抗SARS冠状病毒中和活性单克隆抗体的筛选及其结合位点分析

目的 建立能分泌具有中和活性的抗SARS-CoV单克隆抗体（McAb）细胞株，制备有中和活性的抗SARS-CoV MeAb，用于SARS-CoV感染的早期特异诊断和进行SARS-CoV结构蛋白的功能研究。方法 用灭活纯化sARS-c0V（BJ01株）免疫BALB／c小鼠，通过细胞融合技术，建立能稳定分泌SAILS病毒MeAb的杂交瘤细胞系，然后用中和试验进一步筛选分泌具有中和活性的抗SARS-CoV MeAb细胞株。利用SARS-CoV的S和N蛋白的不同长度肽段通过EusA鉴定McAb的特异结合区域，分析S和N蛋白不同区域诱导产生抗体的能力和特性。结果 建立了12株能稳定分泌抗SARS-CoV McAb的杂交瘤细胞株，间接免疫荧光法检测抗体效价在1：320～1：20 480之间，其中6株具有较好的中和SARS-CoV的能力。具有中和活性的McAb中，3株是针对S蛋白的，2株是针对N蛋白的。其中抗S蛋白的中和抗体活性比抗N蛋白的中和抗体活性高，另外1株可能是针对SARS-CoV的其他结构蛋白的。进一步对6株抗S蛋白的McAb的特异抗原结合表位分析，发现其中3株结合位点在S蛋白第12～311氨基酸之间，2株在第310～535氨基酸之间，后者中和效价高于前者，另1株是针对S2蛋白的，SARS病毒的受体结合区正位于第310～535氨基酸这一区段。具有中和活性的McAb通过间接免疫荧光、ELISA、酶标免疫组化法和胶体金方法对SARS病毒进行检测，都显示出高度的特异性和良好亲和力。结论 成功制备了具中和活性的抗SARS-CoV单克隆抗体，并分别测定了McAb对S蛋白和N蛋白的特异抗原结合活性，初步确定了S蛋白的中和表位。为今后SARS病毒的特异诊断、结构蛋白的功能分析和重组疫苗的研制奠定了较好的基础。     

玻璃酸钠滴眼液在角膜塑形镜配戴中对眼表形态和泪液的影响

目的 评价在配戴角膜塑形镜中使用1g·L-1玻璃酸钠滴眼液(不含防腐剂)对眼表形态和泪液的影响.方法 来我院门诊就诊的近视患者59例(118眼),均接受正规角膜塑形镜验配,并随机分为观察组29例(58眼)及对照组30例(60眼),观察组使用不合防腐剂的1g·L-1玻璃酸钠滴眼液戴摘眼镜,对照组使用舒润液(博士伦).分别于戴镜前和戴镜后1d、1周、1个月、3个月时进行视力(logMAR)、TMS-4角膜地形图、基础泪液分泌量、泪膜破裂时间(tear break-up time,TBUT)以及角膜上皮荧光素染色的检测.结果 观察组戴镜后1d的视力(logMAR)为0.20±0.15,高于对照组0.26±0.20(P ＜0.05);1周后两组视力均恢复平稳,戴镜后1周、1个月、3个月视力(logMAR)两组内比较差异均无统计学意义(均为P＞0.05).观察组各时间点的等效球镜度数与对照组比较差异均无统计学意义(均为P＞0.05),戴镜1周后两组等效球镜度数趋于平稳.观察组戴镜后1d角膜表面规则指数(0.49±0.22)明显低于对照组(0.64±0.32,P＜0.05),其他时间点两组间比较差异均无统计学意义(均为P＞0.05).观察组各时间点平均曲率值、角膜偏心率(e值)、基础泪液分泌量与对照组比较差异均无统计学意义(均为P ＞0.05).观察组戴镜后各时间点BUT分别为(6.86±1.82)s、(6.04±1.57)s、(6.30±1.41)s、(6.61±1.49)s,对照组分别为(5.50±1.72)s、(5.35 ±1.41)s、(5.44±1.03)s、(5.32±1.71)s,观察组戴镜后各时间点BUT均高于对照组(均为P ＞0.05).观察组的角膜上皮荧光素染色级别在戴镜后各时间点均低于对照组(均为P＜0.05).结论 1g·L-1玻璃酸钠眼液(不合防腐剂)在角膜塑形镜配戴早期可使角膜塑形更规则,从而改善角膜光滑度.在角膜塑形镜配戴过程中可以稳定泪膜,对角膜上皮起到保护和修复作用.     

应用组织多普勒对糖尿病患者左室舒张功能的评估

目的探讨组织多普勒成像技术(DTI)对2型糖尿病(DM)患者左室舒张功能进行评估的价值。方法应用常规二维、M型超声心动图测量射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS);应用组织多普勒成像(DTI)检测二尖瓣环运动频谱、脉冲多普勒技术(PDW)检测二尖瓣口血流频谱,并进行对比研究。结果①糖尿病组患者的EF、FS与对照组差异无统计学意义(P>0.05);②糖尿病组患者二尖瓣环室间隔处E’、E’/A’较对照组显著减低、E/E’较对照组增高(P<0.05);但减速时间(DT)差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DTI技术与PDW技术均可检出2型糖尿病患者左室舒张功能受损,但DTI技术更准确,能识别假性正常化模式,二者结合,可提高左室舒张功能受损诊断的准确性和敏感性,为糖尿病心肌病提供更早期的诊断依据。     

虹膜固定型人工晶状体植入治疗玻璃体切除术后无晶状体眼

目的 探讨虹膜固定型人工晶状体植入治疗玻璃体切除术后无晶体眼的疗效.方法 观察6例患者术后的最佳矫正视力、眼压、角膜内皮、前房深度及术中术后并发症的情况.结果 患者术后视力情况满意,眼压平稳,角膜内皮细胞数量稳定,无明显并发症.结论 虹膜固定型人工晶体植入治疗玻璃体切除术后无晶状体眼是一种简单、安全手术方式.     

补体因子H中Y402H变化与老年黄斑变性的关联性研究

目的 探讨补体因子H(CFH)外显子9的单核苷酸多态性T1277C(Y402H)与国人东北地区老年黄斑变性的发病关系.方法 选取2004～2007年沈阳何氏眼科医院确诊的83例散发性老年性黄斑变性患者及91例彼此无关联的对照者,年龄、民族和性别相匹配且都生长在我国东北地区,排除其他可能影响AMD的因素.抽取外周抗凝血4～6ml,提取全基因组DNA,聚合酶链反应(Polymerase chain re-action,PCR)扩增外显子9片断并进行直接测序.分别计算疾病组及对照组T1277C(Y402H)的发生频率及其比值比(oddsratio,OR),用卡方检验对结果进行统计学分析.结果 疾病组和对照组中Y402H发生频率和国外报道有明显不同,疾病组有3例阳性,频率为3.6%,对照组有3例阳性,频率为3.3%,X~2≈0.1926,P>0.05,差异无统计学意义.OR≈1.074,不能认为Y402H的变化与国人老年性黄斑变性的发生有相关性.结论 现未发现CFH基因中9号外显子上Y402H的变化与国人老年性黄斑变性的发生相关,但并不能否认CFH基因多态性与AMD有相关性,可能存在其他的单模标本多态性与国人AMD相关,这需要做进一步的研究来发现.     

睫状体平坦部硅油取出联合后囊膜切开术临床观察

目的 探讨睫状体平坦部硅油取出联合后囊膜切开术的临床效果.方法 对2008年1月至2010年1月间48例(48只眼)玻璃体切割联合硅油注入眼并发后发障患者行睫状体平坦部硅油取出联合后囊膜切开术.结果 术后矫正视力提高34只眼(70.8％).出现3例(6.3％)持续性低眼压、1例(2.1％)玻璃体腔少量血性混浊,所有病例均无大性角膜病变、硅油泡残留、人工晶状体移位或损伤、玻璃体积血等并发症.结论 经睫状体平坦部硅油取出术联合后囊膜切开术对玻璃体切除手术后硅油充填眼并发后发障是一种安全、便捷有效的手术方式.     

某部陆航官兵心理健康水平影响因素相关分析

目的:分析了解某部陆航官兵心理健康水平与影响因素间的相关性。方法:采用症状自评量表(SCL-90)和自行设计的调查表,对某部陆航官兵411例的心理健康水平进行测评,并分析其影响因素。结果:Pearson相关分析结果显示,官兵心理健康水平与负性事件、入伍动机、人际关系、业余爱好、误解、职业评价、转业想法、心理求助、是否患病、饮食、文体活动、任务目的、通讯、休息时间和气候等因素显著或非常显著相关(P<0.05,P<0.01);而与年龄、籍贯、婚姻、文化程度、军衔、参加救灾、执行较大型军事行动及军龄等因素无关(P>0.05)。多元逐步回归分析结果显示,气候、负性事件、业余爱好、人际关系、职业评价、心理求助和休息时间进入以SCL总分为因变量的回归方程。结论:气候、负性事件、业余爱好、人际关系、职业评价、心理求助和休息时间与官兵心理健康水平密切相关,应进行有针对性的心理干预。     

高校科技成果转化管理应注意把握的几个问题

高校科技成果转化对于实现产学研协同创新,推进创新型国家建设,实现高校社会服务功能有着重要的作用和意义,其管理有着自身的规律和特点。本文在探讨科技成果转化工作特点的基础上,结合工作实际,提出了在成果转化工作中应着力加强项目筛选、推介、合同谈判、过程管理、知识产权等环节的管理,以期为高校科技成果转化管理提供参考和借鉴。     

原创性药物研发不同阶段适宜的产学研合作模式研究

在总结、归纳产学研合作模式文献的基础上,通过对从事原创性药物研发的高校、科研机构和生物医药企业的问卷调查研究,提出了在原创性药物研发不同阶段所适合的产学研合作模式,并据此给出了推进原创性药物研发产学研合作的相关建议。     

《千金方》中膏摩的应用与发展

膏摩指用中药制成的膏剂,涂抹在人体体表,再施以各种按摩手法如揉法、擦法、摩法等,使手法与药物互相作用、相得益彰,药物在手法作用下更易透皮渗透,而手法在有药物作为介质的情况下能更好施展,从而提高疗效.膏摩在秦汉以前就已有雏形,如《五十二病方》中治疗皮肤瘙痒、冻疮等皮肤病的外用药以动物油膏剂为主[1].而膏摩一词首载于《金匮要略》.《金匮要略?脏腑经络先后病脉证第一》云:"若人能养慎……四肢才觉重滞,即导引、吐纳、针灸、膏摩……病则无由入其腠理."在秦汉以后,膏摩方随着医学的发展不断扩大完善,临床应用方面更加广泛、普及,特别是唐朝涌现出不少医学经典,《千金方》是其中一部较有代表性的著作,作为一部方书集大成者,在膏摩的发展史上有举足轻重的地位.《千金方》为唐代著名医家孙思邈所著,分为《备急千金方》与《千金翼方》,是中国医学史上第一部临床医学百科全书,内容涉及临床内外妇儿各科,同时也包含不少膏摩方的论述,有些经典膏摩方沿用至今.