临床患者血浆中β- 内酰胺类药物＆抗体致输血无效及对供者红细胞亲和力的研究

目的 分析临床患者血浆中β- 内酰胺类药物＆抗体对供者红细胞的亲和力,探究药源性溶血性贫血及输血无效的临床特点。方法 选择2021 年11 月～ 2022 年4 月期间临床送检的4 例有β- 内酰胺类药物用药史的临床患者,检测ABO 与Rh 血型,直接抗球蛋白试验（direct antiglobulin test ,DAT）、不规则抗体鉴定（identification of irregularantibodies,IAT）与β- 内酰胺类药物抗体及效价,对DAT 阳性的患者红细胞进行酸放散并检测放散液中β- 内酰胺类药物抗体。选择ABO 和Rh 同型的供者红细胞与患者血浆在37℃无菌条件下体外致敏,监测β- 内酰胺类药物＆抗体在0 ,24,48 和72 h 与供者红细胞的亲和力,并观察加入补体后的溶血程度。结果 4 例患者血浆中均存在β- 内酰胺类药物抗体,停药前输血无效,停药后输血效果良好。患者1:A 型,RhCCDee,DAT 阳性（3+W）,IAT 阴性,血浆中存在头孢哌酮药物抗体（效价:1∶64）、阿莫西林药物抗体（效价:1∶16）,放散液中存在头孢哌酮药物抗体。患者2:A 型,RhCcDee,DAT 阳性（4+W）,IAT 阴性,血浆中存在头孢哌酮药物抗体（效价:1∶128）,放散液中存在头孢哌酮药物抗体。患者3:A 型,RhCcDee,DAT 阳性（4+）,IAT 阳性,鉴定为抗 E 抗体,血浆中存在阿莫西林药物抗体（效价:1∶16）、亚胺培南药物抗体（效价:1∶64）、头孢哌酮药物抗体（效价:1∶128）,放散液中存在亚胺培南、头孢哌酮药物抗体。患者4:A 型,RhCCDee ,DAT 阳性（1+）,IAT 阳性,鉴定为抗-E.c 抗体,血浆中存在阿莫西林药物抗体（效价:1∶32）,放散液中未检测到药物抗体。4 例患者血浆与供者红细胞体外致敏24 h 后DAT均为阳性,48 和72 h 内逐渐增强,加入补体后均可引起红细胞溶解。结论 头孢哌酮、阿莫西林和亚胺培南三种β-内酰胺类药物＆抗体可迅速结合到供者红细胞表面并随时间延长而增强,有补体存在的条件下可在24 ～ 72 h 内破坏供者红细胞引起溶血,导致输血无效。     

类孟买型的FUT1和FUT2等位基因突变的分析

目的分析类孟买型个体的FUT1和FUT2位点基因突变的分子生物学基础。方法采用PCR扩增产物直接测序法,对2例类孟买型个体的FUT1和FUT2位点的等位基因进行序列检测。结果1例类孟买型个体FUT1位点547～552位的3个重复连续的AG中缺失1个AG,使得氨基酸序列发生182框码移位;另1例FUT1位点880～882位3个重复连续的T中缺失2个T,使得氨基酸序列发生294框码移位,而2例类孟买型的FUT2位点均为正常野生型。结论FUT1位点的移码突变是导致H抗原缺乏,形成类孟买型的原因之一。     

中国汉族人群MN血型相关基因gypa分子多态性的研究

本研究探讨中国汉族人群MN血型相关基因gypa的多态性。随机选取中国汉族人群中无血缘关系的无偿献血者202人份,以血清学方法鉴定样本的MN血型表现型。根据GenBank的NG-007470基因参照序列设计gypa第2外显子引物,对202人份的DNA进行PCR扩增,同时对扩增产物进行直接测序。结果表明:所有样本的gypa第2外显子第1、56位碱基均发生了变异,其中MN表现型杂合子主要以1A>C、22T/C、34A/G、35T/G、56T>C的形式存在;MM表现型纯合子主要以1A>C、22C、34G、35T、56T>C的形式存在;NN表现型纯合子主要以1A>C、22T、34A、35G、56T>C的形式存在。结论:中国汉族人群MN血型相关基因的多态性主要由gypa第2外显子的第1、22、34、35、56共5个位点的多态性所决定,其中第1、56位为非功能性SNP位点。     

Duffy血型研究及临床应用新进展

Duffy血型是人类最重要的血型系统之一,Duffy血型不仅仅与输血安全及母婴血型不合引起的新生儿溶血病密切相关,Duffy抗原作为趋化因子还在人类疟疾疟原虫受体、炎症、肿瘤、移植排斥等方面发挥着重要作用。本文从Duffy抗原表达和基因结构、Duffy血型在人群中的分布、Duffy血型的检测方法、Duffy血型生物学功能及临床应用等方面,综述国内外关于Duffy血型研究与临床应用的现状及最新进展。     

MN血型基因分型应用于河源地区临床输血检测

目的 应用基因分型技术鉴定产生抗-M抗体的患者样本MN血型,协助解决MN血型相关的临床输血问题。方法 在血清学鉴定的基础上,采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)基因定型方法对14例产生抗-M抗体样本的MN血型进行基因分型,并与血清学结果比较; 选取M抗原阴性的血液与之进行交叉配血。结果 14例样本基因分型结果与血清学分型结果相符,其中11例为NN型,2例为MN型,1例为MM型。选取M抗原阴性的供血者血液与该14例患者血液配血均相合,患者输血后无输血反应,24 h内血红蛋白上升。结论 MN血型基因分型技术可作为血清学方法的补充,有利于临床输血相关疑难样本的检测。     

中国汉族人群A_2亚型分子遗传背景的研究

目的　研究中国汉族人群ABO血型系统A2 亚型的分子遗传背景。方法采用PCR SSP法ABO基因分型试剂盒进行ABO常规基因定型。血清学确定为A2 亚型、PCR SSP法基因定型为A2 0 1或A1 0 2基因的 2 0例样本 ,对其ABO基因的第 6、第 7外显子进行DNA直接测序。结果① 2 6 0个随机的个体 ,经PCR SSP方法ABO基因定型试剂盒检测 ,检出O1、B、A1 0 1 (A4 6 7c)和A1 0 2 /1 0 3(A4 6 7T) 4种等位基因 ,但未检出A2等位基因。②采用血清学方法从 2 4 5 2例A或AB型随机献血者中筛检出的 2 0例A2 亚型样本 ,经PCR SSP基因定型 ,仅 5例为A2 0 1O1或A2 0 1B ,而其余 1 5例为A1 0 2O1或A1 0 2B。经DNA直接测序 ,结果 5例证实为A2 1 ,1 3例为A2 4 ,1例为A1 2 ,1例不能确定 ;A2等位基因中除 1 0 6 1C缺失外 ,还存在 4 6 7C >T、1 0 0 9A >G等点突变。结论中国汉族人群A2基因呈现多样性并存在自身特点 ,各A2等位基因的频率及分布与其它人群的资料存在差异 ,中国汉族人群A 2亚型中以A2 4等位基因 (4 6 7T、1 0 0 9G)为主     

广西贵港地区人群 MN 血型等位基因多态性的调查研究

目的　探讨广西贵港地区人群 MN 血型等位基因的分布特点。方法　收集 2018 年 9 月～ 2019 年 6 月期间广西贵港地区随机人群 300 人份血样,采用血型血清学方法鉴定其 MN 表现型,同时提取血样中的 DNA,对 MN 血型相关基因 GYPA 的 exon-2 序列扩增后测序,分析广西贵港地区人群 MN 等位基因的多态性并与中国西安、新疆、贵州、广东等地区随机人群的 MN 血型基因频率作比较。结果　广西贵港地区人群的 MN 血型血清学定型与基因测序结果完全一致,300 例 MN 血型血清学鉴定中,MM 表型为 140 例,MN 表型为 121 例,NN 表型为 39 例;M 基因频率为 0.668,N 基因频率为 0.332。通过数据比较分析可知广西贵港地区人群基因各型的构成比与国内其他地区人群不同,MN 血型抗原在不同个体中存在明显的剂量效应。结论　广西贵港地区人群 MN 血型基因具有独特的多态性,了解这种多态性有助于广西贵港地区临床的安全输血,预防新生儿溶血性疾病,为广西贵港地区人类群体遗传学特征及分子生物学的研究奠定基础。     

异基因外周血造血干细胞移植后血型基因型与抗原的转变

目的 探讨异基因外周血造血干细胞移植(Allo—PBSCT)后患者ABO、Rh血型的转变在血液病移植治疗中的意义。方法 选择2例非血源关系的供、受者作为研究对象，采用基因分型与血清学方法检测移植前后ABO、Rh血型的表达，追踪移植后患者血型基因型与抗原的转变。结果 2例患者分别在移植后第7天与第10天检测到供者的A、Rh(c)基因，第7天与第15天不同程度地表达供者的ABO、Rh血型抗原。结论 观察ABO与Rh血型的转变可作为植入证明的检测方法之一，且直观、迅速。     

深圳地区1770例疑难交叉配血标本解决方案的回顾性研究

目的 总结并探讨深圳地区最近10年临床疑难交叉配血(标本)不合原因,为提高输血疗效提供解决方案.方法 收集2011年～2020年深圳地区医疗机构送本中心做疑难血型鉴定的1770例临床标本,分析其交叉配血不合的原因,确定患者血浆中意外抗体的类型,通过分类变量的统计学方法对抗体做总体率评估.以同型输血结合相容性相输的原则来...     

中国人副孟买型的FUT1和FUT2基因的分子遗传研究:一个新的FUT1等位基因的鉴定

目的在7例由血清学方法确定为副孟买表型的中国人个体中,进行了分子生物学分析。方法采用聚合酶链反应和DNA直接测序、克隆测序等方法,检测7例标本的FUT1和FUT2基因的核苷酸序列组成,并对一个新的非功能性FUT1等位基因进行家系调查。结果7例标本的FUT1基因型分别为h1h1(4例),h2h2(2例),h328hnew(1例),h1等位基因在547～552位缺失1个AG,使得氨基酸序列发生182框码移位;h2等位基因在880～882位缺失两个T,使得氨基酸序列发生294框码移位;h328等位基因(nt328G>A)导致110位丙氨酸(Ala)被苏氨酸(Thr)置换;除hnew以外,h1、h2、h328这3种等位基因以前都有报道,hnew以杂合子形式存在于标本7中,经克隆测序发现该新基因在nt360-400位缺失GGTATTCCGCAT-CACCCTGCCCGTGCTGGCCCC,共33个碱基,家系调查证明hnew来自其母亲。7例标本的FUT2基因型分别为,3例为正常野生型Se357Se357,3例标本为Se357Se357,385,1例标本为Se357,716Se357,716,已知Se357(nt357C>T)和Se716(nt716G>A)为功能性的FUT2等位基因,Se385(nt385A>T)为弱功能性的FUT2等位基因,7例副孟买表型个体至少带一个拷贝的功能性FUT2等位基因,与其分泌状态一致。结论发现一个新的非功能性FUT1等位基因,其在nt360-400位缺失33个碱基,引起氨基酸序列框码移位,不能编码有活性的H抗原转移酶。