膀胱抗菌机制—粘膜抗菌蛋白初步研究

本文报道以１％乙酸冲洗雌性Ｗｉｓｔａｒ大鼠膀胱和雌性新西兰白兔膀胱，分别获得其膀胱酸溶性提取物。ＡＵ－ＰＡＧＥ分析表明，两种膀胱粘膜酸溶性提取物都有十余条主蛋白带，而不含常见的杀菌物质溶菌酶和防御素样分子。琼脂糖弥散法杀菌试验显示，两种膀胱粘膜酸溶性提取物对致病性大肠杆菌ＭＬ－３５ｐ耐药株都有杀菌活性。进一步采用电泳凝胶琼脂糖弥散法杀菌试验分析，结果表明大鼠膀胱粘膜酸溶性提取物中有两条蛋白带具明显的杀菌活性，我们称这两条蛋白带为ＲａｔＢＰ－１和ＲａｔＢＰ－２。而兔膀胱粘膜酸溶性提取物的杀菌活性亦与两条被称为ＲａｂＢＰ－１和ＲａｂＢＰ－２的蛋白带相关。本文首次提示，在膀胱粘膜内存在抗菌蛋白，可能是膀胱粘膜杀菌作用的分子基础。     

TNF及铜绿假单胞菌刺激呼吸道上皮细胞表达NOD2蛋白

目的：通过对TNF及铜绿假单胞菌（PAO1）刺激肺上皮细胞株（A549）表达胞浆蛋白NOD2的研究，进一步了解NOD2在机体天然免疫病原体识别过程中的作用。方法：培养呼吸道肺癌上皮细胞株A549，以TNF、铜绿假单胞菌PAO1刺激细胞，并以未刺激组做对照，通过半定量RT-PCR技术观察胞浆蛋白NOD2的表达变化。结果：与未刺激组比较，TNF、铜绿假单胞菌PAOI都能够上调A549细胞NOD2蛋白的表达。结论：TNFα与铜绿假单胞菌PAO1刺激能增强A549细胞胞装蛋白NOD2的表达，提示细胞内受体NOD2在呼吸道天然免疫病原体识别过程中可能起重要作用。     

人β防御素-2与前列腺癌特异性膜抗原嵌合蛋白真核表达质粒构建及其诱导的小鼠特异性免疫应答

探索人β防御素2 (h BD- 2 )和前列腺特异性膜抗原(PSMA)共表达重组核酸疫苗针对前列腺癌的免疫治疗。研究以pc DNA3.1为载体,构建重组质粒pc DNA3.1/PSMA和pc DNA3.1/h BD- 2 - PSMA,通过RT- PCR和免疫组化检测其表达。免疫小鼠后,进行血清中抗体检测,CD4 、CD8 T淋巴细胞数目测定及CTL 特异性杀伤作用检测。结果显示构建的质粒转染COS- 7细胞后能表达目的基因,免疫小鼠后能在体内持久表达,可以诱导产生特异性抗体,能有效的刺激T细胞增生,诱导特异性CTL 反应。当以h BD- 2作为免疫佐剂时,CTL 活性更强。本研究成功的构建了含PSMA的表达质粒,免疫小鼠可以诱导出有效的体液和细胞免疫,为前列腺癌的免疫治疗奠定了一定的实验基础     

JiTT模式在生物化学综合性实验教学中的应用

目的　探讨适时教学（just-in-time-teaching,JiTT）在生物化学综合性实验（血清γ-球蛋白的分离提纯与鉴定）教学中的应用及效果。方法　选取我校2016级临床医学本科专业100人作为研究对象,平均分为对照组和实验组。对照组（50人）采用传统教学,实验组（50人）采用JiTT。实验组课前3~5天,教师把微视频、导学案等资源上传到网络教学平台或网络学习交流组,构建在线学习交流和反馈环境;课上包括个人测试、教师面对面授课、小组讨论、完成实验报告和答疑解惑等环节,以检验和反馈学生自学情况。采用SPSS 22.0统计两组学生测试成绩与问卷结果,组间数据比较行t检验。结果　实验组个人测试平均得分为（9.44±0.59）,高于对照组的（8.77±0.41）分,差异有统计学意义（P=0.00）。在问卷关于学习效果评价的6项内容中,实验组学生对JiTT的评分均高于对照组对传统教学的评分,差异有统计学意义（P<0.05）。结论　JiTT有助于提升生物化学实验教学质量,值得在其他专业基础课程中尝试。     

大鼠β-防御素-2基因气道转染增强肺抗感染防御功能的研究

β 防御素体外试验显示具广谱抗菌活性 ,本研究应用转基因方法评估其体内抗菌作用。构建大鼠 β 防御素 2 (rBD2 )重组质粒 pBK CMV$CrBD2和 pCD NA 3.1 Myc His( + ) rBD2 ,通过脂质体包裹的方法将重组质粒经气管滴入 ,检测其在气管和肺组织表达情况 ,并应用肺组织匀浆上清菌落计数法检察对绿脓杆菌的肺清除率。结果显示在基因转染大鼠的气管和肺组织内均检测到rBD2 His融合蛋白基因mRNA和蛋白的表达 ,说明脂质体包裹的重组 β 防御素 2pBK CMV$CrBD2质粒可有效转染气道上皮组织。肺细菌清除率实验显示构建重组质粒 p…     

高效液相色谱法测定脑心舒口服液中杂质5-羟甲基糠醛含量

目的建立测定脑心舒口服液中杂质5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的高效液相色谱法。方法色谱柱为Phenomenex Luna C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为284 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果 5-HMF质量浓度在0.204~76.65μg/m L(r=0.999 7,n=7)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%(n=6),平均加样回收率为99.18%,RSD为1.61%(n=9)。结论该方法操作简便、结果准确,精密度、稳定性、重复性、耐用性均好,可用于脑心舒口服液中杂质5-HMF含量的测定。     

四氯化碳诱发小鼠实验性肝硬化

 间日或间隔两日1次给津白1号小鼠灌胃10％四氯化碳油溶液0.2ml，给药至第9次，可造成小鼠肝硬化模型。肝组织病理切片检查和肝细胞超微结构的电镜观察，均能看到典型的肝硬化病理形态改变。     

树舌多糖抗肿瘤机制的研究

采用免疫组化方法研究树舌多糖对小鼠HepA瘤细胞Rb基因、p16基因和TNF -α表达的影响 ,阐明中药多糖的抗肿瘤作用机制。实验表明 :树舌多糖组瘤重减轻 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P<0 .0 1) ;树舌多糖组小鼠HepA瘤细胞Rb基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;树舌多糖组p16基因表达活性增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;树舌多糖组TNF -α表达增强 ,与实验对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :树舌多糖通过增强抑癌基因 -Rb基因、p16基因及TNF -α的表达活性 ,即在基因表达水平上抑制肿瘤的生长     

丹参注射液佐治成人急性肺炎

自1999年6月以来，我科应用丹参注射液治疗36例成人急性肺炎，取得了较好效果，现报告如下。     

国产支架经纤维支气管镜介入肺减容术初步应用

纤维支气管镜肺减容术（bronchoscopic lung volume reduction，BLVR）因其微创、方法简单．近年来发展迅速.目前国外报道处于多中心试验阶段。笔者应用纤维立气管镜介入肺减容术（bronchoseopic interventional lung volume reduction BILVR）．在动物实验成功并获得医学伦理委员会批准后应用国产单向活瓣支架（专利申请号：200520078088.5，200520078089．X．图1）于2006年5月17日进行了1例临床试验．报告如下。