凋亡抑制蛋白Livin在结肠癌组织中的表达及与细胞增殖的关系

目的 探讨凋亡抑制蛋白Livin在结肠癌组织中的表达及与细胞增殖的关系.方法 选取结肠癌患者术后病理标本70例,采用S-P免疫组化法检测Livin基因的表达,并探讨其与患者性别、年龄、肿瘤大小、组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移和远处转移等生物学行为及细胞增殖的关系.另取30例癌旁正常的结肠组织作对照.结果 结肠癌组织中Livin基因的阳性率明显高于癌旁正常结肠组织（X^2=12.19,P＜0.01）.Livin基因在结肠癌组织中表达水平与性别、年龄、肿瘤大小及组织分化程度无关（P＞0.05）,随原发病灶的浸润深度、淋巴结转移和远处转移呈明显上升趋势（P ＜0.01或P＜0.05）.Livin基因表达阴性的结肠癌组织中PCNA的细胞增殖指数明显低于Livin基因表达阳性的组织（P＜0.05）.结论 Livin基因不仅参与结肠癌的发病进展过程,而且还参与了结肠癌的局部侵袭和转移的病理过程.Livin不仅参与结肠癌细胞凋亡的调控,还促进了细胞的增殖过程,可作为大肠癌临床诊断、转移和放化疗疗效及预后评估的敏感指标.     

乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系

目的探讨乳腺癌组织中Livin蛋白的表达及其与患者临床病理特征和细胞增殖的关系。方法采用免疫组化S-P法检测乳腺癌组织中Livin蛋白表达,并探讨其与患者年龄、组织学分级、临床分期和淋巴结转移等临床病理特征和细胞增殖的关系。另选择20例癌旁正常组织和10例正常乳腺组织作对照。结果 Livin蛋白在正常乳腺、癌旁正常组织及乳腺癌组织中的表达呈逐渐增高趋势(χ2=18.28,P<0.01)。乳腺癌组织中Livin蛋白表达与临床分期和淋巴结转移密切相关(χ2=4.19和7.73,P<0.05或P<0.01)。Livin表达阴性乳腺癌组织中PCNA增殖指数明显低于Livin表达阳性乳腺癌组织(t=2.37,P<0.05)。结论 Livin蛋白在乳腺癌发生和发展不同阶段的表达呈进行性上升趋势,Livin蛋白在乳腺癌细胞的增殖、侵袭、转移等活动中可起到促进作用,可作为预后评估的指标。     

siRNA沉默Livin基因对乳腺癌MCF-7细胞化学治疗增敏作用的研究

目的：观察小干扰RNA（siRNA）沉默Livin基因对人乳腺癌细胞MCF‐7细胞生物学影响及siRNA沉默MCF‐7细胞Livin基因对4种化学治疗药物的增敏作用。方法 Lipofectamine 2000脂质体转染法转染MCF‐7。分组：空白组（无转染）、脂质体组、反义组、错义组、联合组。MTT法测定氟尿嘧啶（5‐FU）、表柔比星（EPI）、多西紫杉醇（DXT）、吉西他滨（GEM）单药（单药组）对乳腺癌细胞MCF‐7增殖的抑制作用。免疫组织化学检测Livin蛋白在MCF‐7细胞中的表达及转染联合化学治疗药物对Livin蛋白的表达变化。实时荧光定量PCR（RT‐PCR）检测转染Livin siRNA后乳腺癌MCF‐7细胞的Livin基因表达变化。同时利用Annexin‐V检测乳腺癌细胞的凋亡及siRNA Livin联合5‐FU、EPI、DXT、GEM 诱导乳腺癌细胞凋亡的影响。结果 Livin在MCF‐7细胞中高表达,4种化学治疗药物对 Livin表达无明显影响,转染Livin基因48、72 h后联合4种药物后能明显下调Livin蛋白表达,差异有统计学意义（P＜0．05）。5‐FU、EPI、DXT、GEM治疗乳腺癌MCF‐7细胞48、72 h均能明显的引起细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。转染Livin基因48 h联合4种药物后乳腺癌MCF‐7细胞的凋亡率明显高于单药处理的细胞,差异有统计学意义（P＜0．01）。结论 siRNA沉默Livin基因能促进由化学治疗药物5‐FU、EPI、DXT、GEM引起的细胞凋亡,具有化学治疗增敏作用。     

凋亡抑制基因在急性白血病及骨髓增生异常综合征中的研究

目的探讨急性白血病及骨髓增生异常综合征患者骨髓凋亡抑制基因MCL-1、livin、aven的表达及临床意义。方法选取2012年9月~2013年12月本院收治的113例初发急性白血病患者,32例骨髓增生异常综合征患者及20例对照组患者（缺铁性贫血12例、血小板减少性紫癜8例）的新鲜骨髓液标本,采用RT-PCR方法检测MCL-1、livin、aven基因mRNA的表达水平及表达率。结果 AL组和MDS组MCL-1、livin、aven mRNA表达水平及阳性表达率分别高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。MCL-1与livin基因mRNA的表达呈正相关（r=0.586,P〈0.05）,MCL-1与aven基因的表达呈正相关（r=0.603,P〈0.05）,liven基因与aven基因表达无相关性（r=0,P〉0.05）。结论 3种凋亡抑制基因MCL-1、livin、aven基因mRNA在急性白血病及骨髓增生异常综合征中表达均增高。     

Livin异构体基因转染对肺腺癌A549细胞生长及放化疗敏感性的影响

目的研究转染Livin α、β两种异构体基因对肺腺癌A549细胞生长及放、化疗敏感性的影响。方法基因转染获得稳定表达Livinα和β的A549细胞克隆，逆转录一聚合酶链反应及免疫荧光化学法了解Livin α、β在转染细胞中基因水平和蛋白水平的表达情况；用平板克隆形成实验研究细胞生长情况；甲基偶氮唑蓝法研究细胞对放、化疗的敏感性；细胞周期分析法了解细胞凋亡情况。结果与转染前比较，基因转染后，阳性细胞尤其是表达Livin α的A549细胞克隆形成能力提高约20％、倍增时间缩短5～6h（P〈0．05），对多种化疗药物和放射线敏感性降低（P〈0．01），10Gy放射线照射下仅有0．2％细胞发生凋亡。结论Livin尤其是Livin α参与肺癌的发生发展，是肺癌细胞对放、化疗耐受的重要机制之一。     

重症急性胰腺炎并肾损害大鼠肾组织Livin、Caspase-9蛋白变化及意义

目的探讨重症急性胰腺炎（SAP）并肾损害大鼠肾组织Livin、Caspase-9蛋白变化及意义。方法将90只大鼠随机分为假手术组（A组）、SAP并肾损害组（SAP组）、褪黑素（MT）干预组（MT组）各30只,观察其胰腺、肾组织病理改变,检测血清淀粉酶（AMY）、肌酐（Cr）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及肾组织Livin、Caspase-9表达;分析SAP并肾损害与Livin、Caspase-9表达的相关性。结果光镜下,A组胰腺、肾组织均正常;SAP组随造模时间延长病变逐渐加重;MT组病理改变较SAP组减轻。与A组比较,SAP组AMY、Cr、MDA、Caspase-9升高,SOD、Livin降低（P均〈0.01）;与SAP组比较,MT组AMY、Cr、MDA、Caspase-9降低,SOD、Livin升高（P均〈0.05）。SAP组SOD与Cr、Caspase-9表达呈负相关,MDA与Cr、Caspase-9表达呈正相关（P均〈0.05）;MDA、SOD与Livin表达无相关性（P均〉0.05）。结论 Livin、Caspase-9蛋白变化可能参与SAP大鼠的肾损害,外源性MT对SAP并肾损害有保护作用。     

Livin在下咽癌中的表达及意义

目的探讨Livin在下咽癌组织中的表达及其与各临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测30例下咽癌组织和30例相应癌旁正常组织中Livin蛋白的表达。结果下咽癌组织中Livin阳性率高于癌旁正常组织（P〈0.01）;Livin蛋白的表达与下咽癌组织中的淋巴结转移、临床分期、分化程度有相关性（P〈0.05）,与肿瘤大小、吸烟量、年龄和性别无相关性（P〉0.05）。结论 Livin蛋白的高表达可能促进下咽癌的发生、发展。     

Livin、Smac和Ki67在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin、凋亡相关因子Smac和细胞增殖核抗原Ki67在上皮性卵巢癌的表达及临床意义,并分析三者的相关性。方法:利用免疫组化SP法检测50例上皮性卵巢癌、20例交界性卵巢肿瘤、20例良性卵巢肿瘤和20例正常卵巢组织中三者的表达情况。结果:Livin与Ki67在卵巢癌中的表达明显高于其他3组(P<0.01),在卵巢组织中的表达与组织病理学分级和有无淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与组织学类型、分期无关。Smac在卵巢癌中的表达明显低于其他3组(P<0.01),在卵巢组织中的表达与组织病理学分级和有无淋巴结转移呈负相关(P<0.05),与组织学类型、分期无关。结论:Livin、Smac和Ki67在上皮性卵巢癌的发生、分化、进展过程中起重要作用;Livin、Smac和Ki67有望成为治疗卵巢癌的新靶点。     

Livin基因一肿瘤治疗新靶点

Livin是凋亡抑制蛋白（IAPs）家族的新的重要成员。Livin在多种肿瘤细胞中高表达,参与抑制细胞凋亡,与肿瘤发生发展密切相关。研究发现,通过下调或抑制Livin基因的表达及诱导产生特异性地识别Livin的抗体可抑制、杀死肿瘤细胞,为恶性肿瘤的诊断、细胞和基因靶向治疗等提供新的方法。     

Livin基因在浅表性膀胱癌中的表达及其与肿瘤复发的关系

目的检测凋亡抑制蛋白Livin在人浅表性膀胱移行细胞癌组织中的表达,并分析其与肿瘤分期、分级以及复发的关系。方法采用免疫组织化学法检测浅表性膀胱移行细胞癌(TCCB)组织标本中Livin蛋白的表达情况。结果Livin阳性表达率为57.5%,G1级阳性表达率53.8%,G2级阳性表达率59.3%,不同的病理分级组间表达差异无统计学意义(P0.05)。Ta期肿瘤阳性表达率为46.2%,T1期肿瘤阳性表达率为63.0%,不同临床分期组间表达差异无统计学意义(P0.05)。Livin表达与肿瘤是否多发无关。平均随访21.9个月,肿瘤复发率为55%,其中Livin表达阳性组的复发率为73.9%,平均复发时间为14.7个月,Livin表达阴性组复发率为29.4%,平均复发时间为31.58个月,二者之间差异显著(P0.05)。结论Livin在TCCB中高表达,Livin的表达与TCCB分级、分期及是否多发无关,与TCCB复发密切相关。