用阴道毛滴虫可溶性抗原和单克隆抗体进行ELISA试验研究

目的　探讨用阴道毛滴虫可溶性抗原和单克隆抗体进行ELISA试验的条件。方法　选用不同抗原浓度(50μg／ml～400μg／mg)包被酶标板,选用不同孵育时间(15～120)、不同封闭剂(脱脂奶粉、吐温20/PBS、牛血清白蛋白、小牛血清)和不同酶标板(国产和进口)。结果　以200μg／ml抗原量,用1%牛血清白蛋白封闭,37℃孵育1小时为本试验最佳条件。结论　检测10例滴虫性阴道炎患者血清,阳性率为90%,与多种寄生虫感染血清或单克隆抗体均无交叉反应。X     

Bcl-2基因和肿瘤细胞耐药的研究

肿瘤细胞耐药严重影响化疗效果和肿瘤预后 ,是肿瘤治疗的重要障碍。肿瘤细胞耐药存在多种机制 ,并在不同阶段启动 ,使细胞在恶劣环境中的生存能力增强。实验表明 ,许多化疗药物通过诱导或强化肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用 ,因此细胞的凋亡抑制能够促进肿瘤细胞生存并对化疗药物产生耐受 [1] 。 Bcl- 2是最受关注的抑制细胞凋亡的基因 ,它的高表达可阻断多种因素诱导的细胞凋亡 ,使细胞对放化疗耐受 ,被认为是一种新型的耐药基因 [2 ]。1　Bcl- 2基因及其蛋白Bcl- 2是 1 985年 Tsujimoto在研究人滤泡性非霍奇金淋巴瘤染色体 t( 1 4;1 8)易位…     

薄层扫描法测定益肾胶囊中大黄素

应用薄层扫描法对益肾胶囊中大黄素进行了定性定量方法研究,对实验条件进行优选,排除了干扰,结果满意,加样回收率为98．66％,RSD＝1．04％。     

增龄对血瘀证及血浆血栓素B_2和6－酮－前列腺素F_（1α）水平的影响

对１３４例２０岁以上健康人进行了血瘀证的调查，发现４５．５２％的健康人群表现血瘀征候，随着增龄血瘀征候检出率呈递增变化。采用放射免疫分析法检测血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１ａ（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α）及Ｔ／Ｋ比值。结果显示：中年及老年组ＴＸＢ２水平均明显高于青年人（Ｐ均＜０．０１）。而６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１αｖ水平各年龄组变化不大，Ｔ／Ｋ比值老年人显著高于青年人（Ｐ＜０．０１）。表明随着年龄增长，血液逐渐呈现高凝倾向，并与上述指标相关。这对防治心脑血管疾病，防治中医血瘀证具有重要的理论意义和实际意义。     

薄层扫描法测定益肾胶囊中大黄素

应用薄层扫描法对益肾胶囊中大黄素进行了定性定量方法研究，对实验条件进行优选，排除了干扰，结果满意，加样回收率为98．66％，RSD＝1．04％。     

PCR检测降钙素基因高甲基化在白血病微小残留病灶诊断中的价值

为探讨甲基化分析在白血病微小残留病灶（MRD）中的价值，用酶切加PCR技术研究31的初诊期急性髓细胞白血病（AML），14例对照者以及在18个月中动态观察5例AML治疗前后降钙素（CT）基因高甲基化的变化。31N初诊期AML中25例，14例对照者中的0呈现CT基因高甲基化（P＜0．01）。动态观察的5例AML，全部初诊期及完全缓解时的4例呈现CT基因高甲基化，其中3例分别于完全缓解后3个月、5个月、6个月复发。完全缓解和CT基因高甲基化阳性1例及阴性1例未复发。提示该方法有助于检测AML的MRD。     

BMP调控成骨细胞生物活性的实验研究

目的 探讨骨形态发生蛋白（bone morphogenetic protein,BMP）对培养的正常人成骨细胞主要生物学行为的影响。方法分别以0．02、0．1、1μg/m3种浓度的BMP作用于成骨细胞,通过MTY法了解BMP的效应。以0．1μg/ml浓度的BMP作用于成骨细胞,测定BMP对成骨细胞碱性磷酸酶（alkaline phospbatase,ALP）活性及骨钙素（bone gla protein,BGP）合成等主要生物学特性的影响。结果BMP作用于成骨细胞,能促进ALP活性及BGP的合成。结论BMP能促进成骨细胞活性,并且其促进成骨增殖的效能具有浓度依赖性。     

人M-07e白血病细胞凋亡过程中激活Caspase-3引起的Bcl-2 蛋白酶解与Lynp53/56激酶失活相关

人巨核白血病细胞系M-07e的生长严格依赖于GM-CSF.在M-07e细胞,GM-CSF受体(GM-CSF R)由两个亚基所组成:低亲合力的配体特异的α亚基和一个磷酸化的β亚基,后者与lynp53/56酪氨酸蛋白激酶固定相连.本研究检测了lyn激酶在调节TGF-β 1诱导的M-07e细胞凋亡过程中的作用.从培养液中去除rhGM-CSF首先导致了lyn激酶活性受抑,接着发生细胞生长受阻和凋亡.M-07e细胞凋亡过程中伴随有大量Bcl-2和Bax蛋白分别被酶解为22 kD和18 kD的较小片段.应用特异性的抑制剂,发现上述Bcl-2蛋白的变化是循激活的caspase-3(CPP32)途径发生的,后者在M-07e细胞中大量表达.Bax蛋白变化的机制尚不清楚.TGF-β 1对rhGM-CSF刺激的细胞生长具有抑制作用,促进M-07e细胞凋亡的机制与去除rhGM-CSF所致相同,包括大量Bcl-2和Bax蛋白被特异酶解和lyn激酶失活.TGF-β 1并不影响lyn蛋白和β链的表达水平,也不阻止这两个信号传导元件的相互作用.研究结果表明,TGF-β 1通过抑制GM-CSF R相关的lyn激酶活性而抑制M-07e细胞生长并促进凋亡发生.本实验还表明激活的CPP32对Bcl-2蛋白的酶解是与细胞凋亡发生相关的一个自然过程,处于lyn激酶活性的调控之下.     

黄连四个部位中五种生物碱含量和生物积累量分析研究

目的:对黄连4个不同部位(根茎、须根、茎和叶)中5种生物碱(小檗碱、黄连碱、巴马汀、表小檗碱和药根碱)的含量和生物累积量进行比较分析,为黄连非药用部位(须根、茎和叶)的资源综合利用提供参考和依据。方法:以恩施地区3批黄连样品为实验材料,采用HPLC对黄连4个部位中5种生物碱含量和生物积累量进行测定,并作分析比较。结果:黄连非药用部位各生物碱含量、生物量和生物积累量较高,非药用部位小檗碱、黄连碱、巴马汀、表小檗碱和药根碱生物积累量占全株依次为14.7%、20.8%、7.5%、17.8%、31.9%。结论:黄连非药用部位各生物碱具有一定的综合利用价值,应对黄连药用资源进行再开发和深度利用。