原发性肝癌患者乙型肝炎病毒基因型与突变的地区性差异分析

目的 研究原发性肝癌患者乙型肝炎病毒(HBV)基因型、亚型和突变的地区性差异.方法 HBV阳性的原发性肝癌组织标本80例,其中广西地区20例,上海、浙江、江苏(长三角地区)60例.应用聚合酶链反应(PCR)扩增患者携带的HBV DNA序列,PCR产物直接纯化测序.用NCBI在线的软件viral genotyping tool确定HBV基因型,MEGA(Molecular Evolutionary Genetics Analysis,version 3.1)软件构建系统进化树和进行亚型分型及突变分析.结果 80例肝癌标本中,17例为B基因型(21.3%),57例为C基因型(71.3%),6例为B、C基因型混合感染(7.5%).对17例B基因型和57例C基因型的亚型分型,其中B基因型的亚型全部为B2型,C基因型的亚型有C1、C2、C5等三型,其中有12例为C1型(21.1%),44例为C2型(77.2%),1例为C5型(1.8%).广西地区的C1亚型35%(7/20)明显高于长三角地区的C1亚型8.5%(5/60),而广西地区的C2亚型20%(4120)明显低于长三角地区的C2亚型66.7%(40160).两地区HBV基因亚型分布在统计学上有显著差异.比较两地区的HBV序列还发现,广西地区B基因型CP区T1762/A1764呈现更高的突变性,有6例(100%)存在突变,而长三角地区只有2例(16.7%).结论 两地区原发性肝癌患者的HBV亚型分布和基因型B的CP区T1762/A1764突变率有显著差异.     

ZEB1EZH2和PTEN在大肠癌自噬发生中的作用和意义

目的：明确多梳蛋白EZH2是否参与大肠癌自噬及其相关的调节机制。方法使用Western blot及免疫组织化学的方法检测ZEB1、EZH2和PTEN表达水平;实时（real-time）PCR检测ZEB1、EZH2和PTEN的mRNA水平;电镜观察细胞自噬的发生。结果下调EZH2的表达可诱导大肠癌细胞自噬的发生;EZH2通过调节PTEN的表达参与自噬的调控,同时EZH2及PTEN的表达受到ZEB1的调节;大肠癌组织中ZEB1和EZH2的表达明显高于正常肠黏膜组织,而正常肠黏膜组织PTEN的表达水平明显高于大肠癌组织。结论大肠癌中EZH2的下调可以诱导大肠癌自噬的发生。ZEB1正向调控 EZH2的表达,进而影响PT EN参与肿瘤细胞自噬的调节。     

核受体LXRα在HBV阳性肝硬化及原发性肝癌组织中的表达及意义

目的：检测肝脏X受体（Liver X receptor alpha,LXRα）在HBV阳性肝硬化组织及原发性肝癌中的表达情况及临床意义。方法收集20例揭阳市人民医院及汕头大学医学院第一附属医院手术切除的HBV阳性肝硬化原发性肝癌组织标本,应用免疫组化染色检测LXRα表达。Huh7细胞中分别过表达小鼠mLXRα,及共过表达HBx （HBV X protein）和mLXRα,并检测mLXRα及HBx对内源性LXRα信号通路下游靶基因SREBP-1（Sterol regulatory element-binding protein 1）的影响;双荧光素酶报告系统检测人肝癌Huh7细胞中HBx对LXRα转录活性的影响。结果 LXRα在肝硬化组织中阳性表达率为95%,高于癌组织的25%。HBx上调SREBP-1的表达可能与HBx调控LXRα的转录活性有关。结论 HBx通过调节癌前高表达的LXRα的转录活性,并影响其信号通路可能与HCC发生相关。     

基因治疗的现状与对策

基因治疗的现状与对策顾健人基因治疗是指将基因直接导入人体用于治疗或预防某些疾病。它是一项高度集成、综合性和高难度的生物高技术。它集中了基因分离、基因导入人体和基因在人体内的高效表达及其调控，既要求有效而又须确保安全。因此，它的难度高于基因在体外（细菌...     

人原发性肝癌的分子生物学研究

肿瘤的发生和演化是一个多步骤的过程,肝癌也不例外。分子生物学及流行病学的研究结果表明,在人原发性肝癌(PHC)发生、演化过程中,一些癌基因或相关基因的结构或表达发生了改变;一些抗癌基因受到抑制或发生丢失;嗜肝病毒对肝细胞的恶性转化起了促进作用。这些基因和病毒在PHC的发生、发展过程中的作用是分阶段、协同和累积的。以下,结合我们实验室近几年的工作对癌基因及其相关基因、抗癌基因和嗜肝病毒在PHC中的     

上海市长宁区1988—2013年肾癌、膀胱癌发病和死亡趋势分析

摘 要：［目的］ 分析1988—2013年上海市长宁区居民肾癌、膀胱癌发病和死亡的现况和时间变化趋势。 ［方法］ 根据上海市长宁区1988—2013年的肾癌、膀胱癌发病、死亡人数,计算相应的粗率、世标率等指标。利用Joinpoint软件分析世标发病率/死亡率的时间变化趋势,计算年度变化百分比（APC）。应用年龄—时期—队列模型,评估这3个因素对发病率/死亡率变化的影响。［结果］ 1988—2013年期间,上海市长宁区肾癌世标发病率呈上升趋势,男、女性APC分别为7.11%和3.85%,男性肾癌死亡率显著上升（APC=3.64%）;膀胱癌中仅女性死亡率显著下降（APC=-3.29%）。年龄—时期—队列模型结果提示,随着年龄的增大,肾癌、膀胱癌的发病率和死亡率均呈上升趋势;肾癌发病率还同时受到时期、队列效应的影响（P值均<0.05）。［结论］ 1988—2013年上海市长宁区居民的肾癌、膀胱癌的发病率和死亡率均随年龄增加而逐渐上升,提示中老年人群是防治工作的重点。     

建立基于超薄切片的高分辨成像技术解析组织的精细空间结构

目的 建立基于超薄切片方法的高分辨三维成像技术,提高Z轴分辨率,并用于组织的精细结构研究。方法 组织样品用LRWhite树脂渗透聚合后,用钻石刀将组织切片切成50~1 000 nm的连续半薄或超薄切片,具体切片的厚度即Z轴的分辨率。切片经甲基蓝-洋红染色或多重抗体标记后,利用全自动显微镜对连续切片进行成像,通过二维拼接和三维重构获得组织高分辨的三维空间信息。结果 对人正常结肠组织和小鼠肝脏进行高分辨成像分析,获得比传统显微镜更高的分辨效果和更丰富的结构细节。结合多重抗体染色方法,对小鼠脑组织微管蛋白的分布进行了高分辨三维成像。结论 所建立的高分辨三维成像技术适用于各种组织的空间精细结构研究,超薄切片方法同时为超高分辨显微成像提供Z轴的解决方案。     

肺腺癌骨转移裸小鼠模型的建立及MicroCT观察

背景与目的骨转移占晚期肺癌的50%-70%。本研究以体外侵袭、迁移能力不同的肺腺癌细胞系A549、H1299、SPC-A-1、XL-2为基础建立肺腺癌骨转移裸小鼠模型,MicroCT观察骨转移情况。方法将50只6 w-8 w龄裸小鼠随机平均分为5组,4个实验组左心室分别注射相应四种细胞悬液(0.2 mL/只);对照组左心室注射等量生理盐水。注射后第二周起定期对各组小鼠进行MicroCT扫描,当小鼠明显消瘦时此组观察结束,结束前行骨组织病理学检查;对各实验组出现的骨转移部位按中轴骨和四肢骨归类,比较这两种部位之间的转移率;根据各组出现骨转移所用平均时间、骨转移率,对各细胞系骨转移能力进行统计分析。结果经MicroCT、病理学检查确定,各实验组出现不同骨转移率,对照组小鼠无骨转移现象;各实验组中轴骨转移率均明显高于四肢骨,这与临床上肺癌骨转移规律一致,模型建立成功。各实验组间发生骨转移的小鼠数目及出现转移所用平均时间无明显差异。结论MicroCT能清晰地检测到骨质破坏,利于骨转移情况的判断;我们成功建立了肺腺癌骨转移模型,为以后探索出新的肺腺癌乃至肺癌骨转移临床预防和治疗方案提供基础;4种肺腺癌细胞系体外侵袭、迁移能力强弱不等,但体内骨转移能力没有明显差异,其原因还有待进一步的探索。