大鼠长期脾虚和热证造模的胃黏膜主细胞超微结构观察

目的模拟慢性病证是动物实验的主要难点。本实验观察比较大鼠长期(26周)脾虚和热证造模动物胃黏膜主细胞的超微结构。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、脾虚组、热证组。对照组正常饲养26周;脾虚组用耗气破气加饥饱失常法造模26周;热证组灌喂熟附子、肉桂、干姜、女贞子煎剂26周。另取幼年大鼠为幼年组作为对照。实验结束后取胃体后壁组织,透射电镜观察胃黏膜主细胞超微结构。结果对照组主细胞粗面内质网排列基本整齐,部分内质网池略呈小泡状扩张。脾虚组主细胞粗面内质网池扩张,从小泡状至池状之间,甚至呈湖状。胞质内出现髓鞘样小体或髓鞘样结构。热证组主细胞粗面内质网池扩张,呈小泡状,失去正常的同心性层状结构。幼年组主细胞粗面内质网排列比较整齐。结论热证组和脾虚组动物胃黏膜主细胞超微结构均有变化,以脾虚组更为严重。由于实验时间较长,实验结束时大鼠已近1岁龄,所以对照组动物胃黏膜主细胞超微结构也略有衰老改变。     

不同术式卵巢良性肿瘤剔除术的临床观察

目的:通过三种不同手术方式剔除卵巢良性肿瘤,探讨经阴道途径的可行性。方法:回顾性分析2005年12月-2006年12月间收治的直径<10 cm卵巢良性肿瘤需要保留子宫的患者75例,其中28例采用经阴道卵巢肿瘤剔除术(研究组);27例采用传统开腹卵巢肿瘤剔除术(对照组1);20例行腹腔镜卵巢肿瘤剔除术(对照组2)。比较三种手术方式的术中出血量、手术时间、术后住院天数、平均住院费用和术后病率。结果:研究组的术后住院天数少、平均住院费用和术后病率低,与对照组1相比差异有显著性(P<0.05);研究组的手术时间短、平均住院费用低与对照组2相比,差异有显著性(P<0.05);三组术中出血量相比差异无显著性(P>0.05)。结论:经阴道卵巢良性肿瘤剔除术是可行的,且具有住院和手术时间短、出血少、疼痛轻、恢复快、费用低、容易掌握等优点,值得推广。     

自体外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病23例临床分析

目的观察自体外周血造血干细胞移植（APBSCT）治疗恶性血液病（恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤）的初期疗效。方法共23例，其中NHL18例；HD3例；MM2例。动员方案为化疗（MOEP）＋rhG—CSF。经1-2次采集，获得MNC中位数为（4．48&#177;1．73）&#215;10^8／kg，CD34^＋细胞为（4．46&#177;0．96）&#215;10^6／kg，预处理方案，NHL，HD患者采用CTX＋TBI和CTX＋VP-16＋Ara-C＋CCNU，MM患者采用MeL．结果所有患者移植后均重建造血。外周血WBC于移植后3．91&#177;0．73d降至0，PLT于7．87&#177;0．97d降至10&#215;10^9／L以下。WBC〉1．0&#215;10^9/L，中性粒细胞〉0．5&#215;10^9／L，PLT〉20&#177;10^9／L，分别为8．04&#177;1．36d，8．40&#177;1．73d，9．57&#177;1．34d，1例患者于移植后2月死于疾病复发；4例患者在移植6月内复发；其余18例患者均无病存活6—12个月，疗效仍在近一步随访中。结论APBSCT对恶性血液病是一种安全有效的治疗方法。     

Cx43和GFP双基因共表达重组腺病毒载体的构建和鉴定

目的构建间隙连接蛋白43（Cx43）和绿色荧光蛋白（GFP）双基因共表达重组腺病毒载体。方法利用PCR方法从真核表达载体pcDNA3.0-Cx43扩增Cx43片断,利用DNA重组技术,将目的基因Cx43克隆至含有报告基因GFP的穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在BJ5183细胞中将重组穿梭质粒pAdTrack-Cx43与pAdeasy-l质粒进行同源重组,产生重组腺病毒载体pAd-Cx43-GFP,用PacⅠ单酶切鉴定重组载体;将pAd-Cx43-GFP转入293细胞中包装,荧光显微镜观察报告基因GFP的表达,Western blot方法检测293细胞中Cx43表达。结果（1）通过PCR方法从载体pcDNA3.0-Cx43扩增出单一条带,与Cx43片断大小相符;（2）重组穿梭质粒pAdTrack-Cx43经NotⅠ/XhoⅠ双酶切后,电泳可见2个大小约为9、1kb条带,证明pAdTrack-Cx43构建成功;（3）同源重组产物pAd-Cx43-GFP经PacⅠ酶切后,电泳可观察到2个大小约为31、4kb左右条带,与预期结果相符,提示同源重组成功;（4）荧光显微镜下观察可见转染pAd-Cx43-GFP后293细胞在培养1-2d即有绿色荧光表达;（5）利用WesternBlot法检测到转染pAd-Cx43-GFP后293细胞中Cx43的表达较未转染组增强。结论Ad-Cx43-GFP重组腺病毒载体构建成功。     

自体外周血干细胞移植联合生物治疗及长间歇维持化疗序贯治疗成人急性非淋巴细胞白血病的临床研究

目的 评价大剂量化疗、自体外周血干细胞移植、生物治疗,长间歇维持化疗序贯治疗成人急性非淋巴细胞白血病(ANLL)的疗效.方法 32例成人急性非淋巴细胞白血病患者首次缓解并经3个周期大剂量阿糖胞苷强化治疗后,行自体外周血干细胞移植,预处理方案采用MAC、CEAC等,造血重建后予以大剂量IL-2生物治疗4个疗程,之后每3～4个月予以长间歇化疗1次,共维持2年,常用方案包括TA、MA、HEA 等.结果 32例患者移植后均成功重建造血,无一例移植相关死亡.长间歇维持化疗满2年的12例中,有8例存活;存活中位时间为确诊后1268(953-1926)d,移植后986(725-1742)d,平均生存时间为1475.7 d,3年无病存活率为(66.7±8.1)%;其余维持化疗还未到2年的20例患者中,有2例复发(10.0%),其中1例死亡(5.0%),其余18例至今病情稳定.结论 大剂量化疗、自体外周血干细胞移植、生物治疗、长间歇维持化疗序贯治疗成人急性非淋巴细胞白血病,治疗相关死亡率低,无病生存率较高,可作为改善成人ANLL治疗效果的重要措施.     

氟达拉滨治疗慢性淋巴细胞白血病15例临床观察

目的 观察氟达拉滨治疗慢性淋巴细胞白血病的疗效和不良反应.方法 收集氟达拉滨治疗慢性淋巴细胞白血病15例患者的临床资料,均为单药使用氟达拉滨治疗;评价疗效,并观察不良反应.结果 10例(66.7%)达完全缓解,4例(26.7%)达部分缓解,总有效率为93.3%.不良反应:中性粒细胞减少5例,血小板减少9例.结论 氟达拉滨治疗慢性淋巴细胞白血病有较好的疗效;不良反应以骨髓抑制为主.     

急性白血病化疗前后与正常人骨髓基质细胞间通讯的改变

目的 观察急性白血病化疗前后与正常人骨髓基质细胞间隙连接蛋白43 (connexin43, Cx43)表达的变化及通讯功能的改变.方法 体外培养初发急性白血病化疗前及化疗后完全缓解的与正常人的骨髓基质细胞,采用免疫细胞化学方法观察三者之间Cx43表达的变化;采用细胞划痕染料传输技术比较三者之间间隙连接细胞间通讯(gap junction intercellular communication, GJIC)功能的差异.结果 正常人、急性白血病化疗前及化疗后完全缓解的骨髓基质细胞上Cx43表达的阳性率分别为(88.0±3.5)%、(12.0±2.4) %和(52.0±3.1) %;基质细胞上Cx43蛋白的光密度值分别为(175.08±8.34)、(45.42±3.71)及(94.33±7.20);染料传输的细胞数分别为(9.20±0.35)、(1.84±0.33)和(4.07±0.53).结论 急性白血病骨髓基质细胞间通讯功能较正常人及化疗后完全缓解急性白血病骨髓基质细胞明显减弱.     

HIF-1α基因miR RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的 构建人HIF-1α的miR RNAi慢病毒载体.方法 利用已经构建成功的针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-HIF-1α miR,通过BP/LR反应,将EmGFP-HIF-1α-miR表达框整合重组到产毒质粒pLenti6/V5-DEST中测序鉴定,用PLP1、PLP2和PLP/VSVG质粒共转染包装293FT细胞产毒,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定.结果 经测序鉴定证实成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA慢病毒干扰载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-HIF-1α miR.结论 成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA慢病毒RNA干扰载体.     

上海市浦东地区2006～2007年流感病原学监测分析

目的：通过对2006年7月至2007年6月上海浦东地区流行性感冒（流感）的病原学监测数据的分析，了解上海浦东地区流感病原学特征，为今后这一地区的流行性感冒防治提供科学依据。方法：从类流感病人呼吸道采集咽拭子，接种狗肾传代（MDCK）细胞分离培养，进行红细胞凝集抑制试验和亚型的鉴定。结果：自2006年7月至2007年6月采集类流感患者标本199份，分离到61株流感病毒，总检出率为30．7％。其中A（H1N1）亚型、A（H3N2）亚型、B／Y亚型、B／V亚型分别为17株、40株、3株、1株，占总检出率的27．9％、65．6％、4．9％、1．6％。结论：上海浦东地区流感流行高峰期为夏季与冬季，2006年上海浦东地区的流行毒株以A（H1N1）亚型为主，2007年初的冬季流行毒株以A（H3N2）亚型为主。流感发病人群与性别无关。流感病毒的分离率与样本采集的质量有关。     

3种G-CSF动员224例外周血干细胞效果比较

目的比较3种粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对外周血干细胞的动员效果。方法我科自体外周血干细胞移植病人224例,采用3种粒细胞集落刺激因子(吉赛欣、欣粒生、惠尔血)进行外周血干细胞动员,对干细胞动员情况、干细胞质量、移植后造血重建和药物毒副作用进行比较。结果224例病人全部移植成功,其动员效果、干细胞质量及在移植后造血重建中的临床效果差异均无显著性,毒副作用小。结论吉赛欣和欣粒生两种国产制剂及惠尔血能可靠用于外周血干细胞动员及造血重建,尤其是国产制剂的价格明显低于进口产品,在有效保证动员效果的同时大大减轻了病员的经济负担,值得临床应用推广。