幽门螺杆菌中性白细胞激活蛋白基因napA克隆及序列分析

目的：从幽门螺杆菌(H．pylori)中克隆中性白细胞激活蛋白基因napA并构建重组载体。方法：提取H．pylori郑州分离株MEL-HP27基因组DNA作模板;根据H．pylori J99全基因组序列设计napA PCR引物,高保真酶扩增napA片断;限制性内切酶切PCR产物和pNEB193空质粒,T4 DNA酶连接酶切产物,重组质粒转化E．coli TBIT程菌,蓝白斑试验筛选阳性克隆;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物学软件进行序列分析。结果：DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEB-napA的EcoR I和Sal I位点之间切出一个435bp的DNA片断,测序结果与J99 napA同源性为96．5％,与H．pylori其他菌株的同源性为92％～97％。结论：成功构建H．pylori中性白细胞激活蛋白基因的重组质粒pNEB-napA;序列分析表明HP-napA是一类高度保守的原核型基因,可作为H．pylori疫苗候选基因。     

布卡综合征和多发性大动脉炎纤维蛋白原的对照研究

目的 通过对布卡综合征(Budd-Chiari Syndrome,BCS)患者和多发性大动脉炎(Takayasus Artritis,TA)患者纤维蛋白原(Fibrinogen,Fib)含量的分析,以了解我国BCS与炎症间的关系.方法 对34例BCS患者和16例TA患者化验Fib含量.结果 BCS患者的Fib含量和TA患者Fib含量的平均值分别为2.72和4.80,t值为-4.517,P值为0.0003,有统计学意义.结论 我国BCS的主要病因可能不是炎症.     

乳酸乳球菌NZ3900电转化条件的优化

目的优化乳酸乳球菌的电转化条件,为该菌作为基因表达宿主菌的应用研究奠定基础。方法采用电穿孔方法,用质粒pNZ8110转化乳酸乳球菌NZ3900菌株,改变电转时的电压、电阻、恢复培养时间和筛选用抗生素浓度,测定每微克质粒所得转化子数量。结果采用0．2cm的电转化杯时,2．5kV、200Ω、25μF、氯霉素终浓度4μg/ml,恢复培养2h为最优条件,电转化效率可达1．2×10^4个／μg pNZ8110。结论通过优化电转时的电压、电阻、恢复培养时间和筛选用抗生素浓度,可有效提高乳酸乳球菌NZ3900电转化效率。     

幽门螺杆菌融合蛋白UreB-Omp11在大肠杆菌中的表达与纯化

近年来,研究者发现了多种Hp的有效保护性抗原成分,UreB、Omp、Hsp、NAP等,其中尿素酶、外膜蛋白等是人们研究的焦点。但它们单独免疫动物时,获得的免疫保护效果均不理想,为克服单一抗原分子诱导的免疫保护水平偏低的问题,本研究用重叠延伸PCR法将H.pylori郑州分离株MELHP27的ur     

细菌分子生物学数值分类计算机程序的研制及应用

在分子生物学数值分类中，最基本的，也是最关键的技术指标是遗传距离的权重系数，目前除等权系数被广泛应用外，尚未有公认客观，合理的遗传距离权重系数，使分子生物学数值分类的合理性和客观性受到了严峻的挑战。以群体遗传学中遗传多态度为客观基础指标，经过数学复合运算，获得较合理，客观的分子生物学数值分类的遗传距离权重系数；     

志贺菌敏感株与基因转移耐多药株蛋白组学分析

目的 对志贺菌敏感株与基因转移耐多药株全菌蛋白进行蛋白质组比较,寻找细菌耐多药相关蛋白.方法 采用接合基因转移实验对临床分离鉴定志贺菌敏感株进行基因转移耐多药试验;并对志贺菌敏感株及基因转移耐多药株全菌蛋白进行双向电泳;电泳图谱采用Image Master 2D Platinum软件分析,并对差异表达蛋白进行基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MOLDITOF-TOF)分析.结果 成功获得志贺菌基因转移耐多药株,在志贺菌敏感株与耐多药株全菌蛋白质图谱中分析别检出(946±37)和(1 013±157)个蛋白质斑点;经分析共发现43个差异表达的蛋白点,初步对其中7个差异表达蛋白进行质谱鉴定,基因转移耐多药株中发现2个新出现的耐多药相关蛋白分别为成簇插入的DNA重复序列(CRISPR)相关蛋白及Hsp60的分子伴侣蛋白(Groel-Groes-Adp7);ATP结合盒(ABC)转运蛋白、胱氨酸合成酶、预测的胞浆脂蛋白表达量上调;翻译延长因子Tu及DNA单链结合蛋白表达量下降.结论 对7个耐多药相关蛋白鉴定分析表明,供体菌中一些耐多药相关基因通过基因转移方式插入志贺菌敏感株中并大量表达,同时一些在细胞代谢中起重要作用的酶类表达量上调,ABC转运蛋白在志贺菌基因转移耐多药机制中也起重要作用.     

河南省居民自感健康评分及其社会影响因素调查

目的：了解河南省居民的自感健康水平及其社会人口学影响因素。方法：按WHO设计的健康与卫生系统反应性调查表,利用体温计式刻度尺百分制法,访谈随机抽取的河南省1514名≥18岁居民的自感健康状况。分别比较不同人口学特征人群和不同客观健康状态人群的自感健康评分,并对影响人群自感健康评分的社会学因素行多因素分析。结果：多数居民对自身的健康评价较高,中位评分95分;不同年龄、年人均家庭收入、婚姻、就业状况的人群之间,其自感健康评分差异具有统计学意义（P〈0．05）;不同层次人群之间存在健康不公平现象。结论：河南省居民自感健康评分较高,慢性病、年龄、婚姻状况及人均收入是影响居民自感健康评分的主要因素。