番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢及胰岛素信号通路的影响

目的:研究番石榴叶总黄酮对糖尿病小鼠肝脏葡萄糖代谢及胰岛素信号通路相关分子表达的影响,探索其降糖作用机制。方法:雄性BALB/c小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)60 mg·kg-1连续5 d后,血糖仪检测空腹血糖水平,以连续3 d空腹血糖浓度>11.1 mmol·L-1为糖尿病模型成功标准。糖尿病小鼠随机分为模型组和番石榴叶总黄酮低、中、高剂量治疗组,每组10只,另设10只正常小鼠。低、中、高剂量治疗组分别以番石榴叶总黄酮0.093,0.186,0.372 g·kg-1灌胃,正常组和模型组以等体积蒸馏水灌胃,2周后测其空腹血糖、病理观察胰岛数目及形态学改变、荧光PCR法检测肝葡萄糖激酶(glucokinase,GK),葡萄糖激酶调节蛋白(glucokinase regulatory protein,GKRP),葡萄糖转运蛋白-2(glucose transporter 2,GLUT-2),胰岛素生长因子-1(insulin growth factor-1,IGF-1),胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1),胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate-2,IRS-2)表达。结果:与正常组比,模型组小鼠体重明显降低(P<0.01),血糖明显升高(P<0.01);胰岛变性明显,胰岛数目明显减少、体积变小、甚至消失;肝GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1和IRS-2表达下降,GKRP表达增高。与模型组比,番石榴叶总黄酮治疗组血糖明显降低(P<0.05),胰岛数目明显增多;GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1和IRS-2表达升高,GKRP表达下降,中剂量组治疗效果最好(P<0.05)。结论:番石榴叶总黄酮低、中、高剂量均能明显降低STZ糖尿病小鼠血糖水平,可能与其增强肝脏GK,GLUT2,IGF-1,IRS-1,IRS-1表达,降低肝GKRP表达及促进胰岛再生有关。     

黔产铁苋菜不同炮制品中活性成分含量比较

目的:比较铁苋菜不同炮制品中没食子酸、总黄酮的含量,探讨炮制方法对铁苋菜活性成分的影响。方法:采用HPLC测定没食子酸含量,流动相乙腈-0.05%磷酸(4∶96),检测波长270 nm;以芦丁为指标成分,运用UV测定总黄酮含量,检测波长515 nm。比较铁苋菜炒黄品、炒焦品、炒炭品、酒炙品、醋炙品、生品中没食子酸和总黄酮的含量差异。结果:铁苋菜炮制前后没食子酸和总黄酮的含量发生了变化。各炮制品中没食子酸含量排序为炒黄品酒炙品醋炙品炒焦品生品炒炭品;总黄酮含量排序为醋炙品酒炙品炒焦品炒黄品生品炒炭品。结论:炮制方法对黔产铁苋菜中没食子酸和总黄酮含量具有一定影响,炒炭品中这2种成分含量最低。     

杜仲叶黄酮对糖尿病大鼠的血糖控制及对胰岛细胞的保护作用

目的:探讨杜仲叶黄酮对糖尿病大鼠血糖控制及对胰岛细胞的保护作用。方法:链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,模型大鼠分为4组,即模型组、阳性药物组(格列本脲,10 mg·kg-1)、杜仲叶黄酮(2.5,5.0 g·kg-1)组,并设立正常组。ig给药,每日1次,连续28 d.取血测定大鼠空腹血糖(FBG),游离胰岛素(FINS)水平,并行口服葡萄糖耐量试验(OGTT);部分胰组织制备组织匀浆后测定超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)的含量;部分胰胰腺组织制作病理切片及HE染色,镜下观察胰岛形态及细胞数。结果:与正常组比较,模型组大鼠的FBG显著升高,FINS下降,糖耐量降低,胰腺组织中的SOD及GSH-Px水平降低,MDA水平升高,病理切片显示胰岛明显发生萎缩(P0.01);与模型组比较,杜仲叶黄酮能明显降低糖尿病大鼠胰腺组织中MDA水平、提高SOD及GSH-Px水平,并能降低大鼠的FBG,改善糖耐量,提高FINS水平(P0.01,P0.05),病理切片显示大鼠的胰岛面积增加、细胞数明显增多(P0.01,P0.05)。结论:杜仲叶黄酮可明显降低糖尿病大鼠的血糖,改善糖耐量,增加FINS水平,对胰岛细胞具有保护作用,推测降低氧化应激反应是其机制之一。     

正交试验法优选补肾祛瘀颗粒的提取工艺

目的:优选补肾祛瘀颗粒的提取工艺,为该制剂的工业化生产提供参考。方法:采用UV测定总多糖和总黄酮含量,检测波长分别为489,510 nm;采用HPLC测定二苯乙烯苷含量,流动相乙腈-水(22∶78),检测波长320 nm。以总多糖得率为指标,通过正交试验考察料液比、提取时间、提取次数、醇沉浓度对水提工艺的影响;以总黄酮、二苯乙烯苷提取量和浸膏得率的综合评分为指标,通过正交试验考察提取时间、提取次数、乙醇用量及体积分数对醇提工艺的影响。结果:最佳水提工艺为加12倍量水浸泡1 h,回流提取3次,每次1.5 h,醇沉浓度80%;总多糖得率8.682%。最佳醇提工艺为加10倍量80%乙醇回流3次,每次1.5 h;总黄酮和二苯乙烯苷提取量分别为660.19 mg·g-1和145.91μg·g-1,浸膏得率11.81%。结论:优选的提取工艺合理可行,为补肾祛瘀方的临床推广与应用提供实验依据。     

成熟度对江西单叶蔓荆子质量的影响

目的:比较不同成熟度单叶蔓荆子中挥发性成分、总黄酮及蔓荆子黄素含量的差异。方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分离鉴定蔓荆子中挥发性成分,利用峰面积归一化法计算各成分的相对质量分数,结合紫外分光光度法和HPLC分别测定蔓荆子中总黄酮和蔓荆子黄素的含量。结果:厚田黄果和黑果分别鉴定了35,36种化合物,二者相同成分有30种;都昌黄果和黑果分别鉴定了31,27种化合物,两者相同成分有23种。不同成熟度蔓荆子挥发油成分种类相似,但各成分的含量却存在很大差异。厚田黄果、厚田黑果、都昌黄果及都昌黑果中蔓荆子黄素质量分数分别为0.268%,0.209%,0.226%,0.242%,总黄酮质量分数依次为7.902%,3.540%,3.982%,2.617%。结论:不同样品中总黄酮含量存在很大差异,黄果与黑果中蔓荆子黄素的含量不存在显著性差异。成熟度对蔓荆子的品质影响很大。     

冷水花总黄酮的提取工艺优选及抗氧化活性考察

目的:测定不同产地冷水花中总黄酮的含量并评价其抗氧化活性。方法:在单因素试验基础上,以总黄酮提取量为指标,选择料液比、提取温度、提取时间为考察因素,采用响应面法优化冷水花总黄酮的提取工艺,测定不同产地冷水花样品中总黄酮的含量并考察其抗氧化活性。结果:最佳提取工艺为料液比1∶19,提取温度71℃,提取时间126 min。冷水花总黄酮提取量7.08 mg·g-1;不同产地样品中总黄酮质量分数4.35~7.10 mg·g-1,具有明显的地域差异性。冷水花总黄酮对1,1-二苯基苦基苯肼和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基的清除能力与维生素C相当。结论:不同产地冷水花中总黄酮具有较好的抗氧化能力,且该能力与总黄酮含量具有明显量效关系。     

5种黄酮有效部位的不同组方的细胞抗炎、免疫与骨细胞修复活性的比较

目的:以腰痛宁中生物碱加黄酮有效部位拆方为基础比较不同中药黄酮有效部位对细胞抗炎、免疫及骨细胞修复的影响,为风湿骨病处方候选药物筛选有效部位提供依据。方法:在腰痛宁马钱子、麻黄生物碱基础上,分别加入50%的甘草黄酮、淫羊藿黄酮、红花黄酮、骨碎补黄酮、桑寄生黄酮以及5种黄酮的等比例混合物,得到6个有效部位组方。采用半数有效浓度(EC50)或半数抑制浓度(IC50)评价各样品对巨噬Ana-1细胞分泌白细胞介素1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)炎症因子的促进作用;对脂多糖(LPS)诱导的Ana-1细胞释放前列腺素E2(PGE2)的抑制作用;对IL-1β诱导的软骨细胞增殖的影响。同时采用最小二乘优化方法,计算各样品的EC50或IC50叠加值,根据EC50或IC50叠加值与实验值之间的差异分析各有效部位间的相互作用关系。结果:骨碎补黄酮为主的组方促进IL-1β分泌的活性最强;红花黄酮为主的组方促进IL-6分泌的活性最强且其他活性仅次于最佳的组方;由马钱子、麻黄生物碱+5种黄酮混合物构成的组方抑制PGE2分泌及促进TNF-α分泌、促进软骨细胞增殖的活性最强,且各模型下该组方中有效部位间有极强的协同作用。促软骨细胞增殖模型下,单一黄酮有效部位与生物碱构成的组方中的有效部位之间均表现出较强的拮抗作用。结论:不同药材黄酮之间有出色的协同增效作用,红花黄酮、骨碎补黄酮及各药材黄酮混合物具有良好的抗炎、免疫及骨细胞修复等综合药理活性,提示红花黄酮、骨碎补黄酮及不同药材黄酮混合物可作为风湿骨病药物的优选有效部位。     

关于完善《中国药典》2015年版槐花炭质量标准的研究

目的:为了有效控制槐花炭的质量,本研究建立了饮片的质量控制方法与标准。方法:参照《中国药典》2010版附录相关方法,对槐花炭的水分、灰分和醇溶性浸出物进行测定。以芦丁、槲皮素为对照品,硅胶G为薄层板,芦丁以乙酸乙酯-甲酸-水(8:1:1)为展开剂,槲皮素以氯仿-甲醇-水(6.5:1:1)为展开剂,均在紫外(365 nm)下检视,建立薄层鉴别方法。采用可见-紫外分光光度法测定总黄酮的含量,以500 nm为检测波长。采用HPLC法测定芦丁、槲皮素含量;芦丁的色谱条件为:以Kromasil C18为固定相,以甲醇-1%冰醋酸水(32:68)为流动相,流速为0.8 m L·min-1,检测波长257 nm,柱温35℃;槲皮素的色谱条件为:以Kromasil C18为固定相,以甲醇-0.4%冰醋酸水(44:56)为流动相,流速为0.8 m L·min-1,检测波长257 nm,柱温40℃。结果:槐花炭(花)中水分、总灰分、酸不溶灰分分别不得超过6.0%、16%、8.0%;在薄层条件下,2个对照品与其他斑点分离度良好;浸出物、总黄酮、芦丁、槲皮素含量分别不得低于40.0%、5.0%,2.5%,0.2%。槐花炭(花蕾)中水分、总灰分、酸不溶灰分分别不得超过6.0%、9.0%、1.5%;在薄层条件下,2个对照品与其他斑点分离度良好;浸出物、总黄酮、芦丁、槲皮素含量分别不得低于45.0%、10.0%,5.0%,0.9%。结论:本标准提高了饮片的质控水平,为临床应用的安全性和有效性提供了实验依据,为《中国药典》2015年版提供实验数据。     

菟丝子生品及3种炮制品中总黄酮含量的比较研究

目的：建立菟丝子总黄酮含量测定方法,并比较生品及3种炮制品的总黄酮含量。方法：采用紫外分光光度法,以金丝桃苷为对照品,建立菟丝子总黄酮的含量测定方法,并用此方法测定生品及3种炮制品的总黄酮含量。结果：建立了菟丝子总黄酮的含量测定方法,用此方法测定菟丝子生品中的总黄酮含量为1.68%,清炒品为2.26%,酒炙品为2.27%,盐炙品为2.22%。结论：本方法简便、准确,适合于菟丝子总黄酮含量的测定,菟丝子炮制后的总黄酮含量较生品有了显著升高,其中酒炙品升高最多。     

A New Geranylated 2-Arylbenzofuran from Morus alba

Objective To study the chemical constituents from the root barks of Morus alba. Methods Various chromatographic techniques were used to separate the constituents and their structures were elucidated on the basis of extensive spectroscopic interpretation. Results Six compounds were isolated from the root barks of M. alba. The structure of new compound, named as albafuran D(1), was established together with known compounds sanggenon H(2), kuwanon E(3), kuwanon U(4), kuwanon F(5), and benzokuwanon E(6). Conclusion Compound 1 is a new geranylated 2-arylbenzofuran.