固相萃取-高效液相色谱串联质谱测定人体尿液中芳香化合物代谢物的方法研究

  目的  建立固相萃取-高效液相色谱串联质谱（high performance liquid chromatographic tandem mass spectrometric, HPLC-MS/MS）同时测定尿液中8种芳香化合物代谢物（苯巯基尿酸、甲基马尿酸、N-乙酰基-S-苯基-L-半胱氨酸、苯乙醛酸、苯乙醇酸、对氨基酚、对硝基酚和1-羟基芘）的方法。  方法  取1 mL尿液,加入20 μL β-葡萄糖醛酸酶和1 mL乙酸铵缓冲溶液,在37 ℃孵箱中酶解20 h。酶解后混匀,取适量酶解液注入PrimeHLB 固相萃取柱净化,4 mL乙腈洗脱,洗脱液氮吹至干,用0.20 mL甲醇复溶后进样HPLC-MS/MS系统分析。高效液相色谱分离采用反相C₁₈色谱柱（2.1 mm×150 mm,3.5 μm）,流动相A为含体积分数0.1%甲酸的水,流动相B为甲醇,采用梯度洗脱,流速为0.2 mL/min。质谱采用正、负离子交替扫描方式,多反应监测（multiple reaction monitoring, MRM）模式检测,内标标准曲线法定量。  结果  8种代谢物在 1~100 ng/mL范围内线性良好,相关系数均大于0.995,测定的精密度（relative standard deviation, RSD）在0.05%～9.95%之间,8种代谢物的检出限在0.041~0.12 ng/mL范围内。将所建立的方法用于尿样分析,加标回收率为80.1%～114.0%。  结论  所建立的方法灵敏、快速、准确,适用于普通人群和职业人群的芳香化合物生物监测评估。     

无痛胃肠镜检查中应用依托咪酯-丙泊酚混合液的麻醉效果

 目的 探讨无痛胃肠镜检查中应用依托咪酯复合丙泊酚静脉麻醉的效果。方法 选取2019年2-5月就诊于解放军第三〇五医院符合麻醉评估要求的无痛胃肠镜检查患者240例,采用随机数字表法将入组患者随机分为丙泊酚组(P组)和依托咪酯-丙泊酚组(E-P组),每组120例,P组用丙泊酚静脉麻醉诱导,E-P组用依托咪酯复合丙泊酚静脉麻醉诱导,麻醉维持阶段两组均使用丙泊酚,麻醉期间全程监测各组患者的无创血压(non-invasive blood pressure, NBP)、心率(heart rate, HR)和脉搏血氧饱和度(saturation of pulse oximetry, SPO₂),并记录麻醉诱导时间、胃肠镜检查时间、患者苏醒时间,以及循环抑制、呼吸抑制、注射痛、肌阵挛等不良反应发生的数量。结果 与P组比较,E-P组的患者出现平均血压下降(11.67% vs. 24.17%,P=0.0184)、呼吸抑制(8.33% vs. 22.50%,P=0.0042 )和注射痛(5.83% vs. 50.83%,P<0.0001)的发生率均明显降低,两组间肌阵挛的差异也有统计学意义(P<0.05),但E-P组发生率较高(15.00% vs. 5.83%, P=0.0346)。结论 依托咪酯-丙泊酚混合液静脉麻醉在无痛胃肠镜检查中的应用更加安全、舒适,循环呼吸抑制和注射痛的不良反应明显减少。     

护士对围生期丧失产妇人文关怀培训体验的质性研究

目的 了解护士对围生期丧失产妇人文关怀培训的体验。方法 采用质性研究中的现象学方法,对某三甲妇产专科医院15名接受围生期丧失产妇人文关怀培训的护士进行半结构化访谈,运用Colaizzi七步分析法分析访谈资料,提炼主题。结果 归纳出3个主题：人文关怀能力的提升、护士职业素质的提高、和谐护患关系的构建。结论 人文关怀对围生期丧失产妇的身心恢复至关重要,人文关怀培训不仅可以深化护理内涵,提升护士的人文关怀能力,还可以改善围生期丧失产妇的就医体验。     

H3.3 G34W突变抗体在骨巨细胞瘤中的表达及诊断价值

目的探讨H3.3 G34W突变抗体在骨巨细胞瘤(GCTB)中的表达情况及其对GCTB诊断的作用。方法收集解放军东部战区总医院病理科2001年6月至2019年4月诊断的83例GCTB、18例动脉瘤样骨囊肿、23例软骨母细胞瘤和28例骨肉瘤病历资料,采用免疫组织化学EnVision法检测H3.3 G34W突变抗体和p63的表达情况。结果83例GCTB中,69例(69/83)显示H3.3 G34W阳性,阳性率为83.1%,H3.3 G34W染色仅见于单核肿瘤细胞的细胞核,呈弥漫强阳性表达。H3.3 G34W在57例发生于长骨的GCTB中表达的阳性率为96.5%(55/57),而在26例发生于非长骨的GCTB中阳性率仅为53.8%(14/26)。所有复发(9/9)或转移性GCTB(2/2)、denosumab治疗后GCTB(3/3)、原发性恶性GCTB(3/3)和继发性恶性GCTB(5/5)均为H3.3 G34W阳性。所有动脉瘤样骨囊肿和软骨母细胞瘤均为H3.3 G34W免疫组织化学染色阴性。28例骨肉瘤中,H3.3 G34W的阳性率为10.7%(3/28)。富于巨细胞的骨肉瘤(GCRO)是骨肉瘤中唯一表达H3.3 G34W的组织学亚型。p63在71.1%(59/83)的GCTB中表达,而在动脉瘤样骨囊肿、软骨母细胞瘤和骨肉瘤中的阳性比例分别为3/18、43.5%(10/23)和21.4%(6/28)。H3.3 G34W突变抗体在GCTB诊断中的灵敏度和特异度分别为83.1%和95.7%。结论H3.3 G34W突变抗体是诊断GCTB高度灵敏和特异的标志物,有助于与具有相似形态学的骨肿瘤的鉴别。该抗体的局限性是少数存在G34突变但不是G34W突变的GCTB不能被检测出。骨肉瘤中H3.3 G34W突变蛋白的偶然表达可能是一个潜在的诊断难题,该免疫组织化学结果需谨慎解释。     

V3转换流出道室性心律失常的体表心电图定位

目的通过体表心电图定位室性早搏起源已有不少报道,但关于R/S转换在V3导联的左右定位报道较少,文中报道V3转换的特发性流出道室性心律失常(ventriculararrhythmia,VA)的体表心电图定位特征,进而指导射频导管消融。方法回顾性分析207例连续接受射频消融治疗、术中经电生理检查及心室造影证实起源于左心室流出道(left ventricle outflow tract,LVOT)或右心室流出道(right ventricle outflow tract,RVOT)患者体表心电图特点,胸前导联R/S转换在V3的VA患者75例,包括室性心动过速(ventricular tachycardia,VT)8例、特发性流出道频发室性早搏(premature ventricular contractions,PVCs)67例,均无器质性心脏病。结果 75例V3转换患者中,22例V2转换晚于窦性心律均起源于RVOT,VA时V2转换晚于窦性心律提示起源于RVOT的特异度、灵敏度、阳性预告值、阴性预告值分别为100%、32.35%、100%、13.21%。结论 V3转换的流出道VT/PVCs,V2转换晚于窦性心律时提示起源于RVOT的特异性与阳性预告值均高。     

超声引导下竖脊肌阻滞在同种异体肾移植术中的应用

目的:探讨超声引导下竖脊肌平面(erector spinae plane,ESP)阻滞在同种异体肾移植术中的应用效果.方法:择期选取同种异体肾移植患者60例,ASAⅢ级,随机均分为ESP阻滞组(E组)与对照组(C组).E组患者于全麻诱导后行超声引导下ESP阻滞,C组不进行此项操作.2组患者术后均采用静脉自控镇痛泵镇痛....     

根管充填质量的临床评价

目的:根据数字化X线片图像,分析根管治疗规范化操作培训前后根管充填质量的变化。方法:收集我科4名从事牙体牙髓病学的临床医师在2009年9月~2010年9月和2010年11月~2011年11月完成的根管治疗病例,采用分层随机抽样方法进行抽样,对两组根管充填质量进行比较分析。结果:A组(规范化操作组)总体患牙和根管适充率分别为64.9%和72.6%,明显高于B组(习惯性操作组)的45.1%和54.3%,两者之间具有显著性差异(P<0.001)。A组患牙和根管适充率在不同牙位均显著高于B组(P<0.05)。B组不同牙位出现台阶形成的总体比例为20.7%,A组下降为14.2%,两者差异具有显著性(P<0.05)。结论:规范化操作可提高临床医生的根管治疗水平。     

miR-144负性调节大鼠巨噬细胞TOLL样受体2的表达

目的明确TOLL样受体2（TLR2）与microRNA144（miR-144）作用之间的关系。方法利用不同浓度的miR-144的模拟物
（mimics）和抑制剂（inhibitor）瞬时转染大鼠巨噬细胞系NR8383细胞,RT-qPCR检测miR-144和TLR2及其下游分子TNF-α的
表达。利用大鼠肝脏cDNA为模板,PCR获取目的片段（即含miR-144 野生及突变结合位点的TLR2 mRNA的3’UTR区）;用
SacⅠ、XbaⅠ双酶切pmirGLO报告基因载体和含miR-144野生及突变结合位点的TLR2 mRNA的3’UTR区,构建携带上述片段的双
荧光素酶报告基因,并通过PCR、双酶切、DNA测序鉴定构建的重组质粒,即pmir-TLR2-3’UTR及pmir-mutant-TLR2-3’UTR;并
用miR-144 的mimics 与双荧光素酶报告基因共转染明确miR-144 与TLR2 mRNA的3’UTR 区的靶向关系。结果瞬时转染
100 nmol/L miR-144 mimics后,NR8383细胞中miR-144表达显著升高,而TLR2及其下游分子TNF-α表达显著下降;而100 nmol/L
miR-144 inhibitor作用则相反。PCR和双酶切DNA测序结果证实pmir-TLR2-3’UTR及pmir-mutant-TLR2-3’UTR重组载体构
建成功;用100 nmol/L miR-144 mimics与空载体及上述两个构建体分别共转染HEK 293T细胞后,pmir-TLR2-3’UTR转染组相
对荧光素酶活性显著降低。结论miR-144通过靶向结合TLR2 mRNA的3’UTR区负性调节TLR2及其下游促炎因子的表达。
     

代谢综合征联合高尿酸血症评估冠心病发病风险的价值

目的: 探讨代谢综合征联合高尿酸血症评估冠心病发病风险的价值。方法: 选取因胸部闷痛就诊患者412例,其中代谢综合征患者188例及非代谢综合征患者224例,以血清尿酸水平420 μmol/L（男性）或360 μmol/L（女性）为切点分为非代谢综合征未合并高尿酸血症组（A组）、非代谢综合征合并高尿酸血症组（B组）、代谢综合征未合并高尿酸血症组（C组）、代谢综合征合并高尿酸血症组（D组）。比较4组间各项临床指标及冠心病患病比例的差异。采用Logistic回归分析代谢综合征、尿酸及相关因素与冠心病的关系。结果： 与非代谢综合征组相比,代谢综合征组体重、体重指数（BMI）、舒张压、尿素氮、尿酸、三酰甘油、空腹血糖均明显升高（P<0.05）,高密度脂蛋白胆固醇明显降低（P<0.05）。各亚组间体重、BMI、尿素氮、尿酸、空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇差异具有统计学意义（P<0.05）,冠心病患病比例在A组、B组、C组、D组依次升高,D组冠心病患病率明显高于A组、B组、C组（P<0.05）。Logistic回归分析显示,代谢综合征、年龄、中高水平尿酸、AST及男性是冠心病的危险因素。随着尿酸浓度的增加,冠心病患病风险性显著升高。 结论： 与单用代谢综合征或单用高尿酸血症相比,两者联合预测冠心病发病风险价值更高。