RP-HPLC法测定清脑宣窍方有效部位中人参皂苷Rg1及Rb1含量

目的建立清脑宣窍方有效部位中人参皂苷Rg1、Rb1 HPLC 含量测定方法.方法采用YWG-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,10 μm),检测波长:203 nm.人参皂苷Rg1的流动相为乙腈-0.05 %磷酸水(21:79),流速:1.2 mL/min,人参皂苷Rb1的流动相为乙腈-0.05 %磷酸水(31:69),流速:0.9 mL/min.结果该法人参皂苷Rg1平均回收率为100.71 %,RSD=1.16 %(n=5).人参皂苷Rb1的平均回收率为99.32 %,RSD=2.52 %(n=5).结论本法操作简便、准确,可作为清脑宣窍方有效部位的质量控制方法之一.     

卒中后抑郁大鼠海马及皮层CREBmRNA表达及中药的干预作用

目的观察卒中后抑郁模型大鼠脑内核转录因子CREBmRNA的表达及中药颐脑解郁方的干预作用.方法在卒中后抑郁大鼠模型上,采用逆转录PCR(RT-PCR)方法,对CREBmRNA在卒中后抑郁大鼠脑内前额叶皮质、海马的表达及中药颐脑解郁方的干预作用进行观察.结果卒中后抑郁模型大鼠脑内前额叶皮质、海马CREBmRNA的表达明显低于正常组,中药颐脑解郁方能明显上调CREBmRNA的表达.结论卒中后抑郁模型大鼠脑内CREBmRNA的表达降低,中药颐脑解郁方能使之明显上调,提示卒中后抑郁症CREB表达下降,颐脑解郁方的抗抑郁作用可能与上调CREBmRNA的表达有关.     

ox-LDL诱导内皮细胞损伤条件培养基及气血并治方有效组分配伍对平滑肌细胞MAPK、PKC活性和胞内Ca2+荧光强度的影响

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管内皮细胞(VEC)损伤条件培养基及气血并治方有效组分D(主要为芍药苷)和E(主要为总黄酮)配伍(重量比1:2)是否对血管平滑肌细胞(VSMC)MAPK、PKC活性和胞内Ca2 荧光强度有影响.方法将VSMC正常培养液、ox-LDL诱导VEC损伤的条件培养基、辛伐他汀加ox-LDL诱导VEC损伤的条件培养基、有效组分D和E优化配伍加ox-LDL诱导VEC损伤的条件培养基等分别作用于VSMC,采用β-放射活性法测定丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性,流式细胞仪检测VSMC内的Ca2 荧光强度.结果 VEC损伤条件培养基作用于VSMC后,与正常培养VSMC相比,细胞MAPK、PKC活性明显增加(P＜0.01),细胞内Ca2 荧光强度增加;有效组分D和E配伍作用于VEC损伤条件培养基培养的VSMC后,与模型组相比,MAPK及PKC活性明显减少(P＜0.01)、细胞内Ca2 荧光强度降低.结论气血并治方中有效组分D和E优化配伍可以拮抗MAPK、PKC活性和细胞内Ca2 荧光强度的增加,气血并治方防治动脉粥样硬化(AS)的作用可能与此有关.     

Use of probiotics and prebiotics in infant feeding

Gut colonization by beneficial bacteria in early life is necessary for establishing the gut mucosal barrier, maturation of the immune system and preventing infections with enteric pathogens. Mode of delivery, prematurity, breastfeeding, and use of antibiotics are some of many factors that have been described to influence early life colonization. Dysbiosis, the absence of normal colonization, is associated with many disease conditions. Pre- and probiotics are commonly used as supplementation in infant formula, such as prebiotic oligosaccharides for stimulation of Bifidobacterium growth aiming to mimic the high levels of these commensal bacteria in the gut of breastfed infants. Studies suggest that probiotic supplementation may be beneficial in prevention and management of disease (e.g., reducing the risk of necrotizing enterocolitis in preterm infants and treatment of acute gastroenteritis in children). Although these studies show promising beneficial effects, the long-term risks or health benefits of pre- and probiotic supplementation are not clear.     

半夏厚朴汤及其拆方改善慢性间歇性低氧小鼠机体铁代谢

目的 观察半夏厚朴汤（BHF）及其拆方对慢性间歇性低氧（CIH）小鼠机体铁代谢的调节作用。方法 42只雄性C57BL/6N小鼠随机分为常氧对照组（Con）、CIH模型组（CIH）、全方组（CIH+BHF）、苏叶组（CIH+苏叶）、厚朴组（CIH+厚朴）、行气组（CIH+厚朴、苏叶）、化痰饮组（CIH+半夏、茯苓、生姜）,每组6只。连续CIH暴露和灌胃给药处理21 d后检测相关指标。比色法检测血清铁,HE染色观察肝脏及十二指肠形态结构、Perls’染色观察肝脏、脾脏、十二指肠铁含量,Western Blot及免疫组织化学染色检测肝脏铁调素（hepcidin）、转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TfR1)、铁泵蛋白1(ferroportin 1,FPN1)、铁蛋白轻链（ferritin light chain,FTL）蛋白表达。结果 与Con组比较,CIH组小鼠血清铁含量降低,小肠黏膜（十二指肠）与肝脏组织结构损伤,肝脏、小肠铁沉积增加（P<0.05）,脾脏铁含量减少（P<0.05）,肝脏TfR1、FTL、hepcidin蛋白表达升高（P<0....     

Identification of a novel vaccine adjuvant that stimulates and maintains diphtheria toxoid immunity

Immunomodulation by plant-derived medicines is well-documented with effects on both innate and adaptive immunity. This study reports potent and long-lasting diphtheria toxoid-specific immunity by the botanical medicinal, Rehmannia Six Formula, using an in vivo mouse model of vaccine immunity. A significant vaccine adjuvant effect was observed with an increase in serum anti-diphtheria toxoid total and IgG antibodies following oral administration of Rehmannia Six Formula to mice. This response was antigen-specific and was still detectable six months following botanical medicinal treatment, suggesting that Rehmannia Six Formula could help maintain protective antibody levels in populations where vaccine coverage is low. Rehmannia Six Formula was well-tolerated with no adverse effects on mouse weight or survival observed in this study and suggests a potential role as a novel vaccine adjuvant preparation.     

蠲饮泄肺方通过SOCS1负调控JAK1/STAT1通路对气道黏液高分泌的作用

目的探讨蠲饮泄肺方对脂多糖(LPS)诱导的气道黏液高分泌的抑制作用及其机制。方法培养人支气管上皮16HBE细胞,分别用脂多糖作用6 h、0.005%浓度的蠲饮泄肺方相应处理细胞,并对细胞进行SOCS1-siRNA转染,荧光定量PCR技术(RTPCR)、Western blot法检测转染效果。根据不同的处理措施,分为空白对照组、试验1组(仅脂多糖刺激)、试验2组(脂多糖刺激+SOCS1-siRNA转染)、试验3组(脂多糖刺激+蠲饮泄肺方)、试验4组(脂多糖刺激+SOCS1-siRNA转染+蠲饮泄肺方)。Western blot法分别检测各组细胞裂解液中SOCS1、MUC5AC、磷酸化JAK1和STAT1表达量,同时检测JAK1、STAT1总蛋白,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)蛋白表达量为内参。结果 RT-PCR、Western blot法检测SOCS1-siRNA转染效果明确。与空白对照组比较,试验1组细胞内SOCS1表达被抑制,MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平增高(P0.001);试验2组细胞内SOCS1表达被抑制及MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平增高更明显(P0.001);试验3组相比试验1组,细胞内SOCS1表达增高,MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平下降(P0.001);试验4组相比试验2组,细胞内SOCS1表达增高,MUC5AC、JAK1和STAT1磷酸化水平下降(P0.001)。使用蠲饮泄肺方后能改善脂多糖和SOCS1-siRNA对细胞内SOCS1表达的抑制,降低JAK1和STAT1磷酸化水平及MUC5AC的表达。结论蠲饮泄肺方能抑制脂多糖诱导的MUC5AC高表达,从而抑制气道黏液高分泌,与SOCS1抑制JAK1/STAT1信号通路、产生负反馈调节、降低磷酸化水平有关。     

徐氏胆麻荚方治疗痰浊壅肺型慢性阻塞性肺疾病的临床研究

目的观察徐氏胆麻荚方治疗痰浊壅肺型慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)的临床疗效。方法将106例痰浊壅肺型慢阻肺患者随机分为治疗组和对照组,每组53例。治疗组予徐氏胆麻荚方治疗,对照组予桂龙咳喘宁胶囊治疗。两组疗程均为10天,观察临床疗效及安全性,随访3个月内急性加重情况,比较中医证候积分、CAT评分及肺功能相关指标第1秒用力呼气量占预计值百分比(FEV_1%)、第一秒用力呼气容积占用力肺活量百分比(FEV_1/FVC)的变化情况。结果 (1)最终完成试验者96例,治疗组50例,对照组46例。(2)治疗组、对照组总有效率分别为98.0%、63.0%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P0.05)。(3)治疗前后组内比较,治疗组FEV1%水平有升高趋势,但差异无统计学意义(P0.05),FEV_1/FVC水平差异无统计学意义(P0.05);对照组FEV_1%、FEV_1/FVC水平差异无统计学意义(P0.05)。组间治疗后比较,FEV_1%、FEV_1/FVC水平差异无统计学意义(P0.05)。(4)两组受试者在试验期间均未出现用药相关不良反应,治疗前后安全性常规检查均未见异常。随访期间,治疗组未出现慢阻肺急性加重的患者,对照组有2例患者出现喘促加剧的现象,经支气管扩张剂及激素治疗后好转。结论徐氏胆麻荚方治疗痰浊壅肺型慢阻肺的临床疗效满意,可显著缓解患者的临床症状,提高患者生活质量。     

针对肝郁化热证的证候类中药新药临床评价研究

目的:为探讨证候类中药新药的临床评价方法,采用证病结合的临床研究模式,针对肝郁化热证,选择具有该证候的偏头痛、非器质性失眠和广泛性焦虑障碍患者,评价清肝解郁方对患者证候及生命质量的改善情况。方法:选取2013年07月至2014年12月北京中医药大学东直门医院收治的符合入组标准的患者180例,采用分层随机、阳性药对照的临床试验设计,将患者随机分为观察组和对照组,观察组采用清肝解郁方免煎颗粒进行治疗,偏头痛对照组患者使用天舒胶囊,失眠或焦虑对照组患者使用乌灵胶囊进行治疗。应用《肝郁化热证证候评价量表》对2组患者的证候改善情况进行评价,并采用SF-36生命质量量表评价2组患者生命质量。结果:1)经治疗后,2组患者肝郁化热证证候评分均呈下降趋势,治疗前后证候评分差值的组间比较,差异有统计学意义(P0.05),观察组下降较对照组更明显;2)治疗前后,2组患者生命质量各维度得分均较治疗前提高,其中社会功能(SF)维度组间比较,差异有统计学意义(P0.05),观察组改善更明显;3)肝郁化热证证候评分变化与生命质量各维度得分变化的相关性分析提示:生理功能(PF)、生理职能(RP)、精力(VT)、社会功能(SF)、情感职能(RE)与肝郁化热证证候评分变化呈显著正相关。结论:清肝解郁方可改善偏头痛、非器质性失眠及广泛性焦虑障碍患者的肝郁化热证证候,并可提高患者的生命质量。