青蒿琥酯平衡溶解度和表观油水分配系数的测定

目的: 测定青蒿琥酯的平衡溶解度及表观油水分配系数。方法: 采用HPLC测定青蒿琥酯在各类溶媒中平衡溶解度,色谱条件为Diamonsil C₁₈(2)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相乙腈-磷酸盐缓冲液(60:40),流速1.0 mL·min^-1,检测波长210 nm,柱温30℃。采用摇瓶法测定青蒿琥酯在正辛醇-水/磷酸缓冲盐中油水分配系数。结果: 32.0℃时青蒿琥酯在纯水、三氯甲烷、丙酮、无水乙醇中溶解度分别为(0.36±0.016),(598.74±13.11),(284.63±7.96),(186.03±8.27) g·L^-1。32.0℃时青蒿琥酯在正辛醇-水体系中油水分配系数(249.03±3.76),logPapp=(2.40±0.006 5)。结论: 青蒿琥酯脂溶性强,pH对其溶解度和油水分配系数均具有较大影响。在磷酸盐缓冲体系中,青蒿琥酯在pH 5.50~7.43时溶解度随pH的增大而增加,油水分配系数随pH的增大而减小,但logPapp保持>2.0,说明青蒿琥酯在体内、外环境下均具有较强的生物膜通透能力。     

沉默 HerpUD1 基因表达提高人肝L-02细胞对放射处理的敏感性

目的： 利用RNA干扰技术沉默人肝L-02细胞内可诱导的同型半胱氨酸内质网应激泛素样结构域1（homocysteine-inducible, endoplasmic reticulum stress-inducible, ubiquitin-like domain member 1, HerpUD1 ）基因表达,探讨其对人肝L-02细胞的辐射增敏作用。 方法： 根据 HerpUD1 基因序列设计shRNA片段,构建靶向 HerpUD1 基因的shRNA表达载体,稳定转染L-02细胞,采用real-time PCR和Western blotting检测转染后细胞中 HerpUD1 mRNA及蛋白的表达。以8 Gy X射线照射转染后细胞,Hoechst荧光染色观察细胞的凋亡情况。 结果： 成功构建靶向 HerpUD1 的真核表达干扰载体,并建立稳定转染shHerpUD1的L-02细胞株。在稳定转染的L-02细胞中, shHerpUD1-1420干扰片段干扰效果最好,与pGPU6-NC组（阴性对照组）相比,shHerpUD1-1420组 HerpUD1 mRNA表达显著下降\[（0.15±0.05） vs （1.00±0.08）,P<0.05\],其蛋白水平的表达也显著降低\[（0.19±0.01） vs （1.62±0.08）,P<0.01\]。转染后细胞经8 Gy X射线照射后24 h,L-02-shHerpUD1-1420组细胞凋亡率显著高于L-02-NC组（阴性对照组）\[（10.23±3.37）%  vs （6.89±1.49）%,P<0.01\],而L-02-NC组与L-02-Neo组相比则无显著差异（P>005）。 结论： HerpUD1 基因表达沉默显著增加X射线辐射引起的L-02细胞凋亡,具有辐射增敏作用。     

鹦鹉热嗜衣原体两对荧光定量PCR引物的应用与比较

针对鹦鹉热嗜衣原体(Cps)的主要外膜蛋白(MOMP)基因和多形态膜蛋白(PMP)基因分别设计引物,建立荧光定量PCR方法,比较两对引物的灵敏度和特异性。试验结果表明,两对引物均可用于Cps检测,在样本中靶标浓度高时,PMP引物的检测灵敏度优于MOMP引物;但前者的扩增效率低于后者,后者更适合用于Cps的实时定量PCR检测。相对定量研究表明国内不同Cps流行株的PMP基因在基因组上的拷贝数可能存在较大差异。     

金雀异黄素对肝癌Bel-7404细胞放疗增敏作用及其可能的机制

目的:探讨金雀异黄素对肝癌Bel-7404细胞的放疗增敏作用及其作用机制.方法:将肝癌Bel-7404细胞分为正常对照组(NC)、Gen处理组(G)、单纯照射组(R)及Gen+辐照组(G+R).除NC组外,其余各组分别采用5μmol/L Gen和/或8GyX射线(剂量率300 cGy/min)处理,利用CCK-8法、流式细胞术分别检测Gen与X射线单独或联用对Bel-7404细胞的增殖、细胞周期和凋亡的影响;并通过Western blotting检测对ATM-Chk2通路相关蛋白表达及其磷酸化水平的影响.结果:G+R组细胞在处理后24 h时细胞增殖抑制率即显著高于R组[(16.80±2.59)％ vs (9.76±2.11)％,P＜0.05],且随着时间的延长,对细胞增殖的抑制作用更明显;与NC组比较,G、R、G+R组细胞凋亡率和G2/M期细胞比例均显著增加(P＜0.05或P＜0.01),且G+R组凋亡率显著高于R组[(51.86±2.88)％ vs(33.18±4.48)％,P＜0.01];G+R组中p-ATM与p-Chk2表达量明显高于G组、R组和NC组.结论:Gen可以增强肝癌Bel-7404细胞的放疗敏感性,其机制可能与ATM-Chk2信号通路的激活有关.     

盐酸川芎嗪辅助治疗慢性阻塞性肺气肿疗效观察

目的:观察川芎嗪注射液辅助治疗慢性阻塞性肺气肿的临床疗效。方法:选择慢性阻塞性肺气肿急性加重期患者82例,随机分为治疗组及对照组各41例,均给予吸氧、抗氧、扩张支气管等治疗,治疗组患者加用川芎嗪注射液30ml/d,治疗2周后观察两组患者的临床疗效及血液黏滞度变化。结果:治疗2周后,治疗组临床有效率高于对照组,治疗组患者血液高切黏度、低切黏度、血浆黏滞度及红细胞变形指数均低于对照组。结论:盐酸川芎嗪注射液能够改善慢性阻塞性肺气肿患者急性加重期疗效,其可能通过改善血液黏滞度发挥作用。     

特殊听幻觉伴发焦虑抑郁3例

1 病例 病例1:患者,男,52岁,机关干部.平素性格开朗、善交际,身体健康;30岁起因公经常陪酒,每日饮白酒半斤以上,后渐成瘾,平时每天必饮,有时早晨或夜间也喝,但并未影响工作,4年前因患高血压而开始戒酒,后仅偶饮少量啤酒.     

补中益气丸合黄芪精口服液治疗发作性睡病32例

发作性睡病(narcolepsy)是一种以难以控制的白天过度嗜睡、发作性猝倒、睡眠瘫痪、入睡前幻觉及夜间睡眠紊乱为主要表现的慢性神经系统疾病,儿童早期至50岁均可发病,15～36岁为两个发病年龄高峰。人群患病率为0.03%～0.16%,无性别差异[1]。本病为终生性睡眠疾患,可严重影响患者的生活质量,甚至酿成意外事故而危及生命。目前病因及发病机制未完全明     

新分离呼肠病毒基因组片段S1全长cDNA克隆及其序列分析

目的：克隆测序新分离呼肠病毒的S1全长基因组片段，并对其进行序列分析。方法：从接种呼肠病毒的L929细胞中提取病毒基因组，用改进的单引物扩增技术获得S1片段的全长cDNA克隆井测定其全序列。结果：新分离呼肠病毒的S1片段长1437bp，其核苷酸序列与已知的1—3型呼肠病毒标准株的同源性分另1为59％，61％和48％；推测的cr1序列与标准株的同源性分别为52％，60％和26％。结论：新分离呼肠病毒的S1片段与目前已知的分离株相比有很大差异，有可能是2型呼肠病毒的一个独立分支。     

60Co-γ照射后早期小鼠肝组织基因表达谱

目的:以基因芯片技术研究辐射后小鼠肝脏的基因表达谱,从分子水平探讨辐射引起小鼠肝脏损伤的机制.方法:采用小鼠基因表达谱芯片(4096个基因)对60Co-γ照射后48 h小鼠肝组织基因表达谱进行研究.RT-PCR验证基因芯片结果.结果:与正常小鼠相比,辐射后小鼠肝组织有124条基因差异表达,78条下调,46条上调.其中57条基因的功能已知,这些差异表达的基因按功能可分为6类:DNA修复和应激蛋白,细胞骨架,离子通道和转运蛋白,信号转导,免疫蛋白,代谢调控,其中下调基因主要为细胞骨架基因,而上调基因主要为细胞周期调控蛋白和转录因子.RT-PCR结果表明,Hspa5、Rasa3、Nqol基因的表达和芯片结果一致.结论:辐射造成的肝损伤具有多靶点、多层次及多通路的特点.     

新分离呼肠病毒的空斑试验及病毒纯化

目的：建立新分离呼肠病毒（reovirus）的空斑技术，进行病毒纯化，为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础。方法：4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代，当产生细胞病变后进行空斑试验，加营养琼脂培养6d后加中性红，24h内挑取空斑，扩增一次后做PCR鉴定。取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化。结果：4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2～4代，均能观察到明显的细胞病变。用10^-3和10^-4接种L929单层细胞，第6～7天均能产生空斑，空斑呈圆形，直径为0．2～1．0mm，并分别测定其空斑滴度（PFU／ml）。两次纯化后进行PCR检测，呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓灰质炎病毒基因扩增阴性。结论：4株呼肠病毒的空斑出斑规律，通过两次克隆，获得纯化的病毒。