降钙素原、超敏C-反应蛋白和淀粉样蛋白检测在细菌性感染诊断中的应用价值

目的 探讨血浆降钙素原(PCT)、超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)和淀粉样蛋白(SAA)检测在细菌性感染诊断中的应用价值与非细菌感染时,PCT检测的临床应用价值高于Hs-CRP和SAA.方法 测定99例细菌性感染患者(细菌感染组)、96例非细菌感染性患者(非细菌感染组)与同期91例健康体检者(对照组)血中的PCT,Hs-CRP和SAA含量并进行分析.结果 (1)与菲细菌感染组及对照组相比,细菌感染组的PCT差异均有统计学意义(P＜0.01)、Hs-CRP均有统计学意义(P＜0.01)和SAA均有统计学意义(P＜0.01),检测结果的平均值均显著升高; (2)在诊断细菌感染时,PCT的灵敏度为87％,特异性为91％; hs-CRP的灵敏度为92％,特异性为52％; SAA的灵敏度为98％,特异性为15％; (3)在诊断细菌感染时,PCT、Hs-CRP和SAA ROC的曲线下面积分别为0.933、0.822和0.734.结论 PCT、Hs-CRP和SAA均可用于细菌感染诊断,但PCT检测的临床应用价值高于Hs-CRP和SAA检测.     

基于单细胞转录组测序数据分析PECAM1对胃肠道间质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨血小板和内皮细胞黏附分子1(platelet and endothelial cell adhesion molecule 1,PECAM1)表达对胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, GIST)细胞迁移和侵袭能力的影响。方法:基于GIST单细胞转录组测序数据,利用R语言筛选目标基因;细胞转染siRNA建立低表达实验组;伤口愈合实验、Transwell实验验证细胞迁移和侵袭能力的变化。结果:根据免疫细胞标志物PTPRC是否表达,将18个GIST细胞分群中的6个分群定义为非免疫细胞群;根据肿瘤干细胞标志物CD44、CD34和ABCB1的差异表达水平,将非免疫细胞群进一步划分成4个肿瘤干细胞亚群;对4个肿瘤干细胞亚群的差异表达基因作KEGG分析筛选出PECAM1基因;进一步基因集富集分析结果显示PECAM1与细胞迁移信号通路相关;细胞实验结果表明,相较于对照组,PECAM1表达降低后,细胞迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。结论:PECAM1正向调控GIST细胞迁移和侵袭过程。     

长链非编码RNA CASC9在胃癌化疗耐药中的机制研究

目的:观察长链非编码RNA CASC9对胃癌（gastric cancer,GC）细胞增殖、凋亡以及对5-氟尿嘧啶（5-FU）化疗耐药的影响,并探讨其机制。方法:首先采用实时荧光聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)检测永生化胃上皮细胞(GSE-1)和GC细胞(SGC-7901、BGC-823)中CASC9和P-gp的表达水平;在胃癌细胞SGC-7901和BGC-823中抑制CASC9表达后,通过RT-PCR检测P-gp的表达水平;在胃癌细胞SGC-7901中抑制CASC9表达后,再过表达P-gp,应用CCK-8法检测转染后各组光密度值以评价增殖率,应用Annexin V-APC单染色流式细胞术检测各组转染48 h后的细胞凋亡率,在培养基中加入不同浓度的5-FU检测各组细胞存活率。结果:与正常胃黏膜细胞相比,GC细胞中CASC9、P-gp过表达(P＜0.05);抑制CASC9表达后胃癌细胞中P-gp表达下调(P＜0.05);胃癌细胞抑制CASC9表达后细胞增殖转移能力明显减弱（P＜0.05）,凋亡增加（P＜0.05）,化疗耐药减弱（P＜0.05）;而过表达P-gp后恶性表型明显恢复（P＜0.05）。结论:CASC9可通过促进P-gp的表达调节GC细胞的增殖、凋亡和化疗耐药,参与GC的发生发展。     

胃癌淋巴结微转移的检测及其意义

目的　探讨胃癌淋巴结微转移的临床病理意义。方法　对 60例胃癌患者的 2 187枚淋巴结应用抗上皮细胞膜 (EMA)单克隆抗体进行免疫组织化学染色。结果　被检病例的 61 7% (3 7/ 60 ) ,淋巴结的 3 6% (79/ 2 187)存在淋巴结内癌的微转移。微转移与肿瘤分化程度、浸润深度密切相关 (P <0 0 5)。微转移阳性组的 5年生存率(2 8 6% )明显低于阴性组 (79 8% ) (P <0 0 5)。结论　淋巴结微转移参与了胃癌的发展过程 ,并与胃癌的部分生物学行为有关 ,可作为预测肿瘤转移和评估患者预后的指标     

大肠癌中Dicer与miRNA-155表达及临床意义

目的探讨Dicer与miR-155的表达在大肠癌发生发展中的临床意义。方法采用免疫组化法及实时荧光定量PCR法,分别检测大肠癌中Dicer与miR-155的表达,并分析二者的相关性,以及二者与大肠癌患者临床参数的相关性。结果与癌旁组织比较,大肠癌组织中,Dicer蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与健康体检者比较,大肠癌患者miR-155表达水平显著增高(P<0.01)。与Dicer高表达患者比较,Dicer低表达患者外周血中miR-155表达水平显著增高(P<0.01)。与浸润深度及浆膜内者比较,浸润及浆膜外者Dicer表达水平显著降低(P<0.05),miR-155表达水平显著升高(P<0.01)。与Dukes分期A、B期比较,Dukes分期C、D期患者Dicer表达水平显著降低(P<0.05),miR-155表达水平显著升高(P<0.05)。结论大肠癌中存在Dicer表达降低以及miR-155表达增高,二者显著相关,且与大肠癌浸润和病程进展相关。     

siRNA介导S100A4基因沉默对胃癌细胞中MMP-2和E-cadherin表达及细胞侵袭能力的影响

目的观察用RNA干扰技术沉默人胃癌细胞株MGC-803中钙结合蛋白S100A4的基因,对基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和E-钙黏素(E-cadherin)表达变化,探讨S100A4对胃癌细胞侵袭能力的影响及作用机制。方法采用RNA干扰技术将针对S100A4和非特异性阴性对照序列的si RNA转染至人胃癌MGC-803细胞,利用荧光实时定量RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测S100A4基因和蛋白的表达,筛选S100A4基因沉默组和阴性对照组细胞。采用Western Blot方法检测MMP-2和E-cadherin蛋白表达。利用Transwell Matrigel方法检测各实验组中MGC-803细胞体外侵袭能力。结果成功建立S100A4基因沉默的人胃癌MGC-803细胞。S100A4基因沉默的胃癌MGC-803细胞中MMP-2蛋白表达降低,而E-cadherin蛋白表达明显上调;细胞体外侵袭能力亦显著下降。结论 S100A4能通过调控MMP-2和E-cadherin的表达影响胃癌细胞MGC-803的侵袭能力。     

超声监测并卡前列甲酯在高危人工流产术中的应用

目的:评价应用超声监测并卡前列甲酯在高危人工流产手术中手术时间,出血量及人工流产并发症子宫穿孔,月经量减少等方面是否低于传统高危人工流产手术。方法:回顾性分析早孕合并有高危因素的患者15 399例,术前30 min均肛塞卡孕栓0.5 mg。在超声引导下手术12 398例(观察组),传统人工流产术3 001例(对照组),观察上述两组患者在手术时间,术中出血量,人工流产并发症:人流不全、漏吸、子宫穿孔、月经量减少、宫颈粘连等指标上的差异。结果:观察组手术时间(4.1±0.5)min和术中出血量(15.2±5.3)ml,均低于对照组手术时间(6.8±1.0)min和术中出血量(20.4±6.8)ml,两组相比差异具有统计学意义。观察组并发症发生率1.13‰,明显低于对照组5.66‰,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论:超声引导并卡前列甲酯可以降低人工流产手术的手术时间及术中出血量,减少高危人工流产手术并发症的发生,如不全流产、漏吸、子宫穿孔、宫腔粘连、宫颈粘连等。超声引导并卡前列甲酯在高危人工流产术中的应用值得推广。     

武汉市肺炎链球菌耐药分析及多位点序列分型

目的 对武汉市分离自12 ～18月龄健康婴幼儿鼻咽部的75株肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn),进行耐药检测及多位点序列分型(muhilocus sequence typing,MLST),了解该市Spn耐药菌株遗传背景.方法 用E-test方法检测菌株对8种抗菌药物的耐药情况,并对多重耐药株进行MLST分型.结果 左氧氟沙星(LVX)、莫西沙星(MFx)、头孢曲松(CRO)、青霉素(PEN)及阿莫西林/克拉维酸(AMX)对该组Spn细菌有良好的体外活性,敏感率分别为100.00％,100.00％,88.00％,92.00％,89.30％.此组Spn对阿奇霉素(AZM)和红霉素(ERY)的耐药率很高,分别为90.67％,90.67％.对头孢呋辛(CXM)的耐药率为24.00％.75菌株中24株为多重耐药,以CXM/AZM/ERY多重耐药模式为主.MLST分型表明,ST3173(6)、ST271 (4)、ST876(4)、ST3397(3)为多重耐药菌株常见型别.研究得到的12个ST型别中,有4个型别ST271 (4)、ST320(2)、ST90(1)、ST1661(1),共8菌株,属于国际流行耐药克隆株克隆株(Pneumococcal molecular Epidemiology Network,PMEN)Taiwan19F-14及Spain6B-2.多重耐药菌株中一株属于新的型别ST6318,与研究中其它ST型存在两个以上等位基因差别.结论 武汉市健康婴幼儿Spn分离株中,国际PMEN克隆株的传播对耐药性的增加发挥了重要作用.同时,抗性基因水平转移也促进了耐药性的改变.     

NF-κ B、XIAP、bcl-2在胃肠道间质瘤中的表达及其与临床病理行为的关系

目的 探讨胃肠道间质瘤(GIST)中NF-κ B、XIAP、bcl_2的表达及其与临床病理行为的关系.方法 应用RT-PCR方法检测93例GIST标本及癌旁正常组织对照组中NF-κB、XIAP、bel-2 mRNA水平.结果 NF-κ B、XIAP、bcl-2 mRNA在GIST组织与对照组相比呈现高表达,三者之间正相关.NF-κB、XIAP mRNA表达的变化与NIH分级、肿瘤侵袭转移、粘膜受侵密切相关(P<0.05),但bcl-2 mRNA表达无关(P>0.05).结论 NF-κ B、XIAP、bel-2 mRNA在GIST高表达.