肺动脉粥样硬化兔肺动脉壁骨桥蛋白表达的变化

目的探讨肺动脉粥样硬化模型兔肺动脉壁骨桥蛋白(OPN)表达的变化。方法 24只新西兰兔,随机平均分为正常对照组和高脂模型组,分别给予基础饲料和高脂饲料(基础饲料+1%胆固醇+5%猪油)喂养12周后取血和肺动脉,分析血清中相关脂质成分的变化;HE染色观察肺动脉壁的形态结构;免疫组化法和Western blot检测肺动脉粥样硬化兔肺动脉壁OPN的表达。结果成功建立肺动脉粥样硬化兔模型,高脂模型组在高脂饮食12周后,与正常对照组比较,血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)有明显增加(P<0.05),其中以LDL和LDL/HDL比值升高最明显;HE染色显示高脂模型组肺动脉内膜增厚,细胞间隙逐渐增大,泡沫细胞形成,可见明显的动脉粥样硬化斑块;免疫组化法和Western blot显示高脂模型组肺动脉壁OPN的表达较正常对照组显著增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高脂饮食可导致肺动脉粥样硬化形成,OPN在肺动脉粥样硬化斑块形成中起重要的作用。     

Osteopontin knockdown suppresses non-small cell lung cancer cell invasion and metastasis

Background Osteopontin (OPN) was identified as one of the leading genes that promote the metastasis of malignant tumor.However,the mechanism by which OPN mediates metastasis in non-small cell lung canc...     

骨桥蛋白与基质金属蛋白酶9在子宫内膜病变中的表达

 目的检测骨桥蛋白(OPN)和基质金属蛋白酶9（MMP9）在正常子宫内膜、子宫内膜病变及子宫内膜腺癌组织中的表达情况,探讨二者在子宫内膜癌变发生、发展过程中的关系。方法收集我院妇科经手术病理证实的子宫内膜腺癌75例、子宫内膜不典型增生22例及同期正常增殖期子宫内膜15例,采用免疫组织化学SP染色法检测OPN和MMP9的表达情况。结果在子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌组织中OPN与MMP9的阳性表达率分别为72.73%、80.00％和63.64%、70.67%,均明显高于正常增殖期子宫内膜组织(P<0.05)。OPN、MMP9的阳性表达率与子宫内膜腺癌的组织分级及肌层侵润呈正相关(r=0.2879,P<0.05)。结论本研究显示OPN及MMP9在子宫内膜癌变发生及发展中关系密切。     

特异性shRNA干扰下调骨桥蛋白表达增强宫颈癌HeLa细胞对化疗药物的敏感性

目的 探讨短发卡RNA(shRNA)干扰沉默骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因对宫颈癌细胞株HeLa化疗敏感性的影响及其可能机制。方法 OPN shRNA真核表达质粒pGCsi3.0在脂质体介导下转染HeLa细胞(shOPN组),以转染空载质粒的细胞(shNon组)和未转染细胞(Con组)作为对照。分别用0、0.5、1、2 μg/mL顺铂和0、50、100、500 nmol/L紫杉醇处理各组细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡。蛋白质印迹分析检测下调OPN表达后细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bcl-x_L、Bcl-2和Bax表达的变化。结果 2 μg/mL顺铂处理后shOPN组细胞凋亡率为(44.53±2.78)%,与shNon组\[(15.34±2.18)%\]和Con组\[(15.37±1.03)%\]比较差异有统计学意义(P<0.05)。500 nmol/L紫杉醇处理后shOPN组细胞凋亡率为(51.46±1.49)%,与shNon组\[(19.16±1.87)%\]和Con组\[(17.03±2.37)%\]比较差异有统计学意义(P<0.05)。下调OPN表达后顺铂对cleaved caspase-3的活化作用增强(P<0.01),同时抗凋亡蛋白Bcl-x_L、Bcl-2的表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调。结论 OPN沉默后可通过促进宫颈癌HeLa细胞的凋亡进而增强细胞对化疗药物的敏感性,OPN的RNA干扰可能成为一种新的治疗策略应用于宫颈癌的新辅助化疗。     

抗骨桥蛋白(OPN)和整合素β3抗体中和OPN、整合素β3对小鼠胚泡种植的影响

目的研究骨桥蛋白抗体和整合素β3抗体对小鼠胚泡着床的影响。方法取20只孕4d小鼠,分别在两侧子宫角内注射骨桥蛋白抗体、整合素β3抗体,对照组注射生理盐水,正常妊娠空白对照组未行任何处理,于孕8d处死小鼠,统计胚泡着床数及妊娠率,取子宫观察内膜的组织学变化。结果结果显示骨桥蛋白抗体组小鼠妊娠率为60%,平均胚胎着床数为1.6±1.19,整合素β3抗体组妊娠率为70%,平均胚胎着床数为1.7±1.28,明显低于生理盐水组及空白对照组(90%,10.0±1.63及100%,10.5±1.58),提示骨桥蛋白抗体和整合素β3抗体明显抑制小鼠胚泡着床。结论骨桥蛋白和整合素β3抗体明显抑制小鼠胚泡的着床并导致子宫内膜的形态学变化,这提示骨桥蛋白和整合素β3与子宫内膜容受性获得有关。骨桥蛋白和整合素β3参与了小鼠胚泡的着床。     

骨桥蛋白(OPN)在围植入期小鼠子宫内膜中的表达

目的 检测骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达,明确OPN表达规律.方法 将清洁级性成熟期昆明小鼠44只,雌性24只,雄性20只,雌性小鼠阴道涂片检查为动情前期,在此期注射PMSG和HCG,4只雌鼠不合笼(孕D0,对照组),用颈椎脱臼法处死,剪取子宫组织,直接液氮保存和福尔马林固定保存,其余的雌:雄小鼠1∶1合笼,次日检查阴栓,发现阴栓计为妊娠第1天.分别于妊娠第4、5、6、7和8天用颈椎脱臼法处死,迅速剖腹,剪取子宫组织予以保存(实验组),采用免疫组化方法和Western-blotting技术分析围植入期小鼠子宫内膜中的骨桥蛋白表达规律,采用RT-PCR技术半定量分析围植入期小鼠子宫内膜骨桥蛋白mRNA表达特征.结果 小鼠整个围植入期子宫内膜中均有OPN表达,但表达的高峰在着床窗口期,即孕D5.孕D0(非孕)子宫内膜的OPN表达较弱,孕D4时表达增强,孕D5时表达最强,孕D6时表达突然回落,孕D7、孕D8时表达减弱,降至非孕水平.结论 骨桥蛋白在围植入期小鼠子宫内膜中的表达随着孕龄的增加逐渐增强,但表达的高峰在孕D5,与植入窗的开放相吻合,是子宫内膜接受性的客观标志,提示骨桥蛋白在胚泡着床过程中起重要作用,该研究为阐明胚泡着床机制提供了实验依据.     

骨关节炎中骨桥蛋白表达及意义

目的:探讨细胞因子-骨桥蛋白(OPN)在骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者中的表达情况及意义。方法:选取接受膝关节置换手术治疗的骨性关节炎患者软骨标本42例,按Mankin评分分为轻度退变、中度退变、重度退变3组,取正常膝关节软骨10例作为对照组;对标本进行免疫组织化学染色,测定OPN表达情况。结果:OA组OPN吸光度明显高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05);OPN在轻、中、重度退变组的表达差异有统计学意义(P<0.05);OPN平均灰度值与Mankin病理评分呈显著负相关(r=-0.872,P<0.01)。结论:OPN在骨关节炎软骨中高表达,且与病变程度相关,与骨关节炎发生发展也有密切关系。