自体富血小板血浆替代动物血清体外诱导培养人骨髓基质干细胞的实验

目的:用一种新的人骨髓基质干细胞培养方法,以满足细胞培养过程应中对各类细胞因子的需求,同时尽量减少细胞培养过程中动物源性抗原物质的引入,达到组织工程骨临床应用中细胞的数量与生物学特性要求。方法:实验于2004-03/2005-03在南方医科大学组织工程实验室完成。①自体富血小板血浆的获取:将抽取的自体200mL,加抗凝剂混匀,两次离心。第1次在20℃,3000r/min离心10min。取上清及分界面下3mm部分置另一离心管中,第2次在20℃,以3600r/min离心15min。弃上层3/4余部分在旋涡振荡器上轻震荡使混匀,即为富血小板血浆。,剩将富血小板血浆与催化剂溶液(100g/L氯化钙、400IU/mL凝血酶)含以体积比9∶1混合,混匀后以0.22μm滤膜过滤即为富血小板血浆复合因子萃取液。②人骨髓基质干细胞的获取和培养:10名成年健康志愿者(排除其他系统疾病),男7名,女3名;15～35岁,平均年龄27.3岁。抽取骨髓5mL。将获得的有核细胞以2×10接种于10cm培养瓶(100mL/L72富血小板血浆配比低糖DMEM)培养。传代细胞用含100mL/L富血小板血浆,50mg/L抗坏血酸,1×10-8mol/L地塞米松,1×10-3mol/Lβ-甘油磷酸钠诱导培养,快速扩增后,采用倒置相差显微镜、扫描电镜观察各细胞形态及细胞增值情况,碱性磷酸酶染色与钙结节染色等方法对细胞进行生物学特性检测。结果:①人骨髓基质干细胞形态学观察结果:人骨髓基质干细胞接种后2～4h开始贴壁,24h后细胞完全贴壁,呈多角型、梭型。6～8d后,细胞可长满瓶底并呈现单层细胞融合。传代培养后细胞生长迅速,传代诱导后,接种细胞一两天可长满瓶底。细胞为长梭型或不规则多边形,并有伪足伸出,胞核位于细胞一端。细胞生长至第8代生长明显变缓,10代以后细胞内开始出现颗粒样沉积物,并有细胞脱落飘浮于液体中。扫描电镜观察,黏附细胞为梭型或多角型表现,并有多个突起呈不规则形状。②钙结节茜素红染色结果:第3代细胞培养融合后,继续培养至形成密集的细胞团簇,中心出现细胞基质的沉积,茜素红染色可以清晰的显示钙结节。③碱性磷酸酶染色:细胞诱导培养第3代后可见胞质内有大量灰黑色颗粒或块状沉淀,呈现碱性磷酸酶染色阳性。结论:①以自体富血小板血浆替代动物血清体外诱导培养人骨髓基质干细胞,碱性磷酸酶染色与钙结节染色结果显示细胞具有良好的成骨细胞生物学特性。②其所培养的细胞数量及生物学特性能快速达到临床应用的需求,是一种良好的培养方法。     

创伤后应激障碍的心理学效应和心理康复

创伤后应激障碍(post-traumaticstressdisorde,PTSD)是指由异乎寻常的痛苦事件引发的精神障碍,也即对异乎寻常的威胁性、灾难性事件的延迟或持久的反应,是目前第4个最常见的精神疾病。典型表现是有与痛苦记忆或与创伤性事件有关的噩梦,试图避免创伤的提及物以及生理性唤醒的提高。人们对应激事件出现“惊吓-否认-侵入-不断修正-结束”这样一个典型的心理反应过程,临床上PTSD最常见的是否认和侵入两个时相。PTSD的首选治疗尚无一致意见,对各种应激障碍,心理治疗至为重要,已发现各种方法如暴露疗法、认知疗法和药物疗法对PTSD治疗是有效的。     

Medpor植入术治疗萎缩性鼻炎的疗效分析

目的:探讨Medpor外科种植体鼻腔植入治疗萎缩性鼻炎(AR)的疗效分析。方法:选取38例萎缩性鼻炎的患者,行Medpor外科种植体经唇龈切口鼻底黏膜下填充术,对远期疗效进行观察。结果:38例经3-10年随访观察,治愈21例(55.3%),显效11例(28.9%),改善4例(10.5%),无效2例(5.3%)。本组病例总有效率94.7%。结论:Medpor外科种植体是治疗萎缩性鼻炎的理想材料。     

乳腺癌脑(脊)膜转移的MRI诊断分析

目的 分析并总结乳腺癌脑(脊)膜转移的MRI特征,提高对乳腺癌脑(脊)膜转移的认识和诊断准确率.方法 对27例经临床或病理证实的乳腺癌脑(脊)膜转移患者进行头或(和)脊椎MRI平扫及增强扫描,将脑(脊)膜转移分为3型,Ⅰ型为硬膜蛛网膜型,Ⅱ型为软膜蛛网膜型,Ⅲ型为混合型脑膜转移,对各型表现进行分析.结果 在27例患者中,Ⅰ型12例,Ⅱ型11例,Ⅲ型4例;伴有颅骨和(或)头皮转移3例;27例中有15例平扫可见病灶(55.6％),其中软脑脊膜型转移的显示率最低(36.4％),MRI增强扫描能显示所有异常强化的脑(脊)膜转移灶(100％).结论 MRI已成为乳腺癌脑(脊)膜转移检出的一种重要诊断方法,尤其是增强扫描在该病的诊断中起着重要的作用.     

Bx亚型1例实验室检查与鉴定

ＡＢＯ血型变异，遗传学认为是由于在Ａ、Ｂ位点上出现罕见的等位基因，或者由一些能影响ＡＢＯ基因正常表现的罕见基因所致。亚型是血型变异的一种，由于其血型抗原弱，用已知抗体检测抗原和用已知抗原测被检血清中抗体，往往不符合ＡＢＯ血型特点。因此，应根据受检者红...     

脑心通胶囊对脑梗死患者智能、血脂的影响

随着脑血管患者的增加,血管性痴呆成为威胁老年人健康的严重疾病之一。国外资料报道血管性痴呆是迄今为止唯一可以预防的痴呆类型,早期积极预防治疗具有可逆性。我们选用脑心通胶囊对脑梗死患者智能及血脂进行临床观察,现报道如下。1对象与方法1.1观察对象选取本院神经内科住院     

治疗宫颈病变而不影响生殖的新方法:宫颈环形电切术

目的：探讨宫颈环形电切术（LEEP）与阴道镜下多点活检在宫颈病变的诊断中互补，及其LEEP在宫颈病变治疗中的价值。方法：回顾分析因宫颈病变同时行宫颈细胞学检查，阴道镜下多点活检和LEEP的患者109例。采用自身对照法，对照LEEP和阴道镜下多点活检病理结果。结果：LEEP和阴道镜下多点活检的病理结果完全符合者86例（78.9%)，不符合者23例（21.1%)。LEEP后，因发现原位癌2例（1.9%)行全子宫切除术1例，行较大的宫颈锥形切除术1例。术后3个月随诊。无一例出现宫颈细胞学检查异常，LEEP的并发症为出血46例（42.2%)。结论：LEEP在宫颈病变的诊断和治疗中具有极其重的价值。对于宫颈病变的明确诊断与阴道镜下多点活检互为补充；对宫颈炎症，CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ可提供操作简单，安全有效的治疗，并可保留生育功能；患者有宫颈细胞学检查结果再到门诊做阴道镜检查时，即可用LEEP进一步诊断和同时治疗，术后必须定期随访；本文中介绍几种处理并发症的经验。     

白细胞介素8在兔缺血再灌注脊髓损伤中的作用

目的 探讨兔缺血再灌注脊髓组织中白细胞介素8（IL-8）趋化诱导中性粒细胞（PMNL）的作用。方法 分非抗IL-8抗体组和抗IL-8抗体组，采用免疫组化和组织病理学方法，观察抗IL-8抗体使用前后再灌注脊髓组织中IL-8的表达及PMNL浸润情况。结果 再灌注12h，脊髓组织中IL-8呈强阳性表达并可见大量PMNL浸润，使用抗IL-8抗体后，组织中IL-8被清除，PMNL浸润明显减少。结论 缺血再灌注脊髓损伤中，IL-8可强烈地趋化诱导PMNI。在组织中的浸润，其在炎症反应引起的继发性损伤中发挥重要作用。