以问题为基础的学习在职业卫生与职业医学教学中的实践与思考

职业卫生与职业医学是预防医学专业的主干课程,在该课程部分章节教学中开展以问题为基础的学习（problem-based learning,PBL）,以提高学生的学习兴趣和加深其对知识点的掌握。授课中选取具有一定开放性及难度的问题,组织学生查阅文献、分组讨论、汇报总结。通过课后教师与学生交流,学生普遍反映,PBL教学锻炼了自身发现问题、查阅资料、分析判断、推理总结等综合能力。而针对教学实践中暴露出的问题,教师应做到细致、公正地评价每个学生在PBL环节中的表现,并在教学中正确引导学生把握研习方向。     

两种砷化物诱导胰岛细胞的凋亡

背景：近年有流行病学调查显示砷暴露与糖尿病发病相关。目的：实验从砷导致胰岛β细胞凋亡的机制入手,阐明砷化物相关糖尿病的致病机制。方法：将砷酸氢二钠（Na2HAsO 4·7H2O,iAs5＋,50,100,200μmol/L）和二甲基胂酸钠（C2H6AsNaO2·3H2O,DMA5＋,100,200,400μmol/L）分别作用于大鼠胰岛细胞株（INS-1细胞）24 h或48 h。通过MTT法检测砷化物对胰岛细胞的毒性作用。用Annexin V-FITC/PI和Hoechst 33258染色法检测两种砷化物致细胞凋亡情况。用2’,7’-二氢二氯荧光素染色检测细胞内活性氧的含量,用Western blot检测细胞内P53的蛋白含量变化。结果与结论：砷酸氢二钠（〉50μmol/L）、二甲基胂酸钠（〉100μmol/L）均降低大鼠胰岛β细胞的细胞存活率（P〈0.05,P〈0.01）;砷酸氢二钠（50-200μmol/L）和二甲基胂酸钠（100-400μmol/L）作用于大鼠胰岛β细胞48 h后,细胞发生凋亡。砷酸氢二钠、二甲基胂酸钠暴露24 h引起大鼠胰岛β细胞内活性氧水平呈剂量依赖性升高（P〈0.05,P〈0.01）。经砷酸氢二钠染毒的胰岛β细胞的细胞核内P53蛋白表达增多（P〈0.05,P〈0.01）,而经二甲基胂酸钠染毒的大鼠胰岛β细胞的细胞核内P53蛋白表达差异无显著性意义。结果说明,两种砷化物砷酸氢二钠、二甲基胂酸钠均可引起胰岛β细胞凋亡,可能与砷所致活性氧水平增高有关。     

亚砷酸钠对血红素加氧酶-1诱导作用

目的观察不同暴露剂量和时间下，亚砷酸钠（NaAsO2）对体外培养的牛主动脉血管内皮细胞（BAEC）中血红素加氧酶-1（HO-1）的诱导作用。方法分别在0～15μmol／LNaAsO2暴露0～24h收集培养的BAEC细胞蛋白提取液中，用蛋白印迹（westernblot）法检测HO-1蛋白的诱导产生量。结果0～15μmol／LNaAsO2暴露能够显著诱导BAEC细胞HO-1蛋白产生增加，并且分别具有剂量-反应和时间-反应相关关系；2．5μmol／LNaAsO2暴露即可显著诱导产生HO-1蛋白。结论HO-1蛋白的诱导表明砷介导的一种细胞应激反应；HO-1蛋白可以作为无机砷暴露的敏感性生物标志物之一，有利于深入研究无机砷暴露的生物剂量反应。     

抗氧化营养素对NaF致大鼠肾细胞DNA损伤的干预性实验研究

目的研究不同浓度NaF对体外培养大鼠肾细胞DNA的损伤作用及不同抗氧化营养素对氟的干预性影响.方法体外分离培养大鼠肾细胞,分别施加不同浓度的NaF,一定浓度的VC、VE、Se和GSH,采用单细胞凝胶电泳方法,研究NaF对肾细胞DNA的影响及这些抗氧化营养素的干预性作用.结果当NaF为0.25mmol/L时,对大鼠肾细胞DNA有明显的损伤作用;一定浓度的VC、VE、Se和GSH均能拮抗0.25 mmol/L的NaF对肾细胞DNA产生的损伤作用.结论一定浓度的VC、VE、Se和GSH能拮抗一定浓度的NaF对大鼠肾细胞造成的DNA损伤作用.     

某高校新生艾滋病知识的调查

艾滋病正威胁着全人类,尤其是儿童、青少年.不断变化的社会生活方式,包括性观念和性行为的变化,使许多青少年成为艾滋病传播的易感人群,作为一级预防的健康教育工作,不仅可以促进预防艾滋病知识的传播,而且能提高人们的自我保护意识,降低人们危险行为的发生.     

亚砷酸钠对HaCaT细胞NF-κB蛋白表达的影响

目的 研究不同浓度亚砷酸钠（NaAsO2）对人角质形成细胞株（HaCaT）核转录因子（NF-κB）蛋白表达的影响及其与活性氧（ROS）及过氧化物酶（CAT）的关系。方法 用流式细胞仪检测细胞内ROS水平，用紫外速率直接法测定CAT活性，用蛋白印迹（western blot）方法检测NF-κB蛋白表达。结果 从2．5μmol／L组开始。细胞内ROS水平增高，且呈剂量一反应关系；5μmol／L以上组CAT活性明显下降，5μmol／L以上组NF-κB表达减弱（P〈0．05）。结论 砷诱导HaCaT细胞氧化应激，抑制NF-κB蛋白的表达。     

亚砷酸钠对淋巴细胞毒性及抗氧化物拮抗作用

目的研究不同浓度的亚砷酸钠对体外培养的大鼠淋巴细胞活力的影响及亚硒酸钠和抗坏血酸的拮抗作用。方法体外分离大鼠外周血淋巴细胞后，施加处理因素，在37℃条件下恒温培养，用水溶性染料(AlamarBlue)摄入法定量检测淋巴细胞活力。结果亚砷酸钠浓度大于5μmol／L时，AlamarBlue的还原率显著低于对照组，且呈剂量反应关系；用5μmol／L的亚硒酸钠预处理细胞24h后，10μmol／L亚砷酸钠组AlamarBlue的还原率显著增高，接近空白对照组还原率；而用50μmol／L的抗坏血酸预处理后，还原率有所增高，但未达到对照组水平。结论亚砷酸钠可抑制淋巴细胞活力，抗氧化物可一定程度的拮抗三价砷的细胞毒性作用。     

香烟烟气溶液对大鼠淋巴细胞活力的影响及抗氧化物质的干预作用

目的　了解香烟烟气溶液对大鼠淋巴细胞活力的影响 ,并探讨多种抗氧化物质的干预作用。方法以PBS作吸收液 ,用大包氏管收集香烟主流烟气 ,分别以 0、1× 10 - 3、2× 10 - 3、4× 10 - 3、8× 10 - 3、12× 10 - 3和16× 10 - 3支 毫升的香烟烟气溶液 (CSS)作用于大鼠淋巴细胞 ,2小时后加入AlamarBlue ,以其还原率评价细胞的活力。选择中作用剂量 8× 10 - 3支 毫升的香烟烟气溶液处理细胞 ,之前用维生素C(VC)、维生素E(VE)、谷胱甘肽 (GSH)、褪黑素 (MLT)、二甲基亚砜 (DMSO)等抗氧化物质预处理 ,检测细胞的AlamarBlue还原率。结果　 2× 10 - 3～ 16× 10 - 3支 毫升各组AlamarBlue还原率均显著低于对照组 ,且随CSS浓度的增高而下降。 0 0 5mmol LVC、0 2mmol LVE、0 1mmol LMLT、1mmol LGSH、1%DMSO均能显著增加CSS染毒组细胞的AlamarBlue还原率。结论　CSS能使大鼠淋巴细胞活力下降 ,VC、VE、MLT、GSH、DMSO等抗氧化物质能拮抗这种损伤作用。     

氟化物对大鼠颅骨成骨细胞DNA损伤的研究

我国是地方性氟病发生率较高的大国，由于氟过量摄入导致了许多患者心、脑、肝和肾等器官病变。骨骼是氟在体内主要蓄积的部位，长期过量摄入可导致骨代谢紊乱，引起全身性骨骼病变，即氟骨症。已有研究表明高氟可影响骨细胞的生长和功能，且能引起成骨细胞(OB)凋亡，而氟能否直接引起OB的DNA损     

亚砷酸钠对人皮肤角质形成细胞内过氧化氢酶的影响

目的 探讨亚砷酸钠（NaAsO2）作用于体外培养的人皮肤角质形成细胞（HaCaT）后,细胞内过氧化氢酶（CAT）的活力、mRNA和蛋白表达的变化.方法 对生长至80%融合的HaCaT细胞株,分别加入0.0、2.5、5.0、10.0和20.0 μmol/L的NaAsO2作用24 h.用紫外速率直接法测定细胞内CAT的活力;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测CAT的mRNA表达水平;用免疫印迹（Western blot）方法检测CAT蛋白表达水平.结果 5.0 μmol/L以上的NaAsO2可明显降低CAT的活力,且呈剂量-反应关系,差异有统计学意义（P＜0.05）;RT-PCR电泳结果可见,5.0 μmol/L以上的NaAsO2作用于细胞后CAT/β-actin吸光度比值与对照组比较明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;Western blot检测结果与RT-PCR电泳结果一致.结论 NaAsO2可降低HaCaT内CAT基因的mRNA及蛋白表达水平并抑制细胞内CAT活力.