聚合酶链反应方法检测外周血淋巴细胞HLA-A mRNA方法学的建立及在肾移植中的初步应用

目的通过建立检测宿主外周血淋巴细胞(PBL)表面HLA-AmRNA表达程度的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-FQ-PCR)方法,检测肾移植患者移植后外周血淋巴细胞表面HLA-AmRNA的表达程度,探讨其在诊断移植后早期排斥反应的发生的价值及机体免疫状态的关系。方法以6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)作内参照,用Taqman探针荧光定量技术,建立检测PBLHLA-AmRNA的RT-FQ-PCR方法;并检测35例随访移植患者的不同时间的60个标本和60名正常人的阈循环数(Ct),然后用REST软件分析PBLHLA-AmRNA的表达水平。结果正常人和51个移植标本的PBLHLA-AmRNA对G6PDH的相对表达量分别为0·036±0·012和0·026±0·015(双侧t=1·981,P<0·05),提示服用免疫抑制药(目前临床用药剂量均偏大)后患者PBLHLA-AmRNA表达减弱,机体免疫状态低,无排斥反应发生但易导致感染、肿瘤等并发症的产生;其中9个移植标本的PBLHLA-AmRNA对G6PDH的相对表达量为0·042±0·017(双侧t=2·002,P<0·05),提示较其他51例移植标本患者PBLHLA-AmRNA表达增强的患者,经病例回访查询发现该5例移植患者在这期间有排斥反应(根据临床表现、肾功能检查、影像学及核医学检查的临床排斥反应期)的发生,其中1例在移植后6个不同时间的标本显示2次有增高,每次经治疗后均降低。结论建立的宿主PBLHLA-AmRNART-FQ-PCR检测方法简便、特异、重复性好、可信度高,可用于肾移植后PBLHLA-AmRNA表达水平的检测,评估机体的免疫状态,预测排斥反应的发生。     

淋巴细胞HLA-A mRNA方法学建立及在乙型肝炎病毒感染患者中的应用

目的建立外周血淋巴细胞HLA-A mRNA的检测方法,探讨其在慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌患者中的应用价值。方法改良法提取人外周血淋巴细胞RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)一步法扩增HLA-A mRNA,琼脂糖凝胶电泳结果采用Bandscan软件分析相对灰度值,半定量HLA-A的基因表达。结果半定量HLA-A所得平均相对灰度值在慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组、正常对照组分别为0．54±0．21、0．34±0．27、0．22±0．16、0．95±0．19。慢性乙型肝炎组、肝硬化组、肝癌组均明显低于正常对照组(P<0．05),慢性乙型肝炎组与肝癌组,肝硬化组与肝癌组相比差异有统计学意义(P<0．05),慢性乙型肝炎组与肝硬化组有下降趋势。结论成功建立检测HLA-A基因的RT-PCR一步法,从基因转录水平上证实慢性乙型肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌患者外周血淋巴细胞HLA-A下调,且与相应患者细胞免疫功能减弱密切相关。     

40例不寐症病人的按摩护理

“不寐”即失眠症，亦称“不得眠”．临床较常见，各种疾病都可引起，病变与心、肾、脾三胜有关．多因心脾两虚、阴虚火旺、心肾不交、心胆气虚、胃气不和、痰热内扰之故。临床以安神补心．滋补降火．强心益肾、健牌和胃等辩证施治。笔者对40例不寐病人进行了精心按摩护理．收到满意效果。疗效证明；按摩有调整失调、沟通里表、消除紧张和疲劳、改善血液循环、达阴阳平衡、养心安神、催眠导寐之功。现将我们的按摩护理体会介绍如下。1临床资料40例中男18例，女22例，年龄在26～64岁之间．平均年龄45岁。住院时间在14～45天间．治愈30例，8例…     

新生儿遗传代谢病筛查不合格血片原因分析及对策

目的 探讨影响新生儿遗传代谢病筛查采血合格率因素及对策.方法 根据<新生儿遗传代谢病筛查血片采集技术规范>对不合格滤纸血片原因进行分析.结果 2006至2010年全市330家医疗接生单位共采集递送血片513040例,其中不合格血片共6 257例,血卡填写错误2 375例,出生不满72小时1 273例,洗脱不全1 226例,采血技术操作不良1090,血斑污染293例.血片不合格率为1.22%,实际召回重采5 528例,不合格血片召回率为88.35%.结论 加强宣传和技术培训工作,做好筛查各个环节质量管理,提高筛查血片采集的合格率,重视对不合格血片的追踪召回,保证筛查质量的每个环节.     

时间管理团体辅导对小学生学业拖延的影响

目的探讨时间管理团体辅导对小学生学业拖延的干预效果。方法采用实验组与对照组前后测准实验设计,选取20名小学生为被试,采用青少年时间管理倾向量表、学业拖延量表测试并观察在干预后3个月团体辅导的效果。结果干预前实验组与对照组在时间管理倾向量表和学业拖延量表得分无显著差异(P>0.05);辅导后实验组与对照组比较,时间管理量表总分显著提高(t=13.219,P<0.01),学业拖延量表得分显著下降(t=-2.918,P<0.001),实验组被试时间管理学业拖延前、后测差异显著(t=8.509,P<0.001;t=5.119,P<0.01)。结论时间管理团体辅导能有效提高小学生的时间管理能力,改善小学生学业拖延行为。     

盆腔促纤维组织增生性小圆细胞肿瘤一例

患者男15岁,主因“大便次数增多3个月,血便,发现盆腔占位2个月”于2011年8月15日入院。查体：腹部膨隆,下腹部可触及10cm×8cm肿物,质硬,固定,边界不清,无压痛,肝大,肋下6cm可触及s患者行肠镜检查,活检病理为结直肠黏膜慢性炎。腹盆CT示：腹腔及盆腔多发大小不等软组织密度肿块,肝内多发占位,     

肺鳞癌患者血清miRNA-181a的表达及其对肺癌细胞功能的影响

【目的】探讨肺鳞癌患者血清中microRNA-181a（miR-181a）水平的变化及其对人肺鳞癌细胞生物学功能的影响。【方法】选择56例肺鳞癌患者和50名健康成人,采用stem-[oop定量PCR的方法检测其血清中miR-181a的表达变化;体外实验采用CCK8和Transwell小室实验检测miR-181a对人肺鳞癌细胞株NCI-H226增殖、侵袭和迁移能力的影响。【结果】miR-181a在肺鳞癌患者血清中表达较健康成人显著降低（P〈0．05）;miR181a可明显抑制肺鳞癌细胞NCI—H226的增殖、侵袭和迁移。【结论】在肺鳞癌患者miR-181a是一种保护性的微小RNA,具有较好的诊断和治疗前景。     

刘福友教授治疗偏头痛经验介绍

刘福友是成都中医药大学教授，博士研究生导师，四川省名中医，从医执教数十年，擅长治疗偏头痛，疗效显著。现将其治疗经验总结介绍如下。     

护理程序在成分输血中的应用情况调查分析

目的探讨护理程序在成分输血中的作用。方法将450例住院患者按住院号单双号分为干预组和对照组。对照组采用传统的一般输血护理常规,干预组应用护理程序。结果干预组在知识缺乏、焦虑方面与对照组有显著性差异（P〈0.001）;干预组在输血反应及感染发生方面与对照组有显著性差异（P〈0.05）,干预组在输血反应及感染未发生方面与对照组无显著性差异（P〉0.05）。结论在成分输血中应用护理程序,可以更好地保证成分输血的安全性和有效性,同时能更好地建立良好的合作型护患关系。     

AdCMVtk／GCV系统诱导肿瘤细胞死亡途径

探讨ＡｄＣＭＶｔｋ／ＧＣＶ系统诱导肿瘤细胞死亡的途径。方法：Ｅ要用台盼蓝染色检测坏死细胞数，吖啶橙荧光染检测凋亡细胞数，同时观察凋亡细胞的形态学改变。结果：ＡｄＣＭＶｔｋ／ＧＣＶ系统诱导肺癌细胞死亡形式有两种，即坏死和凋亡，行出现凋亡，后引起坏死。结论ＨＥ染色及吖啶橙荧光染色可见黄型的凋亡形态学改变。