慢性肝病患者中小肠细菌过度生长的研究

目的 利用乳果糖氢呼气试验(LHBT)检测肝硬化和慢性肝炎肝纤维化(CHF)患者中小肠细菌过度生长(SIBO)的发生率,探讨其与炎症因子及氧化应激相关指标的关系。方法 选取38例CHF患者和60例肝硬化患者以及31例健康对照组,利用LHBT的方法评估各组SIBO发生率。然后将受试者分为SIBO阳性组和SIBO阴性组,比较两组间临床症状和实验室检查,并检测其血清脂多糖(LPS)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10水平以及二胺氧化酶(DAO)、超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)水平,并对所检测的LPS、IL-6、TNF-α、IL-10、DAO、SOD、GSH、CAT的浓度与LHBT集值的相关性进行统计学分析。结果 (1) CHF组和肝硬化组以及对照组SIBO阳性率分别为36.84%、60.00%和9.68%,差异有统计学意义(P<0.01);(2) SIBO阳性组患者和阴性组患者在Child–Pugh(CTP)分级及腹水的表现上差异有统计学意义(P<0.05);(3) SIBO阳性患者血清中LPS、IL-6、DAO、C...     

小鼠结肠癌中巨噬细胞金属弹力蛋白酶对血管抑素生成和肿瘤血管生长的影响

Objective To determine the pathway of macrophage metalloelastase (MME)generate active angiostatin by decomposing plasminogen and its effect on inhibiting growth of tumor and microvessel density (MVD) in vivo in mouse models. Methods The recombined plasmid pEGFPC1-MME was constructed. Thirty mice were subcutaneously inoculated with CT-26 cells that were stably transfected with pEGFP-C1-MME (MME-transfected group), 30 with CT-26 cells transfected with empty vector pEGFP-C1 (vector-transfected group) and 30 with CT-26 cells (non-transfected group). Radioiodination and radioisotope tracer were used to explore the pathway of angiostatin generation in vivo. Results SDS-PAGE electrophoresis analysis revealed that, in the PAGE gel contained the protein with molecular weights of 35 000 and 38 000, radioactivity in MME-transfected group was significantly higher than vector-transfected and non-transfected groups (P = 0. 00).Western blotting analysis demonstrated two bands containing 35 000 and 38 000 fragments in three groups. Quantification of the protein signals by image analysis revealed that the levels of 35 000 and 38 000 fragments were obviously increased in MME-transfected group (9.32±1.52 and 5.61±2.24,respectively) than those in vector-transfected (2.47 ± 0.23 and 0. 67 ± 0. 12, respectively) and nontransfected (1.21±0. 69 and 0. 86 ± 0.44, respectively) groups (P= 0.00). The average value of MVD and fluorescent express of vascular endothelial growth factor (VEGF) were lower in MMEtransfected group when compared with those in vector-transfected and non-transfected groups (P =0.00). The average tumor size in MME-transfected group was small in comparison with vectortransfected and non-transfected groups (P= 0.00). Conclusions MME is demonstrated to be one of matrix metalloproteinase that closely related with angiostatin production and has inhibitory effect on tumor growth in tumor-bearing mice.     

溃疡性结肠炎患者血浆同型半胱氨酸和叶酸及维生素B12的检测水平及其临床意义

目的探讨溃疡性结肠炎（UC）患者中血浆同型半胱氨酸（Hcy）、叶酸（FA）和维生素B12（VitB12）水平的改变及其临床意义。方法采用高效液相荧光检测法（HPLC—FD）检测112例UC患者和110名健康对照人群血浆Hcy水平．应用ELISA方法检测76例UC患者和12名健康对照人群血浆FA和VitB12水平。结果UC患者中血浆Hcy水平为（11．27±7．26）μmol／L,明显高于对照组的（8．19±4．81）μmol／L（P〈0．01）;UC患者中血浆Hcy水平与UC病情分度、病变范围及病程均无关（P〉0．05）。UC患者中血浆FA和VitB12水平分别为（7．64±1．95）nmol／L和（108．64±32．22）pmol／L,明显低于对照组[（9．14±1．23）nmol／L和（112．64±33．33）pmol／L,均P〈0．01]。高Hcy组患者血浆FA和VitB12水平显著低于低Hcy组（P〈0．05）。UC患者中血浆FA水平与UC病程呈负相关（P〈0．01）;而VitB12水平则与病程无相关性（P〉0．221）。结论UC患者血浆Hcy水平升高,可能与FA和VitB12水平下降有关。     

消化道肿瘤切除术后患者营养风险评估及血浆ghrelin水平检测的临床研究

目的评估消化道肿瘤切除术后患者的营养风险及其影响因素,并探讨血浆ghrelin的变化及其临床意义。方法采用营养风险筛查2002(NRS2002)评估133例消化道肿瘤切除术后患者的营养风险,检测97例患者和25名正常对照者的血浆ghrelin水平,并与临床特征进行关联分析。结果 133例消化道肿瘤切除术后患者中食道癌术后25例,胃癌术后76例,结肠癌术后17例,直肠癌术后15例,营养风险发生率为80.45%。营养风险与年龄、手术部位、手术方式、伴随疾病、合并用药、BMI、血红蛋白、白蛋白等因素有关(P<0.05),与性别、病程、吸烟、饮酒等因素无关。消化道肿瘤切除术后患者ghrelin水平明显低于正常对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。存在营养风险组ghrelin水平低于无营养风险组(P<0.05)。结论 NRS2002有助于发现消化道肿瘤切除术后患者的营养风险。血浆ghrelin水平有助于评估消化道肿瘤切除术后患者营养状况。     

抗TNF-α抗体对结肠炎小鼠肠黏膜免疫功能影响的研究

目的探讨抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体对葡聚糖硫酸钠(DSS)结肠炎小鼠肠黏膜免疫功能的影响。方法制备小鼠DSS结肠炎模型,实验分成正常对照组、DSS模型组、抗TNF-α抗体组,每组6只。抗TNF-α抗体5 mg/kg腹腔注射给药,正常对照组和DSS模型组用等量生理盐水腹腔注射,每周2次,注射时间共7 d。每日进行疾病活动指数(DAI)评分,实验结束后取小鼠结肠进行HE染色评分,结肠黏膜匀浆检测髓过氧化物酶(MPO)活性和TNF-α、干扰素γ(IFN-γ)、白介素13(IL-13)和白介素17(IL-17)水平。结果与正常对照组比较,DSS模型组小鼠出现明显体重减轻、便血和腹泻,DAI评分和HI评分增加(P<0.01),结肠匀浆中MPO活性、TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平均有不同程度的增加(P<0.01)。与DSS模型组比较,抗TNF-α抗体组小鼠DAI评分和HI评分明显降低(P<0.01),结肠匀浆中MPO活性、TNF-α、IFN-γ、IL-13和IL-17水平均有不同程度的降低(P<0.01)。结论 DSS结肠炎小鼠结肠局部免疫功能紊乱,抗TNF-α抗体具有调节DSS结肠炎小鼠结肠黏膜局部免疫功能的作用。     

活动期溃疡性结肠炎中血小板计数的变化及临床意义

目的探讨活动期溃疡性结肠炎(UC)患者血小板计数的变化及临床意义,明确UC患者是否存在高凝状态,PLT能否作为评估UC活动度的指标。方法统计分析51例活动期UC患者及20例健康对照的PLT、PT、FIB结果,分析UC患者PLT与炎症指标(ESR、CRP)相关性。结果活动期UC患者PLT高于对照组,具有统计学差异性(P<0.05)。按疾病活动程度分组后比较,组间比较具有显著差异性(P<0.01)。活动期UC患者PT与对照组相比无统计学差异,但病例组中FIB高于正常对照组(P<0.05)。相关性分析显示PLT与ESR及CRP呈正相关(相关系数分别为0.589;0.413)。结论活动期UC患者存在高凝状态,PLT与UC活动度相关,可能作为UC活动度评价指标之一。     

水飞蓟素对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的 探讨水飞蓟素对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用及其作用机制.方法 32只雄性SD大鼠被随机分为4组,以乙醇灌胃法建立大鼠急性酒精性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,观察肝脏病理形态学改变,并测定肝组织中TNF-α和IL-1β表达.结果 与模型对照组比较,水飞蓟素各剂量组肝脏脂肪变性明显减轻,血清ALT活性、肝匀浆MDA水平明显降低(P＜0.01和P＜0.05),SOD活性升高(P＜0.05),肝组织中TNF-α和IL-1β表达明显减少(P＜0.01),水飞蓟素高剂量组血清AST活性也明显降低(P＜0.05).结论 水飞蓟素对大鼠急性乙醇所致肝损伤具有保护作用.     

中国汉族人群N-乙酰基转移酶1基因多态性的检测分析

目的 探讨N-乙酰基转移酶1(NAT1)基因型检测方法及其基因多态性的分布。方法 在140名汉族健康人的外周血中,应用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性分析(RFLP)及多重PCR技术,进行NAT1等位基因分型研究。结果 应用PCR-RFLP 多重PCR方法避免了多种限制性内切酶之间相互干扰,可准确区分NAT1基因型。在140名检测标本中,NAT1*3,NAT1*4,NAT1*10和NAT1*11的发生频率分别是8．2％、49．6％、40％和2．2％。NAT1*4发生率明显低于欧美人群,但高于东南亚人群;而NAT1％10的发生率高于欧美人群,NAT1％3和NAT1*11的发生率较低,与大多数亚洲人群基本一致。结论 PCR-RFLP 多重PCR方法检测NAT1基因型特异性高;NAT1基因型分布与其他国家检测情况有所差异。     

N_(14)、阿司匹林、吲哚美辛对正常大鼠消化道致溃疡作用的研究

目的 观察N_(14)是否有致胃肠溃疡作用。方法 对正常大鼠进行连续ig给药7d,每日1次,并与阿司匹林、吲哚美辛进行对照,剂量分别为N_(14)25、50、100mg/kg,阿司匹林25、50、100mg/kg,吲哚美辛1.25、2.5、5mg/kg。结果 N_(14)组与溶媒对照组的结果相近,在发挥主要药效学的剂量下,各大鼠均无明显胃肠溃疡发生,阿司匹林有明显致胃溃疡作用(P<0.05),吲哚美辛有非常明显的致胃溃疡作用(P<0.01)。结论 N_(14)对胃肠道无致溃疡作用,为进一步研究该药提供实验数据。