表皮生长因子对氧化损伤的人眼Müller细胞增生及迁移的保护作用

背景 目前认为氧化损伤机制在年龄相关性黄斑变性(AMD)的发病中起着重要作用,主要与血-视网膜屏障的破坏有关,而Müller细胞是稳定血-视网膜内屏障功能的主要细胞成分.研究表明,表皮生长因子(EGF)可促进实验动物视网膜Müller细胞的增生和迁移,但其对人Müller细胞的作用研究较少. 目的 探讨EGF对体外氧化损伤的人眼Müller细胞增生和迁移的影响及其作用机制. 方法 将人眼Müller细胞系MIO-M1细胞进行培养并用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、第Ⅷ因子、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、人角蛋白及S -1 00免疫组织化学法进行鉴定.在无血清DMEM中加入不同质量浓度(0、1、10、30、100 mg/L) EGF,用5-溴脱氧尿嘧啶核苷( BrdU)标记法测定MIO-MI细胞的阳性率.根据干物方式的不同将培养细胞分为EGF组、H2O2损伤组、EGF+H2O2组、葡萄糖氧化酶(GO)组、GO+EGF组、EGF+ LY294002+H2 O2组,采用MTT比色法测定各组培养细胞的增生情况(A590).对培养的人眼Müller细胞采用划痕实验观察H2O2损伤条件下0、1、10、30、100 mg/L EGF作用24、48、72 h后对Müller细胞增生、迁移的影响;采用Western blot技术检测EGF对体外不同培养条件下M üller细胞Akt信号传导通路的作用. 结果 正常培养条件下10、30、100 mg/L EGF作用后Müller细胞的增生率分别为28.0％、32.9％、39.0％,明显高于0 mg/L、1 mg/L EGF组(24.5％、26.2％).在H2O2和GO分别培养细胞的条件下,高质量浓度的EGF组Müller细胞的吸光度(A570)值明显大于低质量浓度组,各组总体差异有统计学意义(F=23.582,P=0.000).与EGF+H2O2组比较,EGF+ LY294002+H2O2组Müller细胞的吸光度(A570)值明显下降.10 mg/L EGF促进Müller细胞迁移的作用最强.0.08 mmol/LH2O2作用Müller细胞后Akt信号通路激活,提前2h加入外源性EGF后,100 mg/L EGF对抗氧化所致Müller细胞的损伤作用最明显,同时提前2h加入外源性EGF和Akt信号通路阻断剂LY294002后,Akt信号传导通路的保护作用减弱. 结论 EGF对体外培养的Müller细胞具有促进增生及迁移的作用,10 mg/L EGF促进Müller细胞迁移作用最强.100 mg/L外源性EGF抗Müller细胞氧化损伤作用最强,其作用机制是激活Akt信号传导通路.     

高度近视后巩膜加固术围手术期护理

高度近视又称病理性近视、恶性近视,是指屈光度大于600度,伴有眼轴延长、眼底视网膜和脉络膜萎缩、巩膜葡萄肿、黄斑变性等退行性病变为主要特点的屈光不正.     

高度近视后巩膜加固术心理护理

随着整体护理工作在我院的普遍实施 ,临床护理工作已由单纯的疾病护理转为整体的心身护理 ,心理护理工作已经放在了一个重要的位置。我院近年来开展的后巩膜加固术治疗高度近视 ,对提高患者视力 ,防止视功能进一步恶化 ,疗效显著 ,并发症少〔1〕。在围手术期 ,我们观察、分析引起患者心理状态的各种因素 ,掌握心理变化的规律 ,因人而异实施科学的心理护理 ,取得了良好的效果。现将 12 6例高度近视后巩膜加固术患者围手术期的心理状态及心理护理体会报告如下。1　临床资料1998年～ 2 0 0 1年本院共进行此手术 12 6例 ( 2 0 1只眼 ) ,其中男 6…     

浅谈眼视光学专业学位研究生素质的培养

目前研究生招生规模的扩大和研究生本身素质的下降是亟待解决的问题。根据这一问题,温州医学院眼视光学院从研究生导师遴选开始,为眼视光专业学位研究生选拔高水平的指导教师,实行导师负责制;为研究生建设良好的学习、工作环境,加大科研基础建设;培养科学的思维方式、健全人格特征等科学素养,为培养高素质的眼视光学学位研究生服务。     

抗森林脑炎病毒单克隆抗体的制备及夹心ELISA的建立

目的: 制备抗森林脑炎 (TBE)病毒单克隆抗体(mAb), 建立夹心ELISA法检测森林脑炎病毒。方法: 以纯化的TBE病毒抗原加福氏佐剂, 免疫BALB/c小鼠, 制备鼠源性TBE病毒mAb。并用mAb建立夹心ELISA法测定病毒抗原的效价。结果: 获得了 6株TBE病毒mAb杂交瘤细胞株, 它们均属于Ig亚类。mAb杂交瘤细胞培养液上清的效价为 1×10-3 ~1×10-4; 腹水效价为 1×10-6 ~1×10-7。结论:获得的 6株能特异性识别TBE病毒的mAb, 可用于免疫学检测, 为进一步研究TBE病毒的生物学性状奠定了基础。