中国人2型糖尿病合并高甘油三酯血症患者脂蛋白酯酶基因突变及功能分析

目的 研究中国人2型糖尿病合并高甘油三酯血症患者脂蛋白醒酶(1ipoprotein lipase,LPL)基因突变及对酶功能的影响,从脂代谢途径探讨引发糖尿病的遗传因素。方法 对高甘油三酯及血脂正常的2型糖尿病患者和正常人的LPL基因进行研究。利用PCR—SSCP、PCR—RFLP及DNA测序技术对LPL基因的启动子和10个外显子区域进行突变检测,针对特异位点进行体外定点突变和酶活力表达研究,利用网上工具平台Swiss-PDB Viewer对正常和突变蛋白进行二级结构模拟分析。结果 在177例高甘油三酯2型糖尿病患者中检测到4种错义突变：Ala71Thr、Val181IIe、Glyl88Glu和Glu242Lys,在正常血脂的糖尿病患者和健康人组中没有检出以上突变。这4种突变位于进化上高度保守的氨基酸位点,并分别在高度保守的外显子3、5及6区域。体内和体外酶活力研究表明,这4个突变均引起了酶活力降低甚至失活,其改变程度可以从它们所在序列的保守性、在酶功能结构城中的相对位置、相应的二级结构改变和氨基酸特性获得解释。结论 在受累个体中,LPL突变是引起患者血浆甘油三酯升高的直接原因,是其发展成2型糖尿病的遗传性易感因素。     

TBL教学法在病理学理论课的应用实践

病理学理论课程知识点多,内容繁杂,传统教学法的教学效果不理想。文章介绍了将团队为基础的学习(teambased learning,TBL)教学法应用到病理学理论课堂的具体方法,结果发现TBL教学法可以增强学生学习兴趣,培养学生主动学习能力,同时深化了学生对知识点的理解,提升了学生的综合能力。TBL教学法可作为传统教学法的有益补充,两者融合将有助于提高病理学理论教学效果。     

小鼠FGFR1/MIP3a-Fc融合基因真核表达载体的构建及表达

目的 构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达。方法 设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a基因片段,用内切酶消化后插入pc DNA3.1(+)/Fc(Mouse Ig G2a)质粒中,构建FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒;经PCR鉴定、酶切鉴定以及测序鉴定后,将该融合基因表达质粒瞬时转染293T细胞,用ELISA法检测其在293T细胞的表达。结果 经PCR、酶切鉴定以及测序证实,FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功;ELISA检测FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒能够在293T细胞中表达。结论 FGFR1/MIP3a-Fc融合基因表达质粒构建成功,该质粒能够在293T细胞中表达。     

异常光照制对大鼠血压和体重的影响

目的探讨不同光照制对大鼠体重、血压、心率等的影响。方法 SD大鼠随机分为持续光照组、持续黑暗组及正常光照组,定期监测大鼠动脉血压、心率和体重变化,40d后处死,取心脏和肾脏计算相对重量。结果在实验第10、20和30天,光照组和黑暗组大鼠动脉血压均明显高于正常组大鼠(P<0.05);光照组及黑暗组第40天血压下降,与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。实验期间不同处理组间大鼠心率变化差异无统计学意义(P>0.05)。实验期间雄性大鼠各组间体重变化差异有统计学意义(P<0.05);实验第1～10天光照组雄性大鼠平均体重增长速度明显高于黑暗组和正常组(P<0.05);雌性大鼠光照组及黑暗组第1～10天的平均体重增长速度明显高于正常组(P<0.05)。实验第40天后,光照组和黑暗组大鼠心脏和左侧肾脏与体重比值明显高于正常组(P<0.05)。结论异常光照制导致大鼠血压和体重不稳定或异常升高,引起大鼠心脏及肾脏重量异常改变或增加,异常光照制可能是影响高血压发生发展的风险因素。     

端粒酶调节相关基因TRAP与肿瘤生物学特性的关系

目的：研究TRAP基因在人肿瘤组织中的表达及其与人端粒酶逆转录酶(hTERT)的作用相关性，探讨其在人肿瘤发生中的作用。方法：通过原核表达TRAP蛋白免疫新西兰白兔，制备特异性多克隆抗体；免疫组化检测TRAP及hTERT在人肿瘤组织中的表达；通过构建TRAP真核表达载体、基因转染，观察TRAP对细胞hTERT转录、端粒酶活性和癌细胞生长及成瘤性的影响。结果：通过大肠杆菌表达的TRAP蛋白免疫、制备多克隆抗体，经Westem blot鉴定与TRAP具有特异结合性；免疫组化显示247例恶性肿瘤中有213例TRAP阳性，表达率为86．2％，而在所有癌旁组织中TRAP为阴性。另外，交界性及癌前病变与良性病变组织中TRAP表达差异也有显著性：进一步检测卵巢生发上皮肿瘤、乳腺癌、肝癌及中枢神经系统肿瘤组织hTERT表达，显示hTERT与TRAP表达的结果相一致。TRAP正义转染使hTERT及端粒酶活性升高，细胞增殖加快；而反义转染时，两者均下降，细胞增殖受抑。裸鼠成瘤性实验表明：正义TRAP使癌细胞成瘤性增强，而反义则抑制移植瘤的生长。结论：TRAP表达存在于人癌组织及部分癌前病变，与癌细胞恶性表型相关，并与hTERT表达一致。TRAP基因参与对端粒酶的调节作用，可能与人肿瘤发生有关。     

一种可能的结直肠癌早期病变

目的:研究结直肠癌的癌前病变.方法:应用免疫组织化学方法,检测101例结直肠癌及相应的癌旁黏膜和远端切缘黏膜,16例溃疡性结肠炎、16例克隆氏病和3例健康成年人结直肠各部位黏膜的KiA10的表达.结果:在结直肠癌中KiA10阳性率为14.85%(15/101),癌旁黏膜和远端切缘黏膜均有18例KiA10阳性腺窝分布,但并非一一对应.结论:KiA10阳性腺窝可能是一种新的结直肠癌癌前病变.     

陈旧性组织苏木素-伊红教学切片的快速修复法

医学形态学教学中尽管数字教学切片日渐普及与深化,但苏木素-伊红(hematoxylin-eosin staining,HE)染色切片仍是必不可少的最直观的重要教学工具。病变典型的教学切片十分珍贵,有的几乎是一片难求,尤其是上世纪50～60年代的一些特异性疾病的标本,如风湿性心肌炎、肾小球肾炎、     

CCAAT/增强子结合蛋白家族与肝脏疾病

CCAAT/增强子结合蛋白(CCAAT enhancer-bindingproteins,CCAAT/EBPs)家族最初由McKnight及其同事在大鼠肝脏中发现,因其能与启动子的CCAAT区及多种病毒增强子相结合得名,属于碱性区亮氨酸拉链(basic region/leucine zipper,bZIP)蛋白家族,他们结合并转录激活特定     

10例单纯性乳腺大汗腺癌及其癌前病变

目的:探讨单纯性乳腺大汗腺癌(apocrine carcinoma,AC)及癌前病变的临床病理特点、免疫表型及预后特征。方法:收集2004至2014年10例单纯的乳腺AC患者的临床资料及随访资料,进行病理组织形态学观察和免疫组织化学染色,并复习相关文献。结果:10例患者平均年龄60.5岁,其中大汗腺型导管原位癌(apocrine ductal carcinoma in situ,ADCIS)3例,ADCIS伴浸润性大汗腺癌(invasive apocrine carcinoma,IAC)5例,大汗腺型包裹性乳头状癌1例,大汗腺型包裹性乳头状癌伴IAC 1例。镜下癌细胞均为高核级,细胞大,界清,胞质丰富,嗜酸或透明,颗粒状,核增大,核仁大而突出。10例均呈雌激素受体(estrogen receptor,ER),孕激素受体(progesterone receptor,PR)阴性和雄激素受体(androgen receptor,AR)阳性表达,9例囊泡病液体蛋白15(gross cystic disease fluid protein 15,GCDFP-15)弥漫阳性,4例人表皮生长因子受体2(human epidermal grow th factor receptor 2,HER2)阳性。10例癌旁均可见大汗腺病变谱系化发展过程的不同阶段病变。9例患者随访12~46个月,均存活,无复发和转移。结论:单纯的乳腺AC罕见,细胞形态及免疫表型具有诊断意义,多合并其他良性和不典型大汗腺病变。预后可能相对较好,有待进一步证实。     

器官-系统整合课程背景下病理学PBL教学法的应用

PBL(problem-based learning)教学法是一种以问题为基础的学习模式。器官-系统模式的医学整合课程打破了学科之间的屏障,具有综合性特点,为PBL的实现提供了平台。在器官-系统整合课程背景下病理学教学中应用PBL教学法,可以激发学生的学习兴趣,提高病理学的课堂教学效果,培养学生独立思考及综合分析能力和团结合作的团队精神。对病理学课程中PBL教学流程设计、教学方法的优缺点和实践中应注意的问题进行讨论总结,以适应病理学PBL教学的需要。