红花转录因子CtMYB1基因的克隆及原核表达

目的 从红花Carthamus tinctorius 花瓣中克隆转录因子基因CtMYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建。方法 根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣中扩增得到CtMYB1基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;以CtMYB1基因的全长cDNA序列为模板,PCR扩增得到CtMYB1基因的开放阅读框(ORF)序列,构建原核表达载体pEASY-E1-CtMYB1。转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果 成功从红花中克隆1个MYB基因,命名为CtMYB1,GenBank登录号为KJ524853。CtMYB1基因全长893 bp,ORF为750 bp,编码249个氨基酸。同时,成功构建了该基因的原核表达载体。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约30 000,与预测的蛋白相对分子质量一致。结论 成功克隆了CtMYB1基因,构建了原核表达载体,初步证明该基因在大肠杆菌中成功表达。     

当飞利肝宁胶囊治疗慢性乙肝合并非酒精性脂肪肝临床观察

目的:观察当飞利肝宁胶囊治疗慢性乙肝合并非酒精性脂肪肝的临床疗效。方法:将60例慢性乙肝合并非酒精性脂肪肝患者,随机分为治疗组和对照组,各30例,在基础治疗的同时,治疗组服用当飞利肝宁胶囊;对照组服用天晴甘平肠溶胶囊。观察治疗前后2组患者的临床症状与体征,检测谷丙转氨酶(ALT),甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)。腹部CT检查:所有患者于治疗前后分别行上腹部CT平扫,计算肝/脾CT比值。结果:总有效率治疗组90.0%,对照组73.3%,2组有效率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。2组治疗前后ALT、TG、TC、肝/脾CT比值比较,差异均有统计学意义(P<0.01),治疗后各项指标治疗组与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:当飞利肝宁胶囊治疗慢性乙肝合并非酒精性脂肪肝有较好的临床疗效。     

玄参子芽分级标准研究

对全国玄参主产区子芽的长、粗和重3个形态指标进行检测,使用SPSS统计软件,通过聚类分析制定玄参子芽的质量分级标准。田间试验观测不同等级子芽玄参的植株生长情况及产量。田间试验表明,Ⅰ级玄参长势最好,产量最高,Ⅲ级玄参长势最差,产量最低。玄参药材中主要活性成分含量测定结果表明不同等级的子芽对药材的内在品质无明显影响。为保证高产及减少成本,玄参生产用子芽应控制在Ⅱ级以上。此方法制定的质量分级标准科学、可行,可作为玄参子芽的质量控制标准,为玄参规范化栽培提供依据。     

大血藤对破骨细胞活性及成骨细胞增殖分化作用的研究

该研究采用1α, 25-(OH)₂VitD₃诱导兔骨髓细胞法获得破骨细胞,以形态学观察、HE染色、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色和骨吸收陷窝甲苯胺蓝染色来鉴定破骨细胞,用TRAP⁺细胞计数、TRAP活力测定和骨吸收陷窝的数量及面积来检测大血藤对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响。培养MC3T3-E1Subclone 14(小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14)细胞,用MTT法、碱性磷酸酶活力测定检测大血藤对其增殖和分化的影响。结果表明大血藤醇提物和水煎物低、中、高剂量组(2,20,200 mg·L^-1)对破骨细胞分化及骨吸收功能具有抑制作用,并具有剂量依赖性。大血藤醇提物和水煎物低、中剂量组具有促进MC3T3-E1Subclone 14细胞增殖分化的作用,说明大血藤对骨质疏松有一定的防治作用,这种作用可能是通过抑制破骨细胞活性和促进成骨细胞增殖分化来实现的。     

红花黄酮醇合酶基因的全长cDNA克隆及植物表达载体的构建

黄酮醇合酶(flavonol synthase,FLS)是黄酮化合物代谢途径中的关键酶之一。本文在红花转录组测序结果中获得中间序列的基础上,采用RT-PCR和RACE技术,从我国传统中药材红花花瓣中克隆到黄酮醇合酶基因的全长c DNA。该基因全长1 201 bp,开放阅读框1 011 bp,编码336个氨基酸。系统进化分析表明,红花FLS基因编码氨基酸与同属菊科植物氨基酸具有一定的同源性,其中与金光菊的亲缘关系最近。通过分子生物学方法,成功构建p BASTA-FLS植物表达载体。为后续研究该基因的生物功能及黄酮化合物合成机制奠定了基础。     

玉液汤对2型糖尿病肾病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察玉液汤对2型糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用。方法:雄性大鼠除空白组外,其余大鼠给予高脂高糖饲料50天后,腹腔注射STZ 30mg/kg建立DN大鼠模型,造模成功后,随机分为模型组、盐酸二甲双胍组(0.15g/kg)、玉液汤组(5.75g/kg、11.5g/kg),给药1个月,每周测体重一次,第31d称量大鼠体重,检测大鼠空腹血糖、肌酐(CRE)和尿素氮(BUN)水平,取右肾做病理切片进行HE染色,观察大鼠肾组织病理学变化。结果:给药后第21d、28d、31d,玉液汤组(5.75g/kg、11.5g/kg)可显著性增加大鼠的体重、显著性降低大鼠空腹血糖和血清CRE水平;玉液汤组(11.5g/kg)显著性降低血清BUN水平;HE染色玉液汤组与模型组比较,肾脏组织形态有显著性差异。结论:玉液汤可增加2型糖尿病肾病模型大鼠的体重,降低空腹血糖、血清CRE和BUN水平,改善模型大鼠肾脏病理损伤,对DN大鼠模型的肾脏有保护作用。     

营养治疗在血液透析中应用

16例尿毒症血透患者分成三组。第一组6例常规维持血透,自由进食;第二组5例低蛋白饮食,蛋白量为0.6g·kg~(-1)/a,第三组5例极低蛋白饮食,蛋白量为0.3～0.4g·kg~(-1)/d,供给必需氨基酸或酮酸。二、三组每周血透1次,所有患者均观察6个月。结果示三组患者营养状态相似,氮平衡、总体氮流量、蛋白合成速度均有改善,二和三组患者血磷明显降低,血钙明显升高,其Ccr下降率明显慢于一组,提示血透联合低蛋白饮食或(和)加必需氨基酸可以减少血透次数,能保护残存肾单位功能。     

骨髓细胞涂片会诊中存在的问题及影响因素

目的探讨骨髓细胞形态学检验及其会诊中存在的相关问题及影响因素。方法对2013年来该院进行会诊的165例骨髓细胞涂片进行细胞形态学检验,同时对检验中存在的问题进行总结和分析。结果会诊骨髓细胞涂片中,大部分涂片的患者临床信息不完整(57.58%)或缺失(29.70%);部分骨髓细胞涂片未染色(18.79%),经染色后部分涂片细胞形态无法观察(5.46%),被退回;部分骨髓细胞涂片取材稀释(5.12%)或制片不好(9.62%)。会诊骨髓细胞涂片中,病种复杂,以白血病(30.40%)及恶性肿瘤(20.95%)为主,也存在一些罕见病种。结论患者临床信息完整性对骨髓细胞涂片的会诊结论有一定的影响。     

黄褐斑针刺治疗特点

黄褐斑是常见于中青年女性的面部损容性皮肤病,中医学认为此病的发生多与肝郁、气滞、肾虚、血瘀有关。针刺治疗黄褐斑疗效显著,应用广泛,针刺手段多样,方法灵活,研究分析近年来针刺治疗黄褐斑的文献报道发现如下特点：不同针刺部位的结合;不同针刺方法的应用;局部取穴与辨证取穴结合;外治与内治结合。各种手段综合运用,不仅丰富了针刺治疗黄褐斑的临床实践经验,而且为黄褐斑的治疗提供了多技术支持和广阔的思路。     

附子不同炮制品灌胃Beagle犬的急性毒性研究

目的：探讨附子不同炮制品灌胃Beagle犬的急性毒性。方法：取健康、合格Beagle犬16只,按体质量随机分为空白组、刨附片组、炮天雄组和黑顺片组。以4 g生药/kg灌胃给药,实验前及给药后1 h、24 h和第3、7、14天测定体质量、耗食量、肛温、心电图及血常规、血生化。结果：3个实验组Beagle犬在给药后均精神萎靡,血液电解质有显著性差异,其中黑顺片组最明显;刨附片组犬的红细胞、血糖和甘油三酯有显著性差异;炮天雄组犬的淋巴细胞和血糖有显著性差异,而黑顺片给药后犬的淋巴细胞显著降低。结论：3个炮制品毒性大小依次为黑顺片>刨附片>炮天雄。