Investigation of the influence of glycyrrhizin on the pharmacokinetics of celastrol in rats using LC-MS and its potential mechanism

1.?The aim of this study was to investigate the effects of glycyrrhizin on the pharmacokinetics of celastrol in rats.

2.?Twelve male Sprague–Dawley rats were randomly assigned to two groups: control group and test group. Test group was pretreated with glycyrrhizin at a dose of 100?mg/kg/day for 10 days, and then the two groups were orally administered with celastrol at a dose of 1?mg/kg. The concentration of celastrol was determined using a sensitive and reliable LC-MS method.

3.?The results showed that glycyrrhizin could significantly decrease the plasma concentration (from 64.36?ng/mL to 38.42?ng/mL) and AUC_0?t (from 705.39 to 403.43?μg·h/L) of celastrol in rats. To investigate its potential mechanism, the effects of glycyrrhizin on the transport and metabolic stability of celastrol were investigated using Caco-2 cell monolayer transwell model and rat liver microsome incubation systems. The Caco-2 cell monolayer transwell experiments indicated that glycyrrhizin could increase the efflux ratio of celastrol (4.02 versus 6.51). However, the rat liver microsome incubation experiments showed that glycyrrhizin could significantly increase the intrinsic clearance rate of celastrol from 20.3?±?3.37 to 38.8?±?4.18?μL/min/mg protein.

4.?In conclusion, these results indicated that the herb–drug interaction between glycyrrhizin and celastrol might occur when they were coadministered.     

雷公藤固体分散体大鼠在体肠吸收研究

目的研究雷公藤固体分散体的大鼠肠吸收动力学特征,考察不同肠段、药物浓度、pH值和P-糖蛋白(P-gp)对肠吸收的影响。方法采用大鼠在体单向肠灌流模型,HPLC法测定各指标成分含量,重量法校正数据并计算各指标成分的吸收速率常数(Ka)和表观渗透系数(Papp)。结果将原料药制成固体分散体后,雷公藤各成分在全肠段的Ka较原料药显著增大(P0.05),雷公藤各指标成分在各肠段均有吸收且存在一定差异。随着药物浓度的升高,各指标成分的吸收均具有饱和现象。酸性环境(pH5.4)有利于各指标成分的吸收,尤其是酸性成分雷公藤红素。加入P-gp抑制剂后,雷公藤红素的吸收与不加P-gp抑制剂比较有显著差异(P0.05),可能为P-gp底物。结论雷公藤固体分散体各指标成分在全肠段均有吸收,且具有饱和现象;酸性环境有利于各成分的吸收,雷公藤红素吸收过程受药物浓度和P-gp的外排影响,可能为P-gp底物;制成固体分散体能显著提高雷公藤各成分的吸收,提示各指标成分均为生物药剂学系统II类药物,制剂研发过程中增加药物溶解度或可提高制剂的生物利用度。     

雷公藤红素纳米混悬剂的制备及其抗肿瘤作用研究

目的制备雷公藤红素纳米混悬剂,并进行体内外抗肿瘤作用研究。方法采用超声注入联合旋转蒸发法制备雷公藤红素纳米混悬剂,以粒径大小为指标,筛选合适的稳定剂;采用动态光散射法、透射电镜考察粒径和形态,并对其不同介质稳定性、体外释放、溶血性、体外抗肿瘤活性进行研究;建立H22荷瘤小鼠模型,以雷公藤红素注射液为对照组,2 mg/kg iv给药,考察体内抗肿瘤作用。结果聚乙二醇-聚己内酯(m PEG2000-PCL2000)为雷公藤纳米混悬剂的优良的稳定剂,所制备的纳米混悬剂粒径为(67.1±3.0)nm,Zeta电位为(-10.4±1.45)m V,多分散性指数为0.232±0.08,近乎为球形,分布比较均匀。在磷酸缓冲液(PBS)、血浆、生理盐水、5%葡萄糖中均稳定;体外缓慢释放,在144 h累积释放率达到74.04%;MTT结果显示雷公藤红素纳米混悬剂对HepG2细胞的毒性强于溶液(IC50,1.179μg/m L vs 2.377μg/m L,P0.05)。体内研究中雷公藤红素纳米混悬剂对H22荷瘤小鼠的的抑瘤率显著高于注射液组(70.36%vs 51.1%,P0.05)。结论制备的雷公藤红素纳米混悬剂粒径小、载药量高、稳定性好,显著提高了雷公藤红素的抗肿瘤效果,可以作为雷公藤红素作为抗肿瘤药物应用的合适剂型。     

基于网络药理学和实验验证探讨雷公藤红素抗血管重塑的作用机制

目的 基于网络药理学和实验验证探讨雷公藤红素抗血管重塑的潜在靶点和作用机制。方法 通过SwissTargetPrediction、PharmMapper数据库筛选出雷公藤红素作用靶点。采用NCBI Gene、GeneCards及OMIM数据库预测血管重塑相关靶点,聚焦共同靶标,借助Cytoscape 3.8.1及STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction,PPI）并筛选核心靶点。通过构建体外血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖模型和小鼠股动脉拉伤模型,考察雷公藤红素对VSMCs增殖、促炎细胞因子水平及关键靶点表达的影响。结果 共获得雷公藤红素靶点56个,血管重塑靶点737个,药物疾病共同靶点20个,核心靶点有细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、原癌基因c-Myc、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3）等。体外细胞实验表明,雷公藤红素显著抑制A7r5血管平滑肌细胞增殖能力（P<0.01）,显著下调cyclin D1、c-Myc、NLRP3和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cystein-asparate protease-1,Caspase-1）的蛋白表达（P<0.05、0.01）。动物实验结果显示,雷公藤红素显著抑制股动脉拉伤小鼠模型股动脉NLRP3和Caspase-1的蛋白表达水平（P<0.01、0.001）,降低血清中白细胞介素-6（interleukin-6,IL-6）和IL-1β水平（P<0.01、0.001）。结论 雷公藤红素可抑制VSMCs增殖,减轻损伤血管的重塑,其作用机制可能与改善血管炎症有关。     

雷公藤红素在胶质细胞瘤中的研究进展及应用

雷公藤红素(celastrol,Cel)是从天然化合物雷公藤中提取的有效成分,具有良好的抗肿瘤活性及其他药理作用。随着近些年的研究发现Cel具有良好的抗肿瘤活性的同时也具有透过血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的能力,是治疗脑部肿瘤的潜力的药物,但受制于它严重的肝脏毒性,导致其临床应用前景存疑。胶质细胞瘤(glioma,GMA)是脑部高发的一种肿瘤,确诊后的存活率<5%,目前临床可以使用的药物较少,因此,探寻新的药物或是新的药物递送策略来治疗神经GMA十分迫切。有研究发现Cel具有良好的抗肿瘤活性,并且对GMA也具有良好的抑制作用,但相关机制还尚未有系统的归纳与拓展。由于Cel在临床应用于GBA还面临着诸多问题,未来使用何种手段使Cel能够高效地通过BBB,并递送到GMA部位发挥靶向治疗作用的同时,又能使其肝毒性降低需要进一步思考。本文对近些年Cel在多种肿瘤及GMA中的机制和研究结果进行归纳总结并进行拓展。并将近年来Cel结合纳米载体发挥增效减毒的新应用进行综述,以便更加清晰地将Cel在治疗GMA中的作用以及如何将Cel透过BBB的递送方法进行系统性地归...     

雷公藤红素调控NLRP3炎症小体改善大鼠代谢相关脂肪性肝病研究

目的 评价雷公藤红素对高脂饮食诱导的代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）大鼠的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法 60只健康雄性Wistar大鼠,随机分为6组：对照组、模型组、水飞蓟素胶囊组（阳性对照,100 mg·kg⁻¹）和雷公藤红素低、中、高剂量（125、250、500 μg·kg⁻¹）组,每组10只。对照组给予普通饲料喂养,其余5组给予高脂饲料喂养建立MAFLD模型,造模4周后,从第5周开始给药,ig给予相应剂量的药物至第8周。记录大鼠体质量和肝脏湿质量,计算肝脏系数;腹主动脉取血,检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平;HE染色观察肝脏病理变化;Western blotting法检测肝脏中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）和半胱氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）蛋白表达水平。结果 与模型组比较,雷公藤红素各剂量组的肝脏病理学表现均有所改善,肝脏系数均显著降低（P＜0.05、0.01）;中、高剂量组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、AST、ALT、TNF_-α和IL-1β水平均显著降低（P＜0.05、0.01）;肝脏中NLRP3和Caspase-1的蛋白表达显著减少（P＜0.05、0.01）。结论 雷公藤红素可明显减轻MAFLD大鼠的肝脏病理学损伤,改善血脂水平,其机制可能与调控NLRP3通路密切相关。     

雷公藤红素对人肝癌MHCC97H细胞侵袭转移的影响及机制研究

目的：探讨雷公藤红素对人肝癌MHCC97H细胞侵袭转移的抑制作用及相关机制。方法：应用Transwell技术观察不同浓度（2.5μmol·L^-1、5.0μmol·L^-1、10.0μmol·L^-1）雷公藤红素对MHCC97H细胞侵袭力和迁移力的影响。Westernblot法检测雷公藤红素处理后对C-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路及NF-κB/p65核浆分布变化的影响。结果：雷公藤红素处理后24 h,迁移实验及侵袭实验结果显示,加药组透膜细胞数较对照组明显减少（P〈0.05）。Westerblot结果显示磷酸化JNK表达上调,NF-κB/p65入核减少。结论：雷公藤红素体外具有抑制人肝癌细胞侵袭和转移的作用,其机制可能与活化JNK通路、抑制NF-κBp65入核有关。     

中医药治疗慢性荨麻疹药理作用和临床应用的研究进展

慢性荨麻疹是一种慢性炎症性疾病,中医称为“瘾疹”。中药治疗慢性荨麻疹具有整体论治、不良反应小、疗效显著的优势。从中药单体成分、单味药、药对、复方4个方面总结了中医药治疗慢性荨麻疹的药理作用,还从中药复方、中西药联合、针刺、蒙药、穴位埋线等方面分析了中医药治疗慢性荨麻疹的临床研究,以期为慢性荨麻疹疾病的中医药诊治提供参考。但临床上对于中药作用于慢性荨麻疹的治疗机制尚不明确,缺乏大量循证医学证据,今后还需进一步探讨作用机制,提供更有力的科学依据。     

雷公藤红素体内与体外急性毒性试验结果的比较

[目的]研究雷公藤红素对3T3细胞的毒性作用,获得的细胞毒性结果预测急性毒性半数致死量(LD50),并与采用小鼠上下法(UDP)和Bliss法测定的急性毒性数值进行比较. [方法]以已验证的3T3细胞中性红摄取为细胞毒性模型,以0.01～2.05 mg/L的8个浓度(剂间比为2.15)的雷公藤红素进行处理,分别于处理后48h进行中性红摄取试验,计算半数抑制浓度(IC50).以RC数学模型预测其全身急性毒性LD50.参考此LD50值设定起始剂量进行小鼠上下法实验.取70只ICR小鼠,雌雄各半,以3、4、5、6、7、8mg/kg的雷公藤红素溶液和0mg/kg[4％二甲亚砜(DMSO)氯化钠注射液]静脉给药,观察14d,根据动物死亡率采用Bliss法计算LD50. [结果]雷公藤红素3T3细胞中性红摄取试验的IC50值为(0.1197 ±0.0187)mg/L(n=2),决定系数R2＞ 0.96,预测其全身急性毒性LDs0为5.375 mg/kg.上下法起始剂量设为3.3 mg/kg,测得雷公藤红素在ICR小鼠的LD50值为3.157 mg/kg,95％可信区间为3.1～5.5 mg/kg.小鼠Bliss法测定急性毒性LD50为4.899mg/kg,95％可信区间为4.483～5.354 mg/kg. [结论]雷公藤红素的体外3T3细胞毒性预测急性毒性与体内方法所得数值一致.     

南蛇藤中雷公藤红素的提取及纯化工艺研究

目的：研究南蛇藤中雷公藤红素最佳提取及纯化工艺。方法：以雷公藤红素提取率为指标,分别进行回流提取、超声波提取和超临界提取,并通过正交实验设计,优化超声波提取工艺;以硅胶柱层析法进行纯化研究。结果：南蛇藤粉末超声波提取最佳工艺条件为：10倍量甲醇溶剂,超声功率400W,单次辐射时间5s,超声提取时间40min;经柱层析后,样品中雷公藤红素的含量不低于90％。结论：与其他提取工艺相比,超声波提取工艺提取时间短、提取率高,工艺简单可行;柱层析法简单,纯化度高。