纳米金阻断VEGF165信号传导并抑制裸鼠肝癌血管生成

目的:探讨纳米金如何阻断VEGF165的信号传导,抑制裸鼠移植肝癌血管生成.方法:无血清培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC),加入血管内皮生长因子165(VEGF165),再加入不同浓度纳米金,作用5min,采用Western blot方法测定磷酸化PLC-γ1蛋白.6周龄Balb/c裸鼠20只,从裸鼠右腋皮下注入H22细胞.第5天,肿瘤形成约8mm大小,随机分为两组:实验组从肿瘤周围及瘤内注入纳米金,每天1次,连续8天;对照组用生理盐水处理.处死裸鼠时测量肿瘤体积及重量,免疫组化染色并计算肿瘤组织微血管密度.结果:VEGF165浓度不变(10μg/L),随着纳米金溶液浓度的增加(125、250、500nmol/L),纳米金抑制PLC-γ1磷酸化越来越明显.肝癌组织内微血管密度分别为,实验组14.27±1.08,对照组23.52±1.36,说明纳米金明显抑制了肝癌血管生成(P＜0.01).结论:纳米金阻断VEGF165的信号传导,明显抑制裸鼠肝癌血管生成.     

纳米金抑制血管内皮细胞增殖的分子机制

目的 观察纳米金能否抑制血管内皮细胞增殖,以及作用的分子机制.方法 在96孔板内,无血清培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)24 h,分别加入预先孵育过夜的纳米金(1000 nmol/L)+血管内皮生长因子(VEGF)165(10μg/L)、VEGF165各100μl,噻唑蓝(MTT)比色法观察纳米金对HUVEC增殖的影响.取3种浓度(250、500、1000 nmol/L)纳米金各0.5 ml,分别与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF,10 mg/L)0.5 ml,4℃孵育24 h;再加入过饱和浓度的肝素-琼脂糖凝胶,离心后用bFGF抗体检测上清液和沉淀物中bFGF含量变化.无血清培养HUVEC 5孔,每孔加入VEGF165(10μg/L)100μl;再加入不同浓度纳米金(125、250、500 nmol/L),100μl,作用5 min,用Western blot方法测定磷酸化PLC-γ1蛋白.用AFM(原子力显微镜)表征纳米金与VEGF165作用后粒径大小.结果 纳米金+VEGF165组与VEGF165组的增殖倍数分别为1.75和4.25,表明纳米金抑制HUVEC的增殖(t=14.421,P<0.01).纳米金能够与具有肝素结合位点的bFGF结合.VEGF165浓度不变(10μg/L),随着纳米金溶液浓度的增加,从125、250到500 nmol/L,纳米金抑制PLC-γ1磷酸化越来越明显.AFM观察到纳米金与VEGF165作用后,粒径普遍大于30 nm.结论 纳米金与具有肝素结合位点的VEGF165结合,抑制了VEGF165的信号传导,从而抑制血管内皮细胞增殖.     

Survivin和COX-2在皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌组织中的表达及相关性

目的了解皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌中Survivin和COX-2的表达情况及两者的关系。方法采用免疫组化法检测10例正常对照组、23例基底细胞癌、18例鳞状细胞癌组织中Survivin和COX-2的表达情况。结果 Survivin蛋白在正常组织中不表达,基底细胞癌和鳞状细胞癌中Survivin蛋白的表达率分别为60.87%和66.67%。COX-2在正常组织中的表达率为10%,基底细胞癌和鳞状细胞癌中COX-2的表达率分别为65.22%和66.67%,且明显高于其在正常组织中的表达率。Survivin的表达和COX-2的表达呈显著正相关(P0.05)。结论 Survivin蛋白和COX-2在皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌中高表达,两者呈正相关。     

CA125在子宫内膜样腺癌组织中的表达特征及意义

目的: 探讨CA125（cancer antigen 125,CA125）在子宫内膜样腺癌组织中的表达特征及临床应用价值。方法: 采用免疫组织化学SP法检测50例子宫内膜样腺癌、20例子宫内膜增生过长和20例正常子宫内膜组织中的CA125的表达。根据阳性细胞百分比和阳性反应强度得出免疫反应得分（immunoreactive score， IRS）。结果: 正常内膜及子宫内膜增生过长组织中，CA125主要表达在腺腔面和基底面，子宫内膜样腺癌组织中CA125主要表达在核周的胞质中，呈粗大的颗粒。子宫内膜癌组织中的CA 125 的阳性率为82％（41/50）高于正常子宫内膜（50％）及子宫内膜增生过长（55％）, 差异有显著性（P <0.05）。CA125 IRS与子宫内膜样腺癌病理分级相关。结论:免疫组化检测CA125有助于子宫内膜良、恶性病变的区分，并对预后评估有一定意义。     

图像分析系统在检测生后发育期小鼠肝细胞核多倍体化中的应用

目的　探讨发育期小鼠肝细胞核DNA倍体动态变化规律。方法　本文选取不同发育时期健康雄性小白鼠的肝细胞涂片 ,Feulgen染色 ,TIGER细胞图像分析仪测量单个完整肝细胞核的DNA含量与倍体 ,分析发育时期小鼠不同DNA倍体肝细胞核所占的比率。结果　不同鼠龄小鼠同一倍体的肝细胞核DNA含量大致相同 ;二、四、八、十六倍体的肝细胞核间的比值均接近 2、4、8,它们的CV <9% ;鼠龄 2 - 2 0天的小鼠以二倍体肝细胞核为主 ;35天小鼠具有四种不同DNA倍体的肝细胞核 ,各DNA倍体肝细胞核所占比例依次为 :4C >8C >2C >1 6C ;6 0天小鼠偶见三十二倍体肝细胞核。结论　小鼠肝细胞多倍体化出现的时间比已有实验结果更早、程度更强     

胎肺及肺癌花生凝集素受体的观察

应用生物素化花生凝集素(PNA)对胎肺及45例肺癌进行组织化学研究.结果显示:胎肺内支气管上皮顶部胞膜及胞质呈PNA阳性.肺鳞癌及肺腺癌PNA受体增多,且分布失去极性.本文提示PNA受体改变可作为内胚层肿瘤的标志之一,尤其对腺癌有相对特异性.PNA受体在胚胎及肺癌均表达可能提示PNA是一种癌胚抗原.     

胎肺中生存素和相关凋亡调控基因的表达及生物学意义

检测生存素(Survivin)和Caspase-3、Bax、p53在人胎肺发育过程的表达特征，探讨它们在胎肺发育中的意义。取16-35周人胎肺15例，中性福尔马林固定，石蜡包埋，5μm厚切片，常规HE染色；免疫组化SP法检测Survivin、Caspase-3、p53和Bax在胎肺中的表达特征。结果表明胎肺发育过程中，Survivin主要表达于远端支气管上皮和原始肺泡上皮，     

生理学课堂教学导入技巧例谈

所谓课堂导入，是指在课堂教学伊始的3～5分钟内，教师和学生所有教学活动。导入环节在课堂教学中虽时间不长，但却十分重要。俗话说，磨刀不误砍柴工，教学导入得好不好，是一堂课上得成功与否的关键。一段精巧的、紧密结合教学内容的课堂导入，能在短时间内有效地唤起学生潜在的好奇心和迫切的求知欲，使学生在轻松愉快的心里状态下，思维随着导入的展开，进入主题，渐入佳境，为教师讲授新课做充分的预热。笔者结合自己的教学实践，就生理学课堂导入技巧问题谈一谈个人的浅见，以促进交流。     

白细胞介素-12抑制裸鼠肝癌Ang-2和血管内皮生长因子表达及其意义

目的　探讨白细胞介素 12抑制裸鼠肝癌中血管生成素 2 (Ang 2 )和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达及其意义。方法　将小鼠白细胞介素 12基因转染小鼠肝癌H 2 2细胞后,接种到裸鼠肾包膜下,第11天取出肿瘤组织。通过逆转录 聚合酶链反应(RT PCR)观察实验组和对照组瘤组织中Ang 2和VEGF基因在mRNA水平上的差异。结果　实验组Ang 2和VEGF基因的PCR产物条带亮度均弱于对照组(P <0 .0 5 ) ,实验组Ang 2 (0 .7878±0 .14 71)和VEGF(0 .8867±0 .192 4)基因的PCR产物条带辉度比值低于载体对照组(1.0 3 19±0 .15 74、1.1744±0 .1189)和空白对照组(1.0 3 61±0 .15 3 6、1.1874±0 .175 2 ,P <0 .0 5 )。结论　IL 12抑制Ang 2和VEGF基因在裸鼠肝癌组织中的表达,从而抑制了裸鼠肝癌的血管生成