索拉非尼免疫毫微球的制备及其抗肝癌效果的实验研究

目的制备抗人肝癌抗体与索拉非尼偶联免疫毫微球,观察其特性及抗肝癌效果。方法通过异型双功能交联剂SPDP,将抗人肝癌单克隆抗体HAb18与索拉非尼(sorafenib,SAF)人血清白蛋白毫微球[HSA(SAF)-NS]偶联,制成抗人肝癌抗体与索拉非尼偶联免疫毫微球HAb18-HSA(SAF)-NS,使用凝集试验检测其活性,光镜和电镜下观察其与人肝癌细胞株SMMC-7721特异性结合。MTT法检测该免疫毫微球的体外杀伤性。于人肝癌裸鼠模型上分别使用HAb18-HSA(SAF)-NS、HSA(SAF)-NS及SAF,检测三者的肿瘤抑制率。结果 HAb18-HSA(SAF)-NS具有单抗活性,能与肝癌细胞特异结合;其体外杀伤SMMC-7721细胞IC 50值为42.4μg/mL,与HSA(SAF)-NS(368.9μg/mL)及SAF(377.5μg/mL)相比,明显降低;体内肿瘤抑制率比HSA(SAF)-NS及SAF显著增强(P0.001)。结论 HAb18-HSA(SAF)-NS具有免疫活性,对肝癌细胞有主动靶向性,体内外均具有比HSA(SAF)-NS及SAF更强的抗癌效果。     

肝移植术后胸腔积液的诊治分析

目的总结肝移植术后胸腔积液的诊断及治疗经验。方法选取我院2004年8月至2010年8月116例肝移植病例,通过B超及X线检查胸腔积液情况,对影响呼吸功能的患者实施胸腔穿刺并置放深静脉管抽液,总结诊断及治疗经验。结果 B超检查提示有89例术后发生胸腔积液,占76.7%;X线检查提示有67例术后发生胸腔积液,占57.8%。B超及X线检查差异显著（P〈0.01）。胸腔积液主要发生于右侧,左右两侧比较差异显著（P〈0.01）。各病种之间比较无明显差异（P〉0.05）。结论肝移植术后B超检查诊断胸腔积液的准确度明显高于X线;少数影响呼吸功能的胸腔积液患者需及时行穿刺插管抽液;术前病种与术后胸腔积液无明显关联性。     

胆囊结石合并胆总管结石的微创治疗

目的比较胆囊结石合并胆总管结石的微创与开腹手术的治疗效果。方法将120例胆囊结石合并胆总管结石患者随机分为两步微创组与传统开腹组。两步微创组54例患者第一步在十二指肠镜下行逆行胰胆管造影（endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP）和内镜下乳头括约肌切开术（endoscopic sphincterotomy,EST）取石,第二步于2～5d后行腹腔镜胆囊切除术（1aparoscopic chole-cystectomy,LC）;传统开腹组66例患者采取开腹胆道探查术（open common bile duct exploration,OCBDE）。比较两组患者的手术时间、手术出血量、住院时间,治疗费用及术后并发症的发生率。结果两步微创组在手术时间、术中出血量、住院时间均优于传统开腹组（P〈0.05）;两步微创组术后出现并发症4例,传统开腹组出现并发症9例,差异有统计学意义（P〈0.05）;两组住院费用比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论两步微创治疗胆囊结石合并胆总管结石有疗效好、创伤小、住院时间短等优点,有取代传统剖腹手术的趋势。     

壶腹癌多药耐药基因MDR1表达与临床病理特征的关系

0 引言在肿瘤细胞多药耐药的机制中,MDR1基因产物P-gp (P-glycoprotein,P-糖蛋白)的过度表达占有重要地位. 我们应用免疫组织化学染色方法检测壶腹癌及正常壶腹中MDR1的表达,并结合病理指标进行统计分析,探讨壶腹癌中MDR1基因表达与临床病理特征的关系.     

免疫治疗预防大肠癌术后肝转移

目的 探讨肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）、重组白细胞介素2（rIL－2）和环磷酰胺经门静脉输入治疗对进展期大癌根治术后患者免疫功能的影响及术后肝转移的预防作用。方法 将124例DukesB及C期大肠癌患者于根治术后随机分为免疫治疗组和对照组。对照组59例,术后使用氟尿嘧啶（5－Fu）、丝裂老素C（MMC）经静脉化疗;免疫治疗组65例,术后使用TIL,rIL－2和环磷酰胺经门静脉插管输入,以后的治疗与对照组相同。所有病例均随访3年。结果 免疫治疗组术后3年内大肠肝转移8例（12．3％）,而对照组为19例（33．2％）,二者差异显著（P＜0．05）。免疫治疗后,患者外周血自然杀伤组织（NK）、白细胞介素（IL－2）活性及T细胞亚群CD3,CD4/CD4/CD8都显著上升（P＜0．05）。结论 TIL,rIL－2联合环磷酰胺免疫治疗对提高进展期大肠癌术后患者抗肿瘤细胞免疫力,预防术后肝转移具有明显效果。     

肿瘤浸润淋巴细胞及重组白细胞介素2联合化疗在大肠癌？…

目的 研究进展期大肠癌根治术后应用肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）及重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）联合化疗的临床治疗效果。方法 将４８例Ｄｕｋｅｓ Ｂ及ＤｕｋｅｓＣ期大肠癌患者于大肠癌根治术后采用前瞻性随机分组的方法分为２组：一组４４例,术后使用自身航ｒＩＬ－２联合－５氟脲嘧淀及丝裂霉素Ｃ治疗;另一组４０例,术后单纯采用相同方案的化疗。随访３年。结果 ＴＩＬ及ｒＩＬ－２联合化疗组患者３年内局部复发率为     

原发性肝癌患者CTCs与CD4~+/CD8~+、NLR、TTV及肿瘤分期的相关性研究

目的:探讨原发性肝癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)与T细胞亚群CD4~+/CD8~+比值、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、肿瘤总体积(TTV)及肿瘤分期的关系。方法:收集80例原发性肝癌患者外周血,采用益善生物技术公司使用的"免疫去除结合纳米过滤法"Can PatrolTM行CTCs检测。同时使用流式细胞术检测外周血中CD4+T细胞和CD8~+T细胞数量;收集患者外周血中性粒细胞数、淋巴细胞数、肿瘤最大直径及肿瘤分期等临床病理参数。计算出外周血CD4~+/CD8~+比值、NLR及TTV。根据CD4~+/CD8~+平均值及TTV、NLR中位数将CD4+/CD8+比值、TTV和NLR分为高、低2组;根据肝癌第7版TMN分期标准将患者分为I+II期和III+IV期2组。分别比较CTCs在2组中的差别。结果:高CD4~+/CD8~+比值组外周血CTCs数及间质型CTCs数明显低于低CD4~+/CD8~+比值组(P0.05)。高TTV组外周血的CTCs数、间质型CTCs数及混合型CTCs数明显高于低TTV组(P0.05);肿瘤分期I、II期组外周血的CTCs数、间质型CTCs数及混合型CTCs数明显低于III、IV期组(P0.05)。高NLR组与低NLR组外周血的CTCs数、间质型CTCs数、混合型CTCs数和上皮型CTCs数间的差异无统计学显著性。结论:原发性肝癌患者外周血中存在CTCs;外周血CTCs与T细胞免疫、TTV及肿瘤分期有显著相关:T细胞免疫越差、TTV越大及肿瘤分期越晚,外周血的CTCs越多。     

双袖套法大鼠异体原位肝移植模型改进与体会

目的    探讨建立一种灌注更彻底,操作更简便实用的改进双袖套法大鼠异体原位肝移植模型。　方法　在Kamada双袖套法的基础上进行改良。供、受体均为SD雄性大鼠,以4℃林格氏液经腹主动脉、肝门静脉低压双重灌注供肝,受体肝上下腔静脉采用血管膜端端“三点”标记吻合法,肝门静脉及肝下下腔静脉采用袖套吻合法,胆管吻合采用单管插管吻合。　结果　54例正式实验受体无肝期较短,手术1d存活率94.4%(51/54)。受体大鼠术后一般状况良好。　结论　改良后双袖套法大鼠原位肝移植模型操作简易快捷,成功率较高。     

载131I和阿霉素"双弹头" F(ab′)2片段免疫毫微粒的抗人肝癌作用

目的研究载131I和阿霉素“双弹头”F(ab′)2片段免疫毫微粒的抗肿瘤效应及其在荷瘤裸鼠体内的分布。方法采用氯胺T法,将核素131I结合到抗人肝癌HAb18抗体的F(ab′)2片段靶向的载阿霉素毫微粒上,构建“双弹头”F(ab′)2片段免疫毫微粒;采用花环形成实验、MTT比色分析法等分别研究该免疫毫微粒对人肝癌细胞株(SMMC-7721)的特异性结合及体外细胞毒作用;应用皮下荷人肝癌裸鼠模型,评价该免疫毫微粒的体内分布及其抗肝癌作用。结果“双弹头”F(ab′)2片段免疫毫微粒能特异性结合于SMMC-7721细胞周围形成花环,其IC50明显低于“单弹头”F(ab′)2片段免疫毫微粒;该免疫毫微粒经尾静脉给药后,主要分布于肝、脾等处,而经瘤体注射主要滞留于瘤体内,其抑瘤率显著高于对照“单弹头”毫微粒。结论载131I和阿霉素“双弹头”F(ab′)2片段免疫毫微粒,具有较“单弹头”F(ab′)2片段免疫毫微粒更佳的抗肿瘤效应。