得宝贵时间,而且可以减少小儿的痛苦程度,以缓解家长的紧张焦虑情绪。在实践中,经常因为穿刺多次失败导致家长辱骂甚至发生其他更严重的行为,因此,如何做到小儿静脉注射一针见血显得格外重要,笔者几年来的护理经验证明,保持良好的心理状态是提高小儿静脉穿刺成功率的前提,穿刺部位选择得当是提高小儿静脉穿刺成功率的基础,针具选择以及持针用针方法得当是提高小儿静脉穿刺成功率的关键,这几个方面都处理得当,就可以大大提高小儿静脉穿刺的成功率。1如何选择静脉的穿刺部位1.1根据患儿年龄进行选择新生儿至3岁的小儿宜选用头皮静脉。小儿头皮静脉注射是儿科护理基本功,由于头皮静脉是网状分布,所以,顺行和逆行进针均不影响静脉回流。选用正中静脉,此静脉直、较大,不易滑动,易固定,其次额浅、颞浅静脉、耳后静脉等。3岁以上至12岁儿童宜选用四肢静脉。1.2根据患儿体型进行选择肥胖患儿与一般儿童有所不同,常常在头皮边缘才有细小静脉显露。因此,应沿着头皮边缘耐心寻找静脉,仔... 相似文献
97.
膝关节半月板因呈半月形而得名。由纤维软骨构成,分内、外侧半月板,位于股骨内、外髁和胫骨之间。半月板外缘较厚,与关节囊相连;内缘较薄,游离于关节中;上下面锐利光滑。内侧半月板较大呈C形,从后角向前角渐小;外侧半月板较小呈O形,前后角及中体部厚度和宽度相似。半月板与关节面透明软骨不同,在所有MRI成像序列中呈均匀低信号影,故易显示。如有半月板损伤,最适合MRI检查。半月板损伤常见,可为急性外伤、反复慢性损伤和退行性变等所致。急性外伤多呈纵形半月板撕裂,后二者损伤多为软骨细胞坏死,粘多糖基质增加等造成,退变区累及关节面,多呈横斜形、破碎状半月板撕裂。MRI表现,常用矢状面和冠状面检查,根据半月板形态、上下面边缘和内部信号等改变,以T2加权像最敏感,易于发现异常。半月板损伤分为五度:0度为正常表现;Ⅰ度为半月板内部片状高信号区小于1/2断面;Ⅱ度为高信号区大于1/2断面;Ⅲ度为高信号区呈纵形、横斜形、放射状,并达关节面;Ⅳ度为半月板碎裂,关节腔内可有游离体,或半月板部分或全部消失,呈明显高信号区,并伴有增生性骨关节病。 相似文献
98.
目的:探讨黄芩苷调节miR-126基因对乳腺癌细胞增殖的影响。方法:在乳腺癌细胞MCF-7内进行不同浓度黄芩苷与miR-126 mimic处理,使用CCK-8、MTT、Transwell与流式细胞术(FCM)分别检测细胞活性、生存率、侵袭与转移、凋亡率;免疫荧光技术(IF)、qRT-PCR和Western blot检测细胞中VEGF与TGF-β表达。结果:CCK-8、qRT-PCR、Western blot和IF检测结果表明,本实验中黄芩苷的适宜浓度为50μg/ml。过表达miR-126可显著影响MCF-7细胞的活性、迁移、侵袭和凋亡率。同时,与黄芩苷+NC组和miR-126 mimic组相比,黄芩苷+miR-126组MCF-7细胞活性显著降低。结论:黄芩苷可抑制乳腺癌细胞的增殖,可能与黄芩苷上调miR-126基因有关。 相似文献
99.
目的:总结1990-2001年我院收治的经病理证实的74例口腔颌面部脂肪瘤的诊断及治疗,提高对本病的认识。方法:复习74例病人的临床诊断及治疗资料。结果:脂肪瘤可发生于全身多处,发生于口腔颌面部的脂肪比较少见,可见为脂肪瘤、纤维脂肪瘤,血管脂肪瘤、粘液脂肪瘤。结论:口腔颌面部脂肪瘤应尽早手术治疗,同时手术切口要选择隐蔽部位,尽可能满足患者美观的需要。 相似文献
100.
由于SARS近距离传染性强、扩散快 ,且缺乏特异性的防治措施。高校是人群相对较密集的地方 ,一旦出现SARS疫情将会产生严重后果 ,为严防SARS进入学校 ,各高校均禁止学生出入校园 ,这一措施限制了学生的活动和人际交往范围 ,干扰了学生正常的生活秩序。为了解封闭式管理期间护生的心理状况 ,为突发疫情时期维持护生的心理健康提供依据。1 对象与方法1.1 对象 采用随机抽样法 ,从北京某医学院校随机抽取护理大专生 188名为研究对象 ,年龄 19岁~ 2 2岁 ,其中一年级学生96人 ,二年级学生 92名。共发放问卷 188份 ,回收有效问卷183份 ,有… 相似文献