子痫前期血清对滋养-平滑肌细胞共培养体系平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨子痫前期血清对细胞滋养细胞-平滑肌细胞共培养体系平滑肌细胞凋亡的影响。方法:采用组织块贴壁法培养人早孕期细胞滋养细胞(CTB)和人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC),传代后建立滋养细胞与人脐动脉平滑肌细胞共培养模型并分别加入正常和子痫前期患者静脉血清培养24h,并设立相对应的单培养组;Transwell小室检测CTB的侵袭能力;细胞计数试剂盒(CCK-8)测定HUASMC活力;Annexin V-FITC检测HUASMC凋亡率;RT-PCR检测滋养细胞FasL mRNA与HUASMC的Fas mRNA的表达;W estern blot检测HUASMC的Fas蛋白的表达。结果:子痫前期患者血清能显著降低共培养体系中CTB的侵袭能力,上调HUASMC活力,降低HUASMC早期凋亡率、FasmRNA和Fas蛋白的表达。结论:子痫前期血清可能通过降调细胞滋养细胞-平滑肌细胞共培养体系滋养细胞的侵袭能力,降调共培养体系HUASMC Fas的表达,从而抑制HUASMC凋亡。     

妊娠合并主动脉夹层的诊治

妊娠合并主动脉夹层病情凶险,容易误诊、漏诊,母儿不良结局风险极高,且与夹层分型密切相关,病因主要与原发高血压、先天性和遗传性血管性疾病相关,妊娠是其好发因素。胸痛为主要临床表现,诊断主要依靠影像学检查。治疗包括支持治疗、药物治疗、传统手术治疗、主动脉瘤腔内修复术等,治疗方式、分娩时机、分娩方式根据主动脉夹层累及范围与类型、孕周、患者及家属意愿和医疗条件综合决定。加强孕前与孕期保健、多学科评估与救治是降低不良母胎结局的关键。     

PKC信息途径在妊高征患者胎盘血管病变机制中的作用

目的探讨蛋白激酶C-α(PKC-α)在妊高征(PIH)胎盘绒毛血管病变中的作用.方法用RT-PCR、Westernblot分别测定胎盘绒毛组织PKC-α、前胶原Ⅰ、Ⅲ含量;用免疫组化、图像分析等方法测定胎盘绒毛细小血管PKC-α的表达,并对绒毛血管病变进行综合评价.结果(1)HE染色显示胎盘细小血管管壁增厚、管壁纤维素样坏死、急性粥样硬化显著高于对照组(P《0.01);(2)Western blot显示胎盘绒毛组织PKC-α(PKC-α t)、胞膜PKC-α(PKC-αm)、胞浆PKC-α(PKC-α c)含量及PKC-α m/PKC-α t比值显著高于对照组(P《0.01);(3)免疫组化显示PIH胎盘绒毛细小动脉(直径约100μm～200μm)PKC-α显色强度明显高于对照组;(4)RT-PCR结果显示,PIH胎盘绒毛组织前胶原Ⅰ明显高于对照组(P《0.01);(5)胎盘绒毛组织PKC-α t、PKC α m、PKC-α m/PKC-α t及绒毛细小动脉管壁PKC-α的表达与细小动脉中膜平滑肌细胞核密度(SMC)及胎盘绒毛组织前胶原Ⅰ的表达均呈正相关.结论PKC-α的激活及表达增加通过调控PIH患者胎盘绒毛细小动脉血管平滑肌细胞的增殖、管壁胶原表达,参与PIH患者胎盘绒毛细小动脉的病变过程.     

NOSTRIN基因克隆及其在人脐静脉内皮细胞中的表达

目的 :构建内皮型一氧化氮合酶运输介导物 (endothelialnitricoxidesynthasetrafficinducer ,NOSTRIN)基因的真核表达载体 ,通过质粒转染人脐静脉内皮细胞 (humanumbilicalveinendothelialcell,HUVEC)获得高表达NOSTRIN基因的细胞克隆。方法 :构建真核表达载体pcDNA3.1 NOSTRIN ,采用脂质体介导将重组质粒导入体外培养的HUVEC ,Westernblot检测转染细胞和未转染细胞中NOSTRIN蛋白质的表达。结果 :成功构建了真核表达载体pcDNA3.1 NOSTRIN ,并用脂质体介导的方法获得了高稳定表达NOSTRIN的细胞克隆 ;Westernblot显示转染前后的细胞均有 5 8kD的蛋白质表达 ,转染后表达量明显增高。结论 :重组质粒pcDNA3.1 NOSTRIN经转染能在HUVEC细胞中高效表达 ,为进一步研究NOSTRIN对HUVEC的生物学影响奠定了基础     

胎盘resistin表达与胎儿出生体重关系的探讨

目的:研究抵抗素(resistin)在孕足月胎盘组织中的表达及与胎儿出生体重的关系。方法:用W estern blot检测孕足月分娩的巨大儿与正常体重新生儿胎盘组织中抵抗素蛋白表达水平并对比其差异。结果:(1)resistin在巨大儿组及对照组胎盘组织中均有表达,巨大儿组胎盘resistin蛋白表达水平为0.82±0.02,在对照组表达水平为0.57±0.06,两组resistin蛋白表达水平差异有统计学意义(P<0.01);(2)胎盘组织中resistin蛋白的表达丰度与新生儿出生体重(r=0.900,P<0.05)呈正相关。结论:resistin蛋白在足月妊娠胎盘组织中有表达,其表达量与新生儿出生体重明显相关,resistin可能是妊娠晚期胎盘中影响胎儿宫内生长的重要因子之一。     

子痫前期血清对血管内皮细胞凋亡及细胞因子表达的影响

目的 探讨子痫前期患者血清诱导血管内皮细胞核因子-κB(NF-κB)活性及血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)表达的结果.方法 对血管内皮细胞株进行体外培养,分别加入正常妊娠及子痫前期患者血清.2 h后Western blot法测定细胞胞浆NF-κB抑制因子(I-κB)和胞核NF-κB活性;48 h后流式细胞仪检测细胞凋亡,酶联免疫法测定VCAM-1的表达.结果 子痫前期患者血清培养的血管内皮细胞胞浆I-κB含量明显低于正常妊娠血清培养组(P＜0.05),胞核NF-κB 含量以及VCAM-1的表达明显高于正常妊娠血清培养组(P＜0.05).结论 子痫前期患者血清可促进血管内皮细胞VCAM-1的表达、NF-κB的活性以及血管内皮细胞的凋亡;NF-κB在子痫前期患者血清促血管内皮细胞凋亡及VCAM-1的表达过程中可能起重要作用.     

HPLC法测定感冒止咳糖浆中连翘苷的含量

[目的]测定感冒止咳糖浆中连翘苷的含量。[方法]采用HPLC法对制剂中连翘苷进行定量测定。[结果]连翘苷在0.201~1.809μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9997),平均回收率为99.24%,RSD=0.49%(n=6)。[结论]HPLC法简便,准确,重复性好,精密度高,可作为该制剂中连翘苷的质量控制方法。     

PKC抑制剂对子痫前期血清诱导人脐静脉内皮细胞NF-κB核转位及VCAM-1表达的影响

目的:探讨子痫前期血清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白激酶(PKC)活性改变、核因子-κB(NF-κB)核转位及内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)的表达以及PKC抑制剂对它们的影响。方法:用胰酶消化培养法培养正常妊娠HUVEC,传代后待细胞长满至70%~80%后,加或不加PKC抑制剂多黏菌素B(PMB)作用30m in后分别加入正常妊娠及子痫前期血清,培养2h,W estern B lot测定细胞胞浆PKC、胞膜PKC含量、胞浆核因子κB抑制因子(I-κB)、胞核NF-κBp65含量;培养48h,用MTT测定细胞活力,流式细胞学测定细胞凋亡,酶联免疫法测定HUVEC VCAM-1的表达。结果:子痫前期血清培养的HUVEC胞浆PKC及I-κB含量明显低于对照组(P<0.05),胞膜PKC含量、胞核NF-κBp65含量、VCAM-1表达、细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),细胞活力明显低于对照组(P<0.05)。加PKC抑制剂预处理后,子痫前期组HUVEC胞浆PKC含量及I-κB含量明显增加(P<0.05);胞膜PKC含量、胞核NF-κBp65含量、VCAM-1表达、细胞凋亡率明显下降(P<0.05),细胞活力明显增加(P<0.05)。结论:子痫前期血清可促进HUVEC NF-κB活性及VCAM-1表达,PKC抑制剂可抑制子痫前期患者血清诱导HUVEC的NF-κB活性及VCAM-1表达,PKC、NF-κB在子痫前期内皮细胞损伤过程中可能起重要的桥梁作用。     

孕产期血小板减少不同病因的临床处理及母儿结局分析

目的:对不同病因的孕产期血小板减少的临床处理及母儿结局进行分析,以提高对此类疾病的诊治水平。方法:回顾性分析2008年1月至2019年12月在上海市第六人民医院分娩的306例孕产期血小板减少患者的临床资料,根据不同的病因分为5组:妊娠期血小板减少症组(GT组,164例)、原发性免疫性血小板减少症组(ITP组,85例)、妊娠合并血液系统疾病组(HD组,28例)、妊娠期高血压疾病组(HDCP组,24例)、妊娠合并免疫系统疾病组(ISD组,5例),比较不同病因孕产期血小板减少患者的血小板减少的程度、临床处理及母儿结局。结果:(1)GT组患者的轻度血小板减少的比例明显高于中度及重度(P0.05);ITP组、HD组及ISD组患者的重度血小板减少的比例明显高于轻度(P0.05)。(2)GT组观察或对症口服治疗,19例接受血小板输注;ITP组观察或对症口服治疗64例,应用糖皮质激素或丙种球蛋白或联合使用21例,接受血小板输注53例;HDCP组紧急终止妊娠18例,行期待治疗后终止妊娠4例;HD组输血支持治疗27例,免疫抑制治疗8例;ISD组5例均有接受甲泼尼龙、丙种球蛋白静脉滴注、血小板输注等治疗。(3)ITP组的剖宫产率及输血率高于GT组(P0.05),而HD组、HDCP组、ISD组的剖宫产率、输血率、早产率、新生儿窒息率均高于GT组(P0.05)。(4)重度血小板减少患者的剖宫产率、输血率、早产率、新生儿窒息率均明显高于轻度(P0.05)。结论:引起血小板减少的病因不同,血小板下降程度、处理及预后各不相同,GT主要表现为轻度血小板减少,母儿结局良好,其他病因的孕产期血小板减少患者重度血小板减少增加。及时明确诊断,合理规范的治疗是降低重度孕产期血小板减少母儿风险,改善母儿预后的关键。     

瘦素与妊娠的研究进展

瘦素 (leptin)是由脂肪组织分泌、调节能量平衡代谢的内分泌激素 ,瘦素与妊娠关系密切。国外研究发现 :妊娠期母血瘦素明显增高 ,高水平瘦素是妊娠晚期体脂储备充分的信息反馈分子 ,妊娠期瘦素迅速下降是妊娠终止的指标 ,胎盘、胎儿产生的瘦素与胎儿宫内发育、新生儿早期生长发育、过期流产、妊高征、糖尿病密切相关