稳定表达EGFP-LC3蛋白SH-SY5Y细胞系的构建

目的:建立稳定表达微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)与绿色荧光蛋白(EGFP)形成的融合蛋白(EGFP-LC3)的人神经母细胞瘤株SH-SY5 Y细胞系,验证EGFP-LC3点状聚集物能够实时直观地反映自噬小体和自噬流.方法:以人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞)的cDNA为模板,克隆LC3,并连接EGFP绿色荧光蛋白.将EGFP-LC3连接入慢病毒载体GV348中,构建慢病毒表达载体EGFP-LC3-GV348.慢病毒转染人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5 Y细胞),使用3μg/mL嘌呤霉素筛选并处理细胞1月,筛选得到EGFP-LC3稳转系.诱导自噬后,用共聚焦显微镜观察LC3荧光斑点并定量分析.Western blot检测目的蛋白表达情况.结果:经酶切证实,EGFP-LC3-GV348慢病毒表达载体构建正确.在激光共聚焦显微镜下,可以观察到细胞内的绿色荧光EGFP代表的自噬小体,活体染料LysoTracker Red DND-99将溶酶体染成红色荧光,红色荧光与绿色荧光重叠代表自噬溶酶体.无血清诱导自噬后,自噬小体(绿色荧光斑点)明显增加,差异有统计学意义(P<0.001).Western Blot免疫印迹可见EGFP-LC3融合蛋白表达条带.结论:成功构建了稳定表达EGFP-LC3的SH-SY5 Y细胞系,EGFP-LC3荧光斑点可以直观实时反映自噬囊泡,为进一步探讨神经退行性疾病的自噬机制提供了实验基础.     

晚期复发性卵巢癌热灌注化疗近期疗效探讨

卵巢癌以腹盆腔播散、种植为主要转移途经。手术减瘤合并化疗即使是完全缓解的患者,仍然有50％～70％限于腹盆腔内复发,最终导致死亡。腹腔内化疗使腹腔内较长时间保持高药物浓度,增加药物与肿瘤广泛接触。热疗可有效增加药物对肿瘤的渗透,增加药物的细胞毒作用,提高晚期复发性卵巢癌的疗效。本课题基于上述原理设计,以便验证热灌注化疗在晚期复发性卵巢癌治疗中的临床实用价值。     

2型糖尿病患者腰臀比与颈部动脉硬化关系的研究

目的探讨2型糖尿病患者腰臀比与颈部动脉硬化的关系。方法717例2型糖尿病患者进行颈部超声检查,并根据腰臀比的四分位将患者分为4组：第1四分位组（n=178）、第2四分位组（n：180）、第3三四分位组（n=176）和第4四分位组（n=183）。比较4组患者的年龄、糖尿病病程等基本情况及颈部动脉硬化发生率,同时以第1四分位组为参照,分析其余3组患者发生颈部动脉硬化的危险度。最后,运用二元Logistic回归探究腰臀比与颈部动脉硬化发生率之间的关系。结果①4组患者的年龄、吸烟史、糖尿病家族史、体重指数、收缩压、舒张压、甘油三酯、高密度脂蛋白一胆固醇、尿白蛋白／肌酐比值差异有统计学意义（P〈0．05）;②4组患者颈部动脉硬化发生率依次升高,分别为33．7％、45％、47．8％、54．6％,且差异存在统计学意义（P：0．001）;③与第1四分位组相比,其余3组发生颈部动脉硬化的危险度依次是第1四分位组的1．602倍（95％CI：1．042-2．462）,1．799倍（95％cI：1．174-2．757）,2．369倍（95％CI：1．548-3．627）且差异存在统计学意义（P〈0．05）;④二元Logistic回归显示,在控制其他变量后,腰臀比四分位与颈部动脉硬化发生率有相关性（P〈0．05）。结论有较高的腰臀比的2型糖尿病患者,发生颈部动脉硬化的危险度越大。     

品管圈活动对减少住院精神病患者出走的效果观察

目的:观察实施品管圈活动对降低长期住院精神病患者出走发生率的效果。方法:成立品管圈活动小组,对现况问题进行分析,并进行提高沟通技巧、强化安全意识、改进关键环节、提高综合素质等4项质量的改进。结果:开展预防住院精神病患者出走管理的品管圈活动后,精神科护士的护患沟通、常规操作、病情掌握、专业知识等方面考核的合格率较活动前明显提高(P<0.05),有统计学意义;导致住院精神病患者出走的各因素发生率及患者出走的发生率均较活动前明显下降(P<0.05),有统计学意义。结论:实施品管圈活动能有效的提高精神科护士的理论水平和实践管理水平,有效减少住院精神病患者出走的发生率。     

舒芬太尼预防儿童七氟醚全麻苏醒期躁动疗效观察

目的 探讨舒芬太尼预防儿童七氟醚全麻苏醒期躁动的临床疗效.方法 选择2015年10月至2016年12月期间肇庆市端州区妇幼保健院收治的104例全麻手术患儿,根据随机数表法分为观察组(n=52)和对照组(n=52),对照组给予常规七氟醚吸入麻醉,观察组联合应用舒芬太尼.比较两组患儿麻醉苏醒期躁动评分(PAED)、躁动发生情况及术后不良反应发生率.结果 观察组患儿的PAED评分及躁动发生率分别为(7.6±2.6)分和21.15%,均明显低于对照组的(10.1±3.1)分和40.38%,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患儿术后不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 舒芬太尼对儿童七氟醚全麻苏醒期躁动有较好的预防作用,且具有较好的安全性.     

肿瘤发生发展过程中相关微环境的动态改变研究进展

在肿瘤干细胞(TSC)的自我更新及分化过程中,肿瘤微环境(TME)发挥着重要作用。在癌变过程中,微环境顺应肿瘤的发展而变化,促使肿瘤细胞获得更多的侵袭性。对肿瘤发展过程中微环境改变的深入研究,将有可能为肿瘤治疗带来新的思路和方法。     

中国女性血清瘦素浓度与年龄的关系及与其他种族女性的比较

目的：调查中国长沙地区成年女性血清瘦素（leptin）浓度与年龄的关系,建立女性瘦素参考值,并分析其与其他种族的差异。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒,测定690例成年健康女性（年龄20～81岁）的血清瘦素浓度。美国非西班牙白人、非西班牙黑人和美国墨西哥女性的血清瘦素水平从文献获得。结果：血清瘦素水平随年龄而增加（r=0.224,P〈0.01）,采用3次回归模型拟合优度最佳。瘦素浓度与体质量（r=0.574）和体质量指数（r=0.618）呈显著正相关。体质量正常组、超体质量组和肥胖组,瘦素浓度的几何平均值分别为（8.94±1.82）,（17.6±1.89）和（34.7±1.69）μg/L,3组之间呈明显梯度差异（P〈0.01）。绝经前组、围绝经组和绝经后组瘦素浓度分别为（9.68±1.81）,（11.7±1.89）和（11.4±2.21）μg/L,绝经前组显著低于围绝经组和绝经后组（P〈0.05）。体质量正常组（n=539）血清瘦素浓度的参考值为5.30～12.6μg/L,本组女性瘦素浓度与年龄的拟合曲线显著低于美国非西班牙白人、非西班牙黑人和美国墨西哥女性。结论：该研究证实,中国成年女性血清瘦素浓度增高与年龄增长呈正相关,中国成年女性血清瘦素浓度参考值5.30～12.6μg/L,中国成年女性血清瘦素浓度与美国非西班牙白人、非西班牙黑人和美国墨西哥女性存在显著的种族差异。     

2009年丽江市玉龙县鼠疫监测报告

目的 通过对丽江市玉龙县黄山镇南溪村、太安乡、石头乡等地区开展鼠疫监测工作,及时发现鼠疫疫情,并采取有效的防控措施,防止鼠疫疫情的扩散和漫延.方法 按照<全国鼠疫监测方案及实施细则>的要求进行鼠蚤监测,以及鼠蚤的鉴定和细菌学、血清学检验.结果 全县三个乡为监测点,监测面积为5431.8 hm2,全年共布笼夹23250个,捕鼠1569只,鼠密度为0.29%,捕鼠率为6.75%.共梳检蚤64匹,带蚤鼠43只,鼠体染蚤率为2.74%,总蚤指数为4.08.2009年共检验材料1372份,从黄山镇南溪村委会鹿子村自死鼠(齐氏姬鼠)体内分离到鼠疫菌1株.结论 玉龙县南溪村鼠间鼠疫流行态势一直很活跃,由于防治措施得当,未波及人间,因此鼠疫防控工作任重而道远.     

长效GnRH-a长方案在年轻患者COH中应用优势的探讨

目的:通过比较促性腺激素释放激素(GnRH-a)长效长方案和短效长方案在控制性超排卵(COH)中应用的效果,探讨长效GnRH-a长方案在年轻患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中应用的优势。方法:回顾性分析GnRH-a长效长方案(1045个周期)和GnRH-a短效长方案(555个周期)在年轻患者COH中应用的资料,按长方案降调节中使用长效或短效GnRH-a分为两组,观察比较两组超排卵效果及助孕结局。结果:在年轻患者中长效长方案组的促性腺激素(Gn)用量明显减少、超排时间延长、周期取消率升高,hCG日LH水平明显低于短效长方案组,获卵数、可移植胚胎数均明显多于短效长方案组,冷冻率明显高于短效长方案组,差异均有统计学意义(P0.05),两组临床妊娠率比较无明显差异(P0.05)。结论:对于年轻、卵巢储备正常的患者人群,长效长方案不失为控制性超排卵方案的一种好选择。