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本文应用c-Ha-ras-1、N-ras Wigler(左段)和P~(52c-)(右段)、c-sis、erbB、c-myc和V-fos六种癌基因作探针,用瑟慎印迹和斑点杂交两种方法研究了94例胃癌、肝癌和脑瘤DNA的限制性片段长度多态性(RFLPs)、基因扩增和基因重排情况,和85例正常人组织杂交结果相比,发现了国内外未见报道过的癌基因等位片段。在肝癌中用N-ras作探针,ECORI酶解的杂交结果发现4kb、7.8kb、12kb和12.8kb等位片段。 相似文献
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用~(32)p 标记的人癌基因 N-ras 探针 p52C-分别与经限制性核酸内切酶 Hind Ⅲ消化的原发性肝癌患者手术切除的肝癌组织 DNA 以及作为对照的人工流产胎儿绒毛的DNA 进行分子杂交以观察其 RFLPs。结果发现有8.6kb、5.2kb 和6.5kb 三种首报的等位片段,它们在全部标本中出现的频率分别为100%、53.8%和23%。就基因型而言,8.6kb 纯合子占23%,8.6kb/5.2kb 杂合子占54%,8.6kb/6.5kb 杂合子占23%。在首报的三种等位片段中,6.5kb 的片段仅出现于肝癌组织 DNA。 相似文献
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以原发性肝癌组织DNA以及作为对照的正常人白细胞DNA和人工流产胎儿绒毛DNA为材料,应用5′侧和3′侧两种N-ras探针以及c-sis探针,通过Southern吸印杂交探查其对特定限制酶的限制性片段长度多态性。结果未发现人癌基因N-ras对限制酶Bam HⅠ、PstⅠ、MspⅠ以及人癌基因c-sis对限制酶Eco RⅠ、HaeⅢ的限制性片段长度多态性;但发现人癌基因c-sis对限制酶Hind Ⅲ、SacⅠ、PstⅠ、PvuⅢ、MspⅠ等都有限制性片段长度多态性。这些等位片段可为进一步结合家系分析,探查致癌的家族素因以及肿瘤的遗传易感性研究中寻找遗传标记提供基础。 相似文献
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一种新的LHON基因诊断方法──PCR-SSCP银染技术朱斌,张丽珊,黄鹰,王世浚,李方园自1989年日本的Orita等[1]建立单链构象多态性(singlestrandconformationpolymorphism,SSCP)分析技术以来,作为检... 相似文献
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本文报告了1980年以来我们在细胞杂交技术及其应用研究中取得的各项阶段性成果。在细胞杂交技术方面,用分子量在1000、2000、4000、6000的PEG为融合介质,获得了中国仓鼠成纤维细胞Wg3-h、人HeLa细胞、人胃腺癌细胞SGC-T901的同种异核体,以及雄性麂肺细胞KIZ-7901-中国仓鼠成纤维细胞Wg3-h、中国仓鼠卵巢细胞CHO-人外周血港巴细胞、中国仓鼠卵巢细胞CHO-正常人骨髓细胞、中国仓鼠卵巢细胞CHO-白血病患者骨髓细胞的异种异核体,并成功地显示了上述各种细胞组合的PCC图象。获得了在体外长期传代培养的小鼠骨髓瘤细胞NS-1-Ag8-BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞以及小鼠骨髓瘤细胞SP2/0-Ag14-免疫后的BALB/c小鼠脾脏淋巴细胞的种内杂种细胞系。在细胞杂交技术的应用方面,重点在诱导“熟前凝聚染色体”(PCC),分析白血病患者骨髓细胞的群体增殖潜能。并据以判断白血病患者病情进展、疗效和预后,以及制备分泌抗人C4单克隆抗体的杂交瘤细胞系。本文对PEG的融合性能、白血病患者PPI值升高的机制、杂交瘤细胞的亚克隆化等问题进行了初步探讨。 相似文献
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绝大多数X-连锁基因是表现为X失活的,但少数基因则既可由活性X染色体也可由失活X染色体表达,且失活基因和表达基因是穿插排列的。X染色体失活中心XIC被定位于Xq13,并在此区间内鉴定出了一个只由失活X染色体表达的失活X特异性转录子XIST,被认为是诱导X失活的候选基因。 相似文献
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Leber氏遗传性视神经病是由于线粒体DNA(mtDNA)损伤所致遗传病。与核DNA不同,mtDNA为闭合,环状双链分子,且以多拷贝存在于细胞中。这些特点决定了mtDNA损伤所致遗传病具有不同于一般核DNA遗传病的特殊之处。本文对Leber氏遗传性视神经病在mtDNA中的突变位点,mtDNA杂合型,组织间差异性以及mtDNA和核DNA互作等方面都作了较为详细的综述,最后还介绍了Leber氏遗传性视神经病基因诊断的研究进展。 相似文献
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小鼠骨髓瘤细胞SP2/0(HGPRT-)与人外周血淋巴细胞经PEG介导融合,HAT培养基选择,获得了体外永久培养的人鼠杂交瘤NJ84。细胞遗传学分析证实杂种群体中尚保留5~12个人染色体,未查见种间染色体易位。A_4单克隆中保留着人9、11、X、14、18、19、22号染色体。杂种细胞G_6PD同工酶电泳出现三带型酶谱,证实人和鼠的G_6PD在杂种细胞中均有表达。同时观察比较了杂种及其亲本对细胞松弛素B的反应。这种人鼠杂交细胞可望用于人类基因定位、制备人类免疫球蛋白链基因克隆和人类单克隆抗体,也可用于恶性表达分析等方面的研究。 相似文献