siRNA沉默E2F1对膀胱癌T24恶性生物学行为的影响

目的：明确转录因子E2F1在膀胱癌T24恶性生物学行为形成中的作用。方法运用siRNA干扰T24中的E2F1基因,MTT法检测沉默前后T24存活能力的变化,平板克隆形成实验检测沉默前后T24克隆形成能力的变化,Transwell小室迁移和侵袭实验检测T24迁移和侵袭能力的变化。结果 siRNA可以下降E2F187％左右的蛋白表达,E2F1被干扰后,T24的存活能力下降,克隆形成能力减弱,迁移和侵袭能力减弱,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论siRNA沉默E2F1可以降低膀胱癌T24的恶性,提示E2F1可以作为膀胱癌一个潜在的治疗靶点。     

微小RNA前体区域基因多态与儿童特异性皮炎易感性的关联研究

目的探讨微小RNA（miRNA）前体区域基因单核苷酸多态性（SNP）与儿童特异性皮炎（AD）易感性的关系。方法采用病例-对照研究,选取AD患儿400例,年龄频率匹配的健康对照儿童400例;使用标准化的调查表获得研究对象的基本资料;采用ABI7900HT的Taqman基因分型技术检测hsa-mir-149 rs2292832、hsamir-146a rs2910164、has-mir-499 rs374644和hsa-mir-196a2 rs11614913基因多态性。结果 hsa-mir-146a基因多态性位点rs2910164与AD发病风险有关联,与CC、GG＋CG相比,纯合型CC可显著增加儿童AD的发病风险（OR=1.46,95%CI：1.18-1.81,P〈0.005;OR=1.49,95%CI：1.21-1.85,P〈0.001）;分层分析显示,CC基因型增加AD发病风险性在男性（OR=1.60,95%CI：1.24-2.02,P〈0.001）、有家庭环境香烟暴露史（OR=2.00,95%CI：1.75-2.34,P〈0.001）和无过敏性疾病家族史（OR=1.45,95%CI：1.11-1.85,P=0.011）的儿童中更加显著。未发现多态性位点hsa-mir-196a2 rs11614913、hsa-mir-149 rs2292832和has-mir-499 rs374644与儿童AD易感性有关。结论 hsa-mir-146a rs2910164 CC基因型可能增加儿童AD的发病风险。     

姐妹染色单体差别染色效果相关因素的研究与改进

目的探讨影响姐妹染色单体差别染色效果的因素,明确作为课堂实验教学项目的可行性。方法用常规外周血淋巴细胞培养、染色体制备技术制备染色体标本片,细胞培养过程中分别加入新配制和-20℃保存10年的BrdU溶液。标本制备后分别取新鲜(1 d龄)和-20℃冻存1,2,3,4,5周龄的染色体片用紫外线照射,照射条件为50,56,60℃三种温度,10,20,30 min三个时间,然后Giemsa染色10 min。根据姐妹染色单体着色效果与色差评价各因素对差别染色的影响。结果在-20℃冻存10年的BrdU与新鲜配制的BrdU掺入DNA后的染色效果无显著差异,终浓度以10μg/ml为佳。新制备和-20℃保存1-5周的染色体标本片,在50-60℃的片温范围内,紫外照射10-30 min均获得良好的差别染色效果。结论BrdU溶液在-20℃长期冻存不影响DNA掺入效果;姐妹染色单体差别染色对相关因素容差性较强,改进后作为课内教学实验项目具有很好的可行性。     

小RNA技术干扰p21联合环磷酰胺对HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨小RNA干扰p21表达联合环磷酰胺对HepG2细胞增殖和凋亡的影响及相关作用机制。方法将化学合成的针对p21的siRNA序列转染至HepG2细胞,将HepG2细胞分为5组：空白对照组、阴性对照组、RNA抑制组、环磷酰胺组、联合组（RNA抑制＋环磷酰胺）。采用Mrrr比色法、流式细胞术和分光光度法分别检测HepG：细胞增殖、细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶家族成员caspase-9、caspase．3和caspase-6的活化程度。结果p21 siRNA转染后,相对于环磷酰胺单独处理组,联合处理组HepG,细胞增殖率显著降低,而细胞凋亡率则率明显升高（P〈0．01）;caspase-9、caspase-3和caspase-6的活化程度显著升高（P〈0．01）。结论p21靶向RNA抑制作用联合环磷酰胺处理显著促进了HepG2细胞凋亡,p21可作为肝癌基因治疗的后选新靶点。     

牛磺酸对游泳训练诱导大鼠心肌肥厚的影响

目的探讨牛磺酸对游泳训练诱导大鼠心肌肥厚的影响。方法采用游泳训练引起的大鼠心肌肥厚为模型。所有大鼠被随机分为3组(每组10只):对照组,游泳组,牛磺酸组。牛磺酸治疗剂量为300 mg.kg-1.d-1。经游泳运动8周后,大鼠处死,分离心脏组织用于检测左心室重/体质量比(LVW/BW),心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达量。结果与正常对照组相比,未给药的游泳组大鼠LVW/BW升高,心肌AngⅡ含量、TGF-β1 mRNA表达量增高;应用牛磺酸治疗则明显减小了游泳训练大鼠LVW/BW,降低了心肌AngⅡ含量、TGF-β1 mRNA表达量。结论牛磺酸治疗可抑制游泳大鼠心肌肥厚的发生,作用机制与其调节心肌组织局部AngⅡ和TGF-β1产生有关。     

上颌第一前磨牙X线法髓腔物理量

目的探讨上颌第1前磨牙X线片法髓腔物理量方面的数据。方法用X线平行投照法拍摄实体牙颊舌向和近远中向X线片牙影像,根据本文对髓腔根管定的分型标准对根管进行分型。用电脑配套的柯达成像系统测量(mm)X线片牙的髓高、髓宽、根中颊径、根中舌径、根尖颊径和根尖舌径。用SPSS17.0软件统计处理X线片牙的髓腔物理量值。结果 100颗上颌第1前磨牙中X线片牙根管有6种类型,Ⅰ-1-1型占33%,Ⅰ-2-2型占17%,Ⅰ-2-1型占13%,Ⅰ-1-2型占4%,Ⅰ-2-1-2型占3%,Ⅱ-2-2型占30%。X线片牙的髓高3.09±1.18,髓宽3.88±0.61,根中颊径1.76±1.18,根中舌径0.59±0.34,根尖颊径0.79±0.89,根尖舌径0.35±0.28。髓腔物理量各测值差异均存在统计学意义。结论上述结果说明本组上颌第1前磨牙根管类型主要是Ⅰ-1-1型,Ⅰ-2-2型,Ⅱ-2-2型。X线片牙物理量测值经相关及回归分析,如果有相关性的配对项,可用回归方程中的自变量值(X)来推测因变量的值(Y)。     

咸宁市齿龈内阿米巴感染状况与口腔疾病关系分析

目的：了解咸宁市齿龈内阿米巴感染状况,探讨与口腔疾病之间的关系。方法随机选择湖北科技学院附属第二医院口腔科门诊病人200人,湖北科技学院1～3年级大学生300人进行问卷调查,调查内容包括性别、年龄、住址、刷牙习惯、使用牙膏类型、嚼口香糖习惯、口腔疾病史等。以消毒牙签取受检者口腔齿龈上或病灶表面附着物,生理盐水直接涂片,光学显微镜下观察。结果500例受检者齿龈内阿米巴感染率为36.2％,其中男、女性齿龈内阿米巴感染率分别为37．4％和35．1％（ P＞0．05）;齿龈内阿米巴感染率随年龄增长而逐渐升高（P＜0．05）;城市和农村人群齿龈内阿米巴感染率分别为30．4％和444．％（P＜0．01）;经常刷牙者齿龈内阿米巴感染率低于不经常刷牙者（P＜0．01）;使用普通牙膏者齿龈内阿米巴感染率低于使用药物牙膏者（P＜0.05）;经常嚼口香糖者齿龈内阿米巴感染率低于不经常嚼口香糖者（P＜0．05）;有口腔疾病的患者齿龈内阿米巴感染率高于健康者（P＜0．01）;其中牙周炎患者齿龈内阿米巴感染率最高（P＜0．05）。结论齿龈内阿米巴感染与口腔疾病和口腔卫生状况密切相关。     

尼莫地平对邻苯二甲酸二丁酯所致小鼠学习记忆障碍的拮抗作用

目的探究尼莫地平(Nim)对邻苯二甲酸二丁酯(DBP)所致KM小鼠学习记忆障碍的拮抗作用。方法 36只♂KM小鼠随机分成4组:对照组、50 mg·kg~(-1)DBP组、2mg·kg~(-1)Nim组及DBP+Nim组,实验周期28 d后,检测各组小鼠潜伏期,脑海马的钙调蛋白(Ca M)、钙/钙调素依赖性蛋白激酶II(Ca MKII)、蛋白激酶C(PKC)、细胞色素C(Cyt C)、caspase-3、ERK1/2、p-ERK1/2水平,并通过观察HE、Nissl染色及TUNEL检测脑海马CA1区病理学变化。结果与50 mg·kg~(-1)DBP组比较,DBP+Nim组小鼠学习记忆能力有所改善,海马组织CA1病理学损伤及凋亡程度降低,PKC、Cyt C、caspase-3水平及p-ERK1/2表达量降低,Ca M、Ca MKII水平上升,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论DBP可影响Ca2+相关蛋白、上调p-ERK1/2表达,诱导KM小鼠脑海马神经元损伤及凋亡,而Nim改善DBP所致小鼠的学习记忆障碍,可能与其可拮抗胞内Ca2+浓度增加,降低DBP暴露后小鼠脑组织p-ERK1/2及caspase-3水平有关。     

SATB1基因在肝癌细胞中的表达及其临床意义

目的研究特异富含AT序列结合蛋白1(SATB1)在肝癌细胞中的表达及其临床意义。方法选取肝癌患者78例,所有患者在手术过程中留取癌组织标本,另取20份非肝癌正常肝脏组织标本,采用实时荧光定量反应测定标本中SATB1 mRNA表达水平,分析不同组织中SATB1表达差异;根据SATB1表达水平将肝癌患者分为高表达组和低表达组,分析SATB1表达水平与肿瘤大小、分化程度、TNM分级、复发等临床病理参数的相关性。结果 SATB1 mRNA在癌组织中表达水平较正常组织中明显升高,组间差异具有统计学意义(P<0.05);SATB1表达水平与患者肿瘤大小、病理分化程度、TNM分级等参数具有相关性,与复发没有相关性。结论SATB1在肝癌组织中表达水平高,与患者肿瘤大小、病理分化程度、TNM分级有关,可能参与肝癌发展进程,对患者预后及转归具有重要提示价值,亦可能为肝癌治疗提供新的治疗靶点。     

病理制片过程中常用试剂的合理更换

目的在保证病理制片质量基础上,探索常用组织块和浸泡液的量的关系。方法采用全自动脱水机方式,标本厚度控制在1cm×1cm×0.2cm范围内,将标本分为3组,按相同试剂量(2000ml)和相同程序分别处理,比较制片质量差别。结果第1组3000块标本,有900块组织勉强可以切出完整的切片,余下均不能切出完整切片,表现为组织发软,切片松散;第2组2000块标本,组织软硬度适中,都能较顺利的切出完整切片;第3组的标本1000块组织,其中700块组织通过温水湿润,能勉强切出切片,余下组织在切片时出现断裂、皱褶等,无法制片。结论标本处理量与常用试剂的消耗相关,常用试剂的更换以组织块数量计算可能更为合理。