新疆伊犁地区马群中博尔纳病病毒自然感染调查

目的 了解新疆伊犁地区马群中博尔纳病病毒(BDV)的流行状况,分析该病毒的种系来源.方法 采用改进的巢式反转录PCR(nRT-PCR)方法对新疆伊犁地区120匹马的外周血单个核细胞(PBMC)及脑组织中的BDV p24基因片段进行检测,对阳性产物进行基因序列测定和同源性分析.结果 有3匹马外周血和腩组织中同时检测到BDV,阳性率为2.5%(3/120).扩增产物序列与其他国外马源BDV分离株同源性>93%,与标准株He/80同源性达到98%以上.结论 新疆伊犁地区马群中存在BDV的自然感染.该地区BDV流行株与标准株He/80存在高度的同源性.     

博尔纳病病毒感染与精神行为异常

1885年,德国Borna镇大批马匹患了一种以精神行为异常为主的脑炎,当时,这些患病的马科动物又被称作“悲伤的马”,该疾病被命名为博尔纳病(Borna Disease,BD);随后,研究者们从病马脑组织分离出了病原体,并将该病毒命名为博尔纳病病毒。多年以来,由于地域的局限性以及典型的博尔纳     

姜黄素对Aβ诱导的AD大鼠海马CRMP-2表达的影响

目的探讨姜黄素对Aβ诱导的老年痴呆大鼠认知功能和海马CRMP-2的影响。方法将SD大鼠随机分为空白对照组、AD对照组和姜黄素给药组。Aβ1-40微量注射至大鼠右侧海马制作AD大鼠模型。Morris水迷宫试验测定大鼠学习记忆能力。RT-PCR检测海马内CRMP-2mRNA的表达,Western blotting方法检测海马内CRMP-2和p-CRMP-2蛋白表达,免疫组织化学方法检测海马内轴突蛋白表达。结果姜黄素干预后AD大鼠空间学习记忆能力明显改善(P<0.05)。与空白对照组相比,AD对照组大鼠海马区CRMP-2表达显著降低(P<0.05),轴突蛋白NFP-200阳性纤维排列紊乱,不规则,纤维数目显著减少(P<0.05);而在姜黄素组大鼠海马区可见CRMP-2表达升高,p-CRMP-2表达降低,而轴突蛋白表达明显增加(P<0.01)。结论姜黄素能够改善Aβ1-40诱导的AD模型大鼠空间学习记忆障碍,其机制可能与姜黄素提高CRMP-2的表达并抑制CRMP-2的磷酸化从而促进轴突再生有关。     

乌司他丁对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性和MMP-9活性的影响

目的 观察乌司他丁对大鼠局灶脑缺血再灌注损伤后血脑屏障(BBB)通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)活性的影响.方法 采用栓线法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,腹腔注射乌司他丁,于脑缺血再灌注后6h、24h、48h、72h处死大鼠.通过测定损伤侧脑组织中伊文思蓝(EB)含鼍来观察BBB通透性的改变,用明胶酶谱法检测同侧脑部MMP-9活性变化.结果 脑缺血再灌注损伤后,大鼠EB含量增加,24h最明显;MMP-9活性明显升高,48h达高峰.乌司他丁处理组EB含量及MMP-9活性水平明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05).结论 乌司他丁可抑制脑缺血再灌注后大鼠MMP-9的活性,减轻BBB通透性的破坏.     

新生大鼠全大脑组织分离诱导分化神经干细胞的体外实验

背景：神经干细胞的供体一股以胎鼠和成年鼠为主，利用细胞培养技术分离步骤较繁琐。目的：以新生大鼠为神经干细胞供体，拟建立一种较为简便、细胞获得率较高的分离培养方法。设计、时间及地点：以细胞为对象观察性实验，于2006—10／2007—03在重庆医科大学完成。材料：新生1～3d的Wistar大鼠全大脑。方法：以胰蛋白酶消化、无血清、悬浮培养原代细胞，并加含体积分数为0．10胎牛血清的DMEM／F12培养液诱导其分化。主要观察指标：应用相差显微镜观察神经干细胞的生长特点及分化后的细胞形态学变化。应用间接免疫细胞化学染色法鉴定神经千细胞及其分化后神经元和胶质细胞标志蛋白的表达。以BrdU标记神经干细胞，观察其增殖情况。结果：新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续传代和增殖的能力，能稳定表达神经干细胞特异性巢蛋白。诱导分化后的细胞能表达神经元细胞、旱形胶质细胞、少突胶质细胞的特异性蛋白。结论：从新生大鼠脑组织分离培养出的神经干细胞获得率高，保持了干细胞的未分化属性，具有自我更新和多项分化潜能。     

Rho激酶抑制剂对大鼠脑缺血再灌注后核转录因子和新型趋化因子表达的影响

目的 探讨Rho激酶抑制剂法舒地尔对大鼠脑缺血再灌注损伤后的保护作用及可能机制.方法 健康成年雄性SD大鼠90只,随机分为3组:假手术组、模型组、法舒地尔组,每组30只,每组再按照再灌注时间不同分为6、1 2、24 h3个时间点,每个时间点10只,线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型.术后对大鼠进行神经功能评分,RT-PCR检测缺血侧脑组织中新型趋化因子mRNA、NF-κB p65 mRNA表达.结果 与假手术组比较,模型组和法舒地尔组大鼠脑缺血再灌注6、12、24 h NF-κB p65 mRNA、新型趋化因子mRNA表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);与模型组比较,法舒地尔组大鼠脑缺血再灌注6、12、24 h神经功能缺损评分明显降低,12、24 h NF-κB p65 mRNA、新型趋化因子mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 法舒地尔的脑保护作用可能与其减轻大鼠脑缺血再灌注损伤后的炎性反应有关.     

尿酸对急性缺血性卒中患者血管再通和梗死体积的影响

目的 探讨急性缺血性卒中患者尿酸（UA）浓度的变化对血管再通和梗死体积的影响.方法 对176例发病24 h内患者应用弥散加权磁共振（DWI）检查,证实为前循环急性缺血性卒中.经改良的NIH卒中（mNIHSS）评分5分以上,随访观察尿酸、尿囊素（尿酸的非酶代谢产物）浓度的变化对血管再通和梗死体积的影响.结果 66例血管再通病人多数接受溶栓治疗,UA浓度在48 h降低,然后逐渐升高呈U行改变,14 d时mNIHSS评分降低,UA和尿囊素浓度变化与DWI梗死体积明显相关.结论 UA是急性缺血性卒中的一种消耗和再生性抗氧化剂,其浓度变化与血管再通和梗死体积有关.     

西尼罗病毒感染的抗体检测方法研究进展

病毒核酸编码3种结构蛋白和7种非结构蛋     

重庆地区动物携带Nipah病毒和Hendra病毒的检测

目的 本研究拟建立一步法实时RT-PCR检测Nipah病毒(Nipah virus,NiV)和Hen-dra病毒(Hendra virus,HeV)的方法 ,对采集自中国重庆地区动物外周血样本进行NiV和HeV检测,以获得我国重庆地区的NiV和HeV的病毒流行病学资料.方法 2007年6月起至2008年6月,采集自重庆地区饲养的猪外周血标本580份、奶牛外周血标本250份、山羊外周血标本180份,密度梯度离心法分离外周血淋巴细胞,Trizol法提取细胞总RNA.用已建立的NiV和HeV一步法实时RT-PCR检测方法 ,对RNA样本进行NiV和HeV检测.对阳性样本进行PCR产物序列鉴定及序列分析等研究,在可能的情况下进行病毒分离培养,并提交流行病学调查报告.结果 对采集自中国重庆地区饲养的3种动物的样本进行NiV和HeV核酸检测,成功进行了一步法实时RT-PCR反应,所有样本荧光扩增曲线均无Takeoff点,曲线平坦,判为阴性结果 .结论 初步流行病学研究提示我国重庆地区饲养的动物猪、牛、羊中NiV和HeV未发现阳性.