GST/HIF-1α(融合蛋白表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

目的 构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和Not I酶切位点将HIF-1α全长及各个截短突变体定向插入pGEx-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并转化E.coli DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入E.coli BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 酶切及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-4T-2-HIF-1α及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST/HIF-1α全长及各个截短突变体融合蛋白的表达.结论 成功构建了HIF-1α原核表达载体及其截短突变体,并证实了融合蛋白的表达,为进一步纯化HIF-1α蛋白和研究HIF-1α的生物学功能奠定了基础.     

外伤性腹膜后十二指肠破裂的早期诊断

目的 探讨外伤性腹膜后十二指肠破裂的早期临床诊断技术.方法 回顾分析23例经手术证实闭合性腹膜后十二指肠破裂的临床资料.结果 入院后1 h经多层螺旋CT确诊15例,2h经磁共振成像确诊4例,4 h经纤维十二指肠镜检查确诊1例,术前漏诊3例.治愈21例,死亡2例.结论 掌握外伤性腹膜后十二指肠破裂的临床特点、及时进行合适的影像学检查,能提高外伤性腹膜后十二指肠破裂的早期诊断率.     

PAK4抑制剂作用模式的分子模拟研究

目的 分析PAK4 (p21-活化激酶4)与抑制剂的相互作用模式,指导PAK4抑制剂的开发。方法 基于PAK4的晶体结构及抑制剂的结构,利用分子对接和分子力场分析方法,探讨PAK4与抑制剂的相互作用模式。结果与结论 确定了PAK4与抑制剂的作用模式,可以指导抑制剂的设计,用于开发抗肿瘤药物。     

DDX5通过上皮-间质转化促进人乳腺癌细胞侵袭

目的 探究DEAD box RNA解旋酶-5(DEAD-box helicase 5, DDX5)蛋白对乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移作用的影响及其机制。方法 利用慢病毒感染法,构建过表达Flag-DDX5的人乳腺癌MCF-7稳转细胞系,划痕实验和Transwell实验检测DDX5蛋白过表达后对乳腺癌细胞迁移和侵袭的影响;Western blot实验检测上皮-间质转化(EMT)标志物上皮-钙黏蛋白(E-cadherin),纤维连接蛋白(Fibronectin),波形蛋白(Vimentin)的表达。结果 成功构建了稳定过表达DDX5的乳腺癌MCF-7稳转细胞系;DDX5蛋白过表达后,乳腺癌细胞迁移和侵袭能力明显增强,乳腺癌细胞E-cadherin的表达明显下调,Fibronectin与Vimentin的表达明显上调。结论 DDX5可能参与乳腺肿瘤细胞EMT过程,促进乳腺癌的恶性转移,进而影响乳腺癌的进程。     

DEAD盒RNA解旋酶17在乳腺癌细胞中的表达及定位

目的研究DEAD盒RNA解旋酶17 (DDX17)在人乳腺癌细胞和组织中的表达和定位。方法蛋白印迹法检测DDX17在人乳腺癌细胞系中蛋白的表达,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot检测DDX17在MCF-7乳腺癌细胞中的定位。结果 DDX17在人乳腺肿瘤细胞系中蛋白表达水平增高,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot观察发现DDX17主要定位于MCF-7细胞核中。结论 DDX17在人乳腺癌细胞系中高表达,主要定位于乳腺癌细胞核内,可能是人乳腺癌重要的调节因子。     

hLMO1编码基因重组质粒的构建及蛋白的表达和定位

目的 构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞---HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO1在HEK293细胞内的定位.结果 hLMO1基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为471 bp.Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为45 kDa.pEGFR-LMO1在人HEK293细胞核与细胞质均有表达.结论 成功构建了hLMO1基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO1蛋白定位于HEK293细胞的细胞质和细胞核内.     

力平脂治疗老年人高血脂症的疗效

力平脂治疗老年人高血脂症的疗效王春华，王文丽，赵学杰，李丰，陈朝蓬，孙天玉（中国人民解放军第１５３中心医院郑州４５００６５）力平脂（ｌｉｐａｎｔｈｙ，１００ｍｇ胶囊剂）是法国科尼大药厂生产的一种新型降脂药物，属苯乙酸类降脂药物。国内外应用效果良好。现...     

包膜外剥离法切除肝海绵状血管瘤一例

包膜外剥离法切除肝海绵状血管瘤一例刘树清，刘传启，李丰（河南周口地区人民医院普外科４６６０００）患者女性，５１岁。以上腹不适、纳差、腹胀半年为主诉入院。体检腹部未扪及包块，肝体积略大，右肋下２ｃｍ。Ｂ超肝右后叶可见约７×７ｃｍ大小强光团，边界清晰，形...     

社区综合干预对婴儿期外周性脑积水致运动发育迟缓康复作用研究

目的探讨社区综合干预对婴儿期外周性脑积水致运动发育迟缓的康复效果。方法将100例运动发育迟缓患儿,随机分为观察组和对照组,各50例。对照组给予药物治疗和物理治疗。观察组在对症治疗的基础上给予社区综合干预。并对两组干预前后Gesell评分、精细运动发育指数(PDI)评分及康复效果进行比较。结果两组随访1年后Gesell评分、PDI评分优于随访前,观察组改善情况优于对照组,有显著性差异(P0.05)。观察组总有效率为100%,对照组为88%,观察组高于对照组,有显著性差异(P0.05)。结论社区综合干预可以显著改善婴儿期外周性脑积水致运动发育迟缓疾病,促进了患儿康复。     

前置胎盘期待疗法患者的护理干预及临床效果观察

目的:探讨健康教育对前置胎盘期待疗法患者的影响,旨在改善妊娠结局。方法:选取2011年6月~2013年6月我院64例前置胎盘期待疗法孕产妇作为研究对象,将孕产妇随机等分为对照组和观察组。观察组进行有针对性的护理干预健康教育,对照组给予常规护理。采用问卷调查方式比较两组产妇和新生儿状况。结果:干预组产后出血量和产后感染率均低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。干预组新生儿的Apgar评分、体质量均高于对照组,而呼吸窘迫综合征的发生率低于对照组,两组比较差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:对前置胎盘期待疗法孕妇给予有效的针对性健康教育,能够提高产妇对疾病相关知识的知晓度,改善新生儿状况,降低新生儿呼吸窘迫综合征的发生。