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51.
目的: 初步探索自噬对Lewis肺癌移植瘤小鼠脾脏中粒细胞样髓源性抑制细胞(granulocytic myeloid derived suppressor cells,G-MDSCs)体外存活能力与抑制性功能分子的影响。方法: Lewis肺癌细胞系体外培养后,构建小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤模型,通过免疫磁珠分选方法获得脾脏G-MDSCs,与荧光抗体(Ly-6C-FITC/Ly-6G-PE/CD11b-PE/CY5)孵育后,流式细胞术检测G-MDSCs细胞纯度;瑞吉染色后观察其形态特征;采用雷帕霉素和氯喹处理后,通过蛋白质印迹法和流式细胞术检测自噬标志性分子微管相关蛋白1-轻链3 Ⅱ(microtubule-associated protein 1 light chain 3 Ⅱ,LC3-Ⅱ)蛋白的表达水平。培养体系中加入雷帕霉素和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methy-ladenine,3-MA),7-AAD染色检测自噬对G-MDSCs生存的影响;提取细胞总蛋白后检测胞内精氨酸酶的水平。结果: 通过磁珠分选的方法可从小鼠脾脏中获得纯度较高的G-MDSCs,其细胞核呈环状或分叶状。雷帕霉素处理G-MDSCs后LC3-Ⅱ表达水平上调,3-MA抑制自噬作用后,G-MDSCs存活率降低, 精氨酸酶活性下降。结论: 自噬能够促进G-MDSCs体外存活并上调抑制性效应分子精氨酸酶的表达,提示自噬是调控G-MDSCs生物学功能的重要因素。 相似文献
52.
精氨酸——重要的免疫营养剂 总被引:3,自引:0,他引:3
精氨酸参与蛋白质合成,且是合成一氧化氮的惟一底物。精氨酸通过精氨酸酶和一氧化氮两条代谢途径参与体内的免疫调节,并作为一种免疫营养剂逐渐受到重视。精氨酸可以促进淋巴细胞增殖,促进CD3的表达,增强T细胞的免疫反应,但当体内诱导型一氧化氮合酶过度表达时,补充大量的精氨酸会对机体造成损害。因此,在复杂的免疫病理下,近来主张的免疫调节干预(包含额外补充的高浓度精氨酸)必须在细致的可以控制的条件下进行。 相似文献
53.
王斌生 《癌变.畸变.突变》2014,(2):113-116
目的: 探讨精氨酸酶-1(Arg-1)在原发性肝癌(PHC)和肝转移癌(HM)鉴别中的意义。方法:123例肝癌患者行超声引导下细针穿刺活检,标本制作成细胞块进行免疫组化染色,观察Arg-1表达情况。所有患者行手术切除后进行组织病理学诊断,结合细胞学、血清肿瘤标记物、临床及影像学随访结果进行最终判定。计算采用Arg-1鉴别PHC和HM的敏感度和特异性。结果:123例患者中PHC 78例,HM 45例。在PHC患者中,Arg-1呈高表达(83.3%)且以强染色为主(60.3%),高、中度分化肝细胞癌患者中阳性表达率(92.9%)高于低分化患者(76.9%),在胆管细胞型肝癌患者中不表达,在混合型肝癌患者中阳性表达率为75%;在HM患者中,Arg-1阳性表达率较低(8.9%),存在于结直肠癌、胰腺癌、乳腺癌肝转移患者中且均为弱染色,其他原发部位肝转移患者未见Arg-1阳性表达。Arg-1用于PHC和HM鉴别的敏感度为83.3%,特异性为91.1%。结论:细针穿刺活检标本行Arg-1免疫组化染色用于PHC和HM鉴别的敏感度和特异性均较高,值得进一步推广。 相似文献
54.
目的 探讨黄芩素(BAI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的防治作用及其对中枢神经系统小胶
质细胞(MG)极化和炎性因子的影响。方法 将50只雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为空白对照组,EAE模
型组及BAI低、中、高剂量组,每组10只。空白对照组不做处理,其余各组建立EAE模型。BAI低、中、高剂量组每日
分别给予BAI 75、150、300 mg/kg灌胃,空白对照组及EAE模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续14 d。观察小鼠的
神经功能缺损和脊髓组织炎性脱髓鞘情况。采用免疫荧光双重染色法检测小鼠脊髓组织离子钙接头蛋白1(Iba-1)
阳性MG中M1型MG标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2型MG标志物精氨酸酶1(Arg1)的表达情况及分歧指数
(RI)变化,实时荧光定量PCR法检测小鼠脊髓组织中iNOS、Arg1及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介
素-10(IL-10)mRNA的表达情况。结果 空白对照组小鼠未见发病,其余各组均不同程度发病。与EAE模型组比
较,BAI各剂量组小鼠发病潜伏期及达高峰期时间延长,神经功能障碍评分降低(均P<0.05),脊髓组织脱髓鞘程度
减轻(均P<0.05),Iba-1阳性MG中iNOS表达降低,Arg1表达升高,RI值减小(均P<0.05),MG的形态倾向于M2型
极化,脊髓组织中iNOS、TNF-α mRNA表达降低,Arg1、IL-10 mRNA表达升高(均P<0.05),且BAI剂量越大,变化越
明显。结论 BAI对EAE小鼠发病具有防治作用,且呈剂量依赖性,其机制可能与纠正M1/M2型MG失衡及调节炎
性因子TNF-α、IL-10表达有关。 相似文献
55.
56.
57.
目的 探讨甘丙肽对小鼠RAW264.7巨噬细胞功能的影响。方法 取小鼠RAW264.7巨噬细胞体外培养,分为对照组、脂多糖(LPS)处理组和LPS联合甘丙肽处理组。给予后两组细胞LPS(1μg/ml)刺激2h,使细胞激活,其中一组再加入甘丙肽1000nmol/L继续处理24h,镜下观察各组细胞形态变化;采用荧光定量PCR法检测培养上清TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA水平;采用Western blot法检测细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶1(Arg1)蛋白表达水平。结果 LPS处理组IL-6、IL-1β和TNF-αmRNA分别较对照组升高(7083±432.5)倍、(3106±104.3)倍和(108.0±47.58)倍,而甘丙肽处理组三者水平较LPS处理组下降(1.2±0.2)倍、(0.3±0.08)倍和(19±1.3)倍,差异均有统计学意义(P<0.05);LPS组iNOS蛋白较对照组升高(19.5±1.964)倍,Arg1蛋白水平较对照组降低(1.6±0.3)倍,而给予甘丙肽混合处理后,iNOS蛋白水平较LPS处理组降低(1.7±0.32)倍,而Arg1蛋白升高(2.31±0.12)倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 甘丙肽可抑制LPS诱导的小鼠Raw264.7巨噬细胞的促炎反应。 相似文献
58.
59.
髓样抑制细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)是存在于荷瘤小鼠及肿瘤患者体内、具有免疫抑制功能的细胞群。它由髓系来源的未分化成熟的具有异质性的细胞组成,其中包括树突状细胞、巨噬细胞和粒细胞等。肿瘤细胞分泌的各种因子能诱导MDSCs的产生、运动及活化。荷瘤小鼠来源的MDSCs主要表达CD11b+Gr1+,而肿瘤患者来源的MDSCs主要表达CD11b+CD14-。在荷瘤小鼠骨髓、脾脏和外周血及肿瘤患者的外周血中MDSCs水平升高。MDSCs通过抑制机体免疫功能和促进新生血管生成等机制参与肿瘤的生长及向远处转移。抑制体内MDSCs的功能和降低其数量有助于恢复机体识别、杀伤肿瘤细胞的能力,并提高药物疗效。本文对MDSCs在肿瘤领域的最新研究进展进行综述。 相似文献
60.