微小RNA-146a 上调cyclin D1 表达诱导大鼠血管平滑肌细胞的增殖

目的:采用基因芯片技术研究小分子RNA-146a(miR-146a)促进血管平滑肌细胞增殖的作用靶点并进行验证。方法:原代培养大鼠血管平滑肌细胞,分成mimics 组、inhibitor 组、control 组、sham 组,分别体外转染miR-146a mimics(50nmol/ L)、miR-146a inhibitor(50 nmol/ L)、miR-146a 错义链(50 nmol/ L)、PBS,Real time PCR 测定转染后miR-146a 水平,CCK8法检测转染后血管平滑肌细胞增殖情况。采用基因芯片检测inhibitor 组和control 组基因表达谱,通过生物信息学技术筛选出差异基因和调控的信号通路。对筛选出来的信号通路用Real time PCR 和Western blot 进行验证。结果:转染48 h后,inhibitor 组血管平滑肌细胞的miR-146a 水平明显低于control 组和sham 组(P<0.01),inhibitor 组血管平滑肌细胞的OD 值明显低于control 组、sham 组(P<0.05)。通过对基因表达谱分析发现,p53 信号通路被miR-146a 上调。用Real time PCR 和Western blot进行检测发现,p53 信号通路中关键分子p53、caspase3、PTEN 的mRNA 和蛋白水平无明显变化(P>0.05),而mimics 组VSMC中cyclin D1 的mRNA 和蛋白水平增加(与sham 相比,P<0.05),inhibitor 组VSMC 中cyclin D1 的mRNA 和蛋白水平下降(与sham相比,P<0.05)。结论: miR-146a 可能通过上调细胞周期蛋白cyclin D1 的表达促进大鼠血管平滑肌细胞的增殖。     

MiRNA-146a通过NF-κB依赖的途径促进血管平滑肌细胞增殖

摘要：目的观察miRNA-146a对血管平滑肌细胞增殖的作用并研究其机制。方法原代培养大鼠血管平滑肌细胞,分成抑制
组、对照组和正常组,采用脂质体2000分别转染miRNA-146a抑制剂（50 nmol/L）、错义链（50 nmol/L）、PBS,使用real time PCR
方法测定转染后miRNA-146a水平,CCK8法检测转染后血管平滑肌细胞增殖,transwell法检测转染后血管平滑肌细胞迁移程
度,western blot检测转染后血管平滑肌细胞核因子κBp65（NF-κBp65）与增殖细胞核抗原蛋白（PCNA）水平。结果转染48 h
后,抑制组血管平滑肌细胞的miRNA-146a水平明显低于对照组和正常组（P<0.01）;其增殖和迁移比例显著低于对照组和正常
组组（P<0.01）;其NF-κBp65、PCNA蛋白表达水平降低（P<0.05）。结论miRNA-146a可以促进血管平滑肌细胞的增殖和迁移,
其机制与增加NF-κBp65表达相关。
     

H2O2诱导骨骼肌卫星细胞凋亡及法舒地尔的保护作用

背景：骨骼肌卫星细胞是成体骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间具有增殖分化潜能的肌源性干细胞,研究表明骨骼肌卫星细胞的有效性及安全性,但是移植后的干细胞成活率极低,极大的限制了骨骼肌卫星细胞的应用。 目的：观察过氧化氢(H₂O₂)对大鼠骨骼肌卫星细胞凋亡的影响以及法舒地尔的保护作用。 方法：取体外培养的骨骼肌卫星细胞,随机分为正常对照组,H₂O₂组,H₂O₂⁺法舒地尔组(法舒地尔组),采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测白细胞介素4、肿瘤坏死因子a的浓度,Western blot检测Bax蛋白的表达。 结果与结论：同H₂O₂组相比,法舒地尔组凋亡发生率明显下降(P < 0.05),Bax蛋白水平表达明显降低(P < 0.05),白细胞介素4、肿瘤坏死因子a的分泌显著减少(P < 0.05)。结果提示,法舒地尔抑制Rho激酶信号途径发挥抗凋亡保护作用,其机制可能与减少Bax蛋白的表达有关。      

喉咽癌组织中肿瘤相关巨噬细胞浸润与肿瘤预后的关系

目的研究喉咽癌癌内及癌周间质肿瘤相关巨噬细胞(TAM)计数及其与肿瘤预后的关系。方法通过免疫组化法测定52例喉咽癌癌内及癌周标本TAM的表达,分析癌内及癌周TAM计数与喉咽癌临床病理学因素及生存率的关系。结果喉咽癌组织中TAM计数明显高于正常组织(P0.05),癌内TAM计数随肿瘤T分期上升而增加,预后越差。癌内TAM高表达组患者5年生存率低于低表达组,差异具有显著性(P0.05);癌周间质TAM高表达组患者5年生存率低于低表达组,差异具有显著性(P0.05)。癌内及癌周间质TAM浸润与生存时间均呈负相关(P0.05)。结论喉咽癌组织TAM浸润与患者不良预后密切相关。     

孕晚期胎儿心脏室壁厚度与妊娠期糖尿病孕妇HbA1c水平控制状态的关系

目的观察孕晚期胎儿心脏室壁厚度与妊娠期糖尿病孕妇HbA1c水平控制状态的关联并讨论其临床意义。方法随机择2015年1月~2019年6月我院接受孕检的罹患妊娠期糖尿病的122例单胎妊娠孕妇及其胎儿为研究对象。收集母亲孕早期、孕中期以及孕晚期HbA1c信息，借助超声检测收集孕晚期胎儿心室壁厚度信息等相关资料信息，分析孕晚期胎儿心脏室壁厚度与母亲孕期HbA1c水平控制状态的关联情况。结果孕早期受试对象的HbA1c水平为（5.80±1.60）%，孕中期为（5.91±1.61）%，孕晚期为（5.97±1.86）%，3个时期测定水平差异无统计学意义（P>0.05），不同孕期HbA1c控制情况分布特征差异无统计学意义（P>0.05）；孕早期、孕中期和孕晚期不同HbA1c控制水平的孕妇，在孕晚期经超声测定胎儿的心室壁厚度和室间隔厚度比较可见，孕早期和孕中期不同HbA1c控制水平的胎儿舒张晚期、收缩晚期左右心室以及室间隔的厚度差异无统计学意义，但是绝对数字可见血糖水平控制不佳的孕妇胎儿心室壁和室间隔厚度均相对更高；孕晚期母亲血糖水平对胎儿收缩晚期左心室壁厚度影响相对较大，孕晚期母亲HbA1c控制水平不佳者均可见胎儿收缩晚期左心室壁厚度更大（P < 0.05）；孕晚期母亲HbA1c水平控制不良与孕晚期胎儿测定的舒张晚期左心室厚度、收缩晚期左心室厚度以及舒张晚期室间隔厚度呈正相关关系（r=0.404、0.361、0.332，P < 0.05）。结论罹患妊娠糖尿病的孕妇，血糖控制不佳会影响引发胎儿心室壁和室间隔增厚，有可能对胎儿心脏发育造成不良影响，基于此建议尽量有效控制孕妇血糖水平处于良好范围，特别是孕晚期控制血糖水平，以便减低胎儿和新生儿的心脏损害。      

VEGF和MMP-9在变应性鼻炎鼻腔黏膜中的表达及相关性研究

目的:VEGF和MMP-9在AR患者鼻腔黏膜的表达,研究二者在AR发病机制中的作用及相关性.方法:本实验采用免疫组织化学技术SP法检测VEGF、MMP-9在AR患者鼻腔黏膜标本50例,正常鼻腔黏膜标本50例中的表达.采用SPSS13.0软件进行统计学分析,对比VEGF、MMP-9在实验组与对照组上皮表达阳性率有无差别及二者的相关性.结果:VEGF和MMP-9在AR患者鼻腔黏膜上皮中表达明显高于正常鼻腔黏膜,差别有统计学意义(P＜0.05);在AR患者鼻腔黏膜上皮中VEGF和MMP-9表达之间呈正相关.结论:①VEGF和MMP-9在AR患者鼻腔黏膜上皮高表达,二者表达之间呈正相关.②VEGF和MMP-9在促进鼻黏膜组织的肿胀、鼻黏膜腺体分泌亢进过程中发挥重要作用,VEGF可能是MMP-9高表达的诱导因素.     

重度烧伤患者胃肠道细菌移位致全身感染的临床研究

目的调查重度烧伤患者胃肠道细菌移位致全身感染因素,为预防与治疗感染提供指导。方法收集2010年1月-2013年10月在医院接受治疗的重度烧伤患者60例,将其分为存活组(35例)和死亡组(25例),对两组患者感染程度进行比较。结果与存活组相比,死亡组患者的烧伤面积较大、烧伤指数较高、存在吸入性损伤、伴消化道出血及接受辅助呼吸治疗例数较多(P<0.05或P<0.01);存活组与死亡组的血清二胺氧化酶(DAO)分别为(1.71±0.34)kU/L与(1.94±0.51)kU/L、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)为(103.98±19.64)pg/ml与(115.56±21.75)pg/ml、内毒素为(0.14±0.02)kEU/L与(0.21±0.03)kEU/L和尿乳果糖/甘露醇(L/M)为(116.98±14.67)与(126.75±18.95)水平较高(P<0.05或P<0.01)。结论重度烧伤患者胃肠道屏障的损伤和细菌移位的程度与全身感染和预后密切相关。     

单硝唑注射液生产工艺影响因素的研究

目的考察甲硝唑注射液生产工艺的主要影响因素。方法运用正交试验设计法对甲硝唑注射液实际生产工艺的影响因素进行研究。结果优选工艺活性炭为0．2％（w／w），吸附时间20分钟，pH值为6．0。结论活性炭的用量（w／w）对甲硝唑注射液有显著性影响，吸附时间次之，pH值影响不大。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者血浆VIP和β-EP水平的变化及意义

目的:通过检测血管活性肠肽(VIP)和β-内啡肽(β-EP)在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者血浆中的含量,探讨二者在OSAHS发病过程中的病理生理意义,进而探讨二者可能的相互作用的机制。为OSAHS的病因诊断和治疗提供新的理论依据。方法:实验对象为45例经过多导睡眠监测(PSG)筛选的OSAHS患者,以呼吸暂停低通气指数(AHI)为标准进行分度,其中轻中度组29例,重度组16例。对照组为经PSG监测排除OSAHS诊断的健康成人志愿者15例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测OSAHS组和正常对照组的血浆中VIP和β-EP的浓度。对VIP与β-EP的表达结果及二者的相关性进行统计学分析。结果:OSAHS患者血浆中VIP为高表达,表达差异具有显著性(P<0.01)。OSAHS轻中度组的VIP浓度显著高于对照组(P<0.01);重度OSAHS组的VIP浓度明显高于轻中度OSAHS组(P<0.01)。OSAHS患者血浆中β-EP为高表达,表达差异具有显著性(P<0.01)。OSAHS轻中度组的β-EP浓度显著高于对照组(P<0.01);重度OSAHS组的β-EP浓度明显高于轻中度OSAHS组(P<0.01)。在OSAHS重度组VIP与β-EP的表达呈正相关,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论:VIP和β-EP在OSAHS患者血浆中均存在高表达,且重度组明显高于轻中度组,说明二者在OSAHS的疾病发生发展的过程中发挥了重要作用。VIP作为具有舒张血管作用的神经肽类物质,可以改善组织缺氧,但其过度表达可导致血管通透性增加,局部组织水肿,加重OSAHS的病情。β-EP的高表达,可构成缺氧、β-EP升高、呼吸抑制、缺氧这一恶性循环,导致OSAHS的病情的复杂化。VIP和β-EP两种神经肽在参与OSAHS疾病发生发展过程中呈现显著的正相关性。     

微小RNA-146a影响血管平滑肌细胞增殖和凋亡的机制

背景:微小RNA-146a通过负调控核因子κB信号通路介导免疫细胞和肿瘤细胞的增殖,但是否参与血管平滑肌细胞的增殖或凋亡未见研究报道。目的:观察微小RNA-146a对血管平滑肌细胞增殖、凋亡的影响及其相关机制。方法:采用脂质体2000将50nmol/L微小RNA-146a反义寡核苷酸转染至大鼠血管平滑肌细胞,以转染错义链及PBS的细胞作为对照。结果与结论:微小RNA-146a反义寡核苷酸转染48h后,血管平滑肌细胞增殖减少(P<0.01)、凋亡增多(P<0.05),细胞的微小RNA-146a水平明显降低(P<0.01),核因子κBp65、增殖细胞核抗原蛋白表达明显降低(P<0.05)。说明微小RNA-146a可以促进血管平滑肌细胞的增殖,抑制凋亡,其机制与增加核因子κBp65表达有关。