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地塞米松诱导促进BMP-2基因转染的兔MSCs的成骨转化 总被引:1,自引:1,他引:0
目的: 研究地塞米松诱导对BMP-2基因修饰的rMSCs的增殖和分化表型的影响.方法: 将地塞米松诱导和未经诱导的兔MSCs分别转导BMP-2基因后,以RT-PCR和免疫组化方法检测转导后细胞BMP-2的表达;通过观察细胞生长及碱性磷酸酶活性和骨钙素含量的测定,分析地塞米松诱导对BMP-2基因修饰的rMSCs的增殖和分化表型的影响.结果: 转导后BMP-2基因在两组rMSCs中均有表达,定量分析显示诱导组细胞碱性磷酸酶活性(134.36±8.84) nkat/L较对照组(104.02±7.83) nkat/L明显增高;诱导组细胞骨钙素含量(14.68±0.73) μg/L较对照组(6.52±1.21) μg/L明显增高.结论: 转导前地塞米松诱导能够促进BMP-2基因修饰的rMSCs的增殖和成骨转化. 相似文献
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为了解脑脊液标本中细菌的分布及耐药情况及合理应用抗生素进行治疗,我室对1 080份脑脊液标本进行细菌培养,现报告如下: 相似文献
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吸烟对T,B淋巴细胞的影响 总被引:4,自引:1,他引:3
目的 探讨长期吸烟对免疫系统影响的机制。方法 分析于3mo和9mo对吸烟组及对照组大鼠行抗体形成细胞(AFC)试验和抗CD3抗体诱导的T细胞增殖试验以测定其体液和细胞免疫。结果 9mo后,吸烟组大鼠对绵羊红细胞的抗体形成细胞反应及抗CD3抗体诱导的增殖反应均较对照组显降低,而3mo时无显差异。结论 长期吸烟所引起的免疫抑制是与抗原刺激T细胞后,T细胞不能有效地活化、增殖和分化有关,T细胞自身的细胞免疫受到损伤,也使得它不能有效地辅助B细胞进行增殖及产生抗体,从而使体液免疫也变得无能。 相似文献
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背景:骨髓间质干细胞在地塞米松等骨诱导剂的作用下能够向成骨细胞分化;同时骨形成蛋白2在骨修复过程中促进细胞增殖分化和基质分泌,在体内外均可诱导骨形成,以上二者联合应用可能会产生一定的协同效应。
目的:分析体外经地塞米松诱导是否能增强骨形成蛋白2基因修饰的骨髓间质干细胞的成骨转化能力。
设计:随机化配对设计。
单位:解放军第四军医大学西京医院。
材料:实验于2004-02/2004-08在解放军第四军医大学全军骨肿瘤研究所完成。选用2月龄新西兰白兔20只,由解放军第四军医大学实验动物中心提供(许可证号:军动管字第2005C00117号)。室温、常湿,正常喂食。双侧取材,左侧肢体来源骨髓间质干细胞为地塞米松诱导组,右侧为对照组(未经诱导)。
方法:将地塞米松诱导组和对照组兔骨髓间质干细胞分别转导含有人骨形成蛋白2基因的复制缺陷重组腺病毒Ad-BMP-2后,以反转录-聚合酶链反应和免疫组化方法检测细胞中骨形成蛋白2的表达情况。观察骨髓间质干细胞的生长情况,并应用碱性磷酸酶检测试剂盒及骨钙素放免试剂盒测定Ad-BMP-2转导5 d后两组骨髓间质干细胞的碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。
主要观察指标:①骨髓间质干细胞中骨形成蛋白2的表达情况。②骨髓间质干细胞的形态学变化。③骨髓间质干细胞中碱性磷酸酶活性和骨钙素含量。
结果:①转导后骨形成蛋白2基因在地塞米松诱导组和对照组兔骨髓间质干细胞中均有表达。②骨髓间质干细胞经地塞米松成骨诱导后形态较不规则,呈三角形、多角形改变,较基础培养基培养细胞生长缓慢。基因转导后细胞形态无明显改变。③转基因5 d后,地塞米松诱导组骨髓间质干细胞培养上清中碱性磷酸酶活性高于对照组[(134.36±8.84,104.02±7.83) nkat/L(t =3.350 6,P < 0.01,n =20)];地塞米松诱导组骨髓间质干细胞骨钙素分泌量高于对照组[(14.68±0.73,6.52±1.21) μg/L(t =3.568 2,P < 0.01,n =20)]。
结论:转基因前的地塞米松诱导能够促进骨形成蛋白2基因修饰的骨髓间质干细胞增殖和成骨转化。 相似文献
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目的克隆SRG基因、原核表达并鉴定。方法从培养的人骨肉瘤细胞SOSP-9607中提取总RNA,经RT-PCR获得SRG基因。将该基因克隆到pGEM-T-Easy克隆载体中,测序、鉴定。将测序正确的SRG基因亚克隆到pET-28(a )表达载体中,构建SRG表达载体,IPTG诱导表达2h~6h,做SDS-PAGE分析,鉴定SRG蛋白的表达。结果DNA测序证明,获得了SRG基因,其序列与GenBank中报道序列完全一致。SDS-PAGE分析表明,SRG蛋白获得高效表达,其相对分子质量为22kDa,表达量约占菌体总蛋白的25%。结论SRG基因的克隆和表达均获得了成功,为进一步探讨SRG基因在骨肉瘤诊治中应用奠定了基础。 相似文献
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目的 :探讨长期吸烟对大鼠肺动脉压及一氧化氮合酶的影响。方法 :SD雄性大鼠 40只 ,随机分为吸烟组和对照组 ,吸烟组暴露于点燃之烟卷 ,每日 6 h,于 9个月时检测吸烟组及对照组大鼠的肺动脉平均压 (m PAP)、血清一氧化氮 (NO)、肺动脉结构型一氧化氮合酶 (c NOS)和诱导型一氧化氮合酶 (i NOS)。结果 :吸烟组大鼠 m PAP明显高于对照组 ,血清 NO浓度与对照组相比明显减低 ,吸烟组肺细小动脉 c NOS平均吸光度值较对照组明显降低 ,吸烟组大鼠肺细小动脉 i NOS的平均吸光度值较对照组明显增高。结论 :烟雾可致肺动脉高压的形成 ,抑制肺细小动脉 c NOS表达、促进肺细小动脉 i NOS表达可能为其重要作用机制之一。 相似文献
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目的 :观测毫米波与γ射线复合辐照后小鼠心、脑及肺脂质过氧化物 (L PO)、谷胱甘肽 (GSH)和超氧歧化酶(SOD)的变化。方法 :采用 6 0 Co-γ射线照射小鼠后 (全身照射 ,1次 ,剂量为 6 2 0 c Gy) ,复合毫米波局部照射小鼠背部皮肤 (频率为 36 .11GHz,功率密度为 10 m W· cm- 2 ,照射范围 2 cm× 2 cm ,每天 1次 ,每次 30 min,连续 5 d) ;于复合照后第 8天检测小鼠心、脑、肺组织中 L PO,SOD和 GSH的含量。结果 :1毫米波单照组小鼠脑、肺 L PO的含量较正常对照组明显增高 (P<0 .0 5 ) ;γ射线单照组和复合照射组各组织 L PO的含量与正常对照组相比均有增高的趋势。 2复合照射组和γ射线单照组心脏 GSH的含量均较正常对照组明显降低 (P<0 .0 1) ;毫米波单照组心脏GSH的含量也降低 ,与正常对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 3γ射线单照组肺 SOD的活性较正常对照组有降低趋势 ,复合照射组则较正常对照组有增高趋势 ,与正常对照组相比差异不显著。结论 :复合毫米波局部照射及毫米波单纯照射可引起小鼠远位脏器 L PO和 GSH水平的改变。 相似文献
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目的 了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的感染情况及对临床常用抗生素的耐药性,指导临床合理使用抗生素.方法 应用琼脂筛选法,纸片(K-B)法,美国德灵WalkAway40SI全自动细菌鉴定药敏仪器法三种方法进行MRSA检测,应用美国德灵WalkAway40S1全自动细茼鉴定药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏分析.结果 三种方法检测MRSA,以苯唑西林盐琼脂法为标准,纸片法,仪器法与其比较,204株金黄色葡萄球菌检出121株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),阳性率(59.31%)仪器法118株完全符合,符合率为97.52%(118/121),K-B法119株完全符合,符合率为98.34%(119/121).118株MRSA对万古霉素全部敏感,对青霉素、苯唑西林、氨苄青霉素、头孢唑林、亚胺硫霉素、阿莫西林/棒酸全部耐药.结论 万古霉素是有效控制MRSA感染的最佳抗生素,临床治疗葡萄球菌感染时应进行MRSA的检测,合理使用抗生素. 相似文献
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目的探讨影响检验科微生物检验质量的相关因素。方法选取自2016年1月至2018年1月丹东市中心医院检验科行微生物检验的1 050份标本报告为研究对象。统计分析微生物检验标本的误差率与致病菌检出率。结果 1 050份标本检验报告中,857份标本为致病菌,检出率为81. 6%,误差率为18. 4%。尿标本的检出率显著高于其他标本类型,差异有统计学意义(P <0. 05)。对193份误差标本进行相关因素分析,样品的接收和预处理占比高于其他影响因素。结论影响检验科微生物检验质量的相关因素主要有检验人员、仪器、设备、检验培养基、试剂、检验环境、采样、样品的接收和预处理、检验质量、校验的执行、参考菌株及其保存、实验室内外部质量控制、检验报告及结果质量控制。对各项因素采取相应的解决对策,能够提高微生物检验结果的准确性。 相似文献