补骨脂酚的提取纯化工艺优选及其对骨质疏松症的治疗作用分析

目的:优选补骨脂酚的提取纯化工艺,并考察其对骨质疏松症的治疗作用。方法:使用乙醇回流法提取,经D101型大孔树脂纯化,通过单因素试验优选工艺条件,冷冻干燥后得到补骨脂酚;采用斑马鱼体内试验评价补骨脂酚对骨密度和骨骼发育钙化的影响。结果:优选的工艺条件为加8倍量85%乙醇浸泡过夜,回流提取3次,每次2 h,边搅拌边往补骨脂酚粗提物中加入0.2%氢氧化钠水溶液至完全溶解,过预处理好的D101型大孔树脂柱处理,上样流速1 BV·h~(-1),静置4 h,加水6 BV洗脱,用60%乙醇2 BV洗脱,加95%乙醇4 BV洗脱,收集95%乙醇的洗脱液;制备的补骨脂酚质量分数80%,收率10%。斑马鱼体内活性研究表明补骨脂酚能提高斑马鱼骨质疏松症的骨密度,且能促进正常斑马鱼骨骼发育钙化。结论:此工艺具有绿色环保、操作简便等优点,所得补骨脂酚的纯度和收率均比较理想,可开发成预防或治疗骨质疏松症的药品和食品。     

UPLC-MS/MS同时测定谷红注射液中7种有效成分

目的:建立同时测定谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素含量的方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。Phenomenex Kinetex C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.5 m L·min~(-1);质谱采用正负离子同时监测,多反应监测模式(MRM),进样量5μL。结果:谷红注射液中乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素质量浓度线性范围分别在10.36~663.0,0.500 0~32.00,0.047 8~3.059,0.200 0~12.80,0.032 4~2.074,0.675 0~43.20,0.142 5~9.120μg·L~(-1)线性关系良好;平均加样回收率分别为97.0%~99.2%,RSD3.4%(n=6);7种成分在3批样品中的质量浓度依次为乙酰谷酰胺28.5~32.4 g·L~(-1),羟基红花黄色素A 1.02~1.23 g·L~(-1),芦丁14.3~17.6 mg·L~(-1),紫丁香苷101~123 mg·L~(-1),山柰素12.1~14.9μg·L~(-1),山柰酚0.138~0.155 mg·L~(-1),槲皮素73.4~95.6μg·L~(-1)。结论:该方法简、快速、高效、准确、可靠,适用于同时测定乙酰谷酰胺,羟基红花黄色素A,芦丁,紫丁香苷,山柰素,山柰酚,槲皮素7种有效成分,为该制剂建立更全面的质量控制方法提供依据。     

长柱金花茶叶的化学成分研究(Ⅱ)

目的研究长柱金花茶Camellia nitidissima var.longistyla叶的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、制备液相等多种手段进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从长柱金花茶叶95%乙醇提取物中分离得到16个化合物,分别鉴定为山柰酚(1)、3,5,6,7,4′-五羟基二氢黄酮(2)、6-羟基山柰酚(3)、(-)-表阿福豆素(4)、(-)-表儿茶素(5)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(6)、α-菠菜甾醇(7)、β-胡萝卜苷(8)、5,7,3′,4′-四甲氧基黄酮(9)、7,3′,4′-三甲氧基-5-羟基黄酮(10)、5,7,3′,4′,5′-五甲氧基黄酮(11)、3-O-乙酰齐墩果酸(12)、正三十四烷醇(13)、β-香树脂醇(14)、α-菠菜甾醇-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(15)、芦丁(16)。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到,其中化合物2、3、9~11为首次从该属植物中分离得到。     

厚朴转录组SSR标记的开发及功能分析

目的分析厚朴转录组中的SSR位点,并设计引物初步验证,对含SSR的序列进行功能分析,为厚朴分子辅助标记育种和资源保护提供了有利工具。方法将通过厚朴高通量转录组测序获得的Unigene序列进行SSR位点挖掘,利用Primer.03进行引物设计,随机挑选45对引物进行PCR,并利用Blast软件对含有SSR的Unigene进行功能分析。结果在16 369条厚朴转录组序列中共获得8 635个SSR位点,出现频率为52.75%。SSR序列中单核苷酸、二核苷酸和三核苷酸为优势重复类型,重复比例最高为10次,主导重复基元类型为A/T(47.16%)、AG/CT(31.74%)、AAG/CTT(6.53%)。45对引物中22对(48.89%)可以扩增出预期大小的条带。含SSR的Unigene与能量和氧化还原等代谢过程,以及RNA转运、剪接体和植物激素信号转导等通路有关。结论厚朴高通量转录组序列的SSR位点具有类型丰富、特异性强和潜能高等特点,同时SSR序列的功能分析将为厚朴基因挖掘和分子标记辅助育种提供有利的工具。     

大麻酚CB1受体拮抗剂对疼痛和神经脱髓鞘病变的作用

虽然大麻本身是一种成瘾性毒品，但体内却存在其特异性受体，表明它和阿片一样是人体固有的化学调节物质。很多报道都显示大麻酚受体拮抗剂具有治疗慢性痛的功效。但有关大麻受体拮抗剂在治疗过程中的其他潜在功效却无人报道。Milano-Bicocca大学的Barbara Costa等对此进行了深入的研究。他们观察了重复使用选择性大麻酚CB1受体拮抗剂SR141716在坐骨神经慢性限制性损伤（CCI）模型大鼠上的作用。     

眶下神经酚甘油与阿霉素阻滞治疗三叉神经痛的疗效比较

三叉神经痛是一种顽固性疼痛疾病，在临床中的治疗方法较多，但疗效不确切，早期内科治疗基本无效。神经毁损疗法成为治疗三叉神经痛的重要方法，但神经毁损性药物酚甘油的来源及保存困难。本文对眶下神经酚甘油与阿霉素阻滞治疗三叉神经痛的疗效进行了观察，现报告如下：     

中西医结合治疗不孕症体会

<正>不孕症是一个困扰社会和家庭的实际问题。世界卫生组织统计各国不孕症发生率不尽相同,从5%～15%,我国不孕症发生率较低[1]。笔者自2004年以来采用中药少腹逐瘀汤联合克罗米酚治疗不孕症17例,取得了较为满意的效果。     

白Bi丸的质量标准研究

目的：建立白Bi丸的质量控制标准。方法：采用环已烷一醋酸乙酯(6：0．5)为展开剂，以丹皮酚为对照品，对处方中的牡丹皮进行薄层鉴别，采用醋酸乙酯-甲酸-水(10：2：2)为展开剂，以绿原酸为对照品，对处方中的金银花进行薄层鉴别。结果：薄层色谱鉴别中，供试品(白Bi丸)色谱在与丹皮酚及绿原酸对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，而阴性对照溶液在相应的位置上无对应的斑点。结论：该方法稳定、重现性好，可以做为白Bi丸的质量控制标准。     

米力农、酚苄明、硝酸甘油与维拉帕米混合液预防与治疗人桡动脉痉挛的实验研究

目的 研究比较米力农(MIN)、酚苄明(PHE)、硝酸甘油与维拉帕米混合液(NVC)对人桡动脉痉挛的预防与治疗作用. 方法 收集2012年3～9月在沈阳军区总医院采用自体桡动脉行冠状动脉旁路移植术(CABG)30例患者的剩余桡动脉,制成60个宽3 mm左右的血管环并悬挂在Organ-Bath水浴槽中,将其按照随机数字表法分成4组:MIN组,PHE组,NVC组和空白对照组(对照组).先取20个血管环进行痉挛缓解实验,每组5个.用终浓度为10-3 mol/L的苯肾上腺素致血管环痉挛,分别加入PHE浓度为1 mmol/L、MIN浓度为30 μmol/L、NVC浓度各为30 μmol/L,对照组中加入Krebs-Ringer's缓冲液,观察比较不同血管舒张药对痉挛血管的舒张能力;然后另取40个血管环进行药物预处理作用时间对比实验,每组10个,血管环在不同药物中分别浸泡30 min后立即加入终浓度为10-3 mol/L的苯肾上腺素,观察和描记经过预处理后血管环发生收缩程度随时间改变的情况. 结果 在血管环痉挛缓解实验中,NVC组痉挛血管环缓解最为迅速(P＜0.01),给药3 min后缓解率达99.14％; MIN组血管环缓解稍慢而平稳(P＜0.05),3 min时缓解率达40.73％,9 min时达96.83％,至第11 min时完全缓解;PHE组缓解血管痉挛最为缓慢(P＜0.01):3 min时缓解了10.38％,9 min时缓解了78.61％,至17 min时才达到完全缓解;对照组无缓解.在桡动脉血管环预处理实验中,对照组在加入苯肾上腺素后立即产生收缩(痉挛),收缩率10％; MIN组也立即产生收缩,但收缩幅度较对照组缓慢(P＜0.01),120 min收缩45.81％,240 min收缩63.28％;NVC组血管环在实验开始时没有立即产生收缩,直到120 min后血管环静息张力才逐渐增大,至240 min实验结束时收缩程度为46.89％;PHE组在整个实验过程中没有产生任何收缩. 结论 几种药物成分都能不同程度地预防和缓解桡动脉痉挛,但每种药物作用特点、缓解痉挛程度以及作用的时效性明显不同.NVC对缓解已经痉挛的桡动脉最有效,而经PHE预处理的桡动脉在受到刺激后最不易产生新的痉挛.     

LC调节人成骨样MG-63细胞表达OPG、RANKL分子机制的研究

目的 探讨大黄酸哌嗪雌酚酮（rhein-piperizinyl-estrone,命名为 LC）调节人成骨样MG-63细胞表达骨保护素(osteoprotegerin, OPG)、NF-κB激活受体配体(receptor activator of NF-κB ligand, RANKL)的分子机制。方法 在原工作基础上,选择兼有两种雌激素受体(estrogen receptor, ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,采用RT-PCR、免疫印迹及小RNA干扰等技术,探讨LC对人成骨细胞产生的骨吸收调节因子OPG、RANKL表达的作用及作用机制。结果 LC可上调MG-63细胞OPG表达及下调RANKL表达,该作用可被纯ER阻断剂ICI 182,780完全阻断,应用小RNA干扰技术进一步证实LC对成骨细胞OPG、RANKL表达的调节作用主要是由ERα介导的。结论 LC调节成骨细胞表达OPG、RANKL是经ER途径、主要是由ERα介导的。