香烟烟对血管内皮表达细胞间粘附分子-1的影响

目的探讨香烟烟对人血管内皮表达细胞间粘附分子-1的影响。方法以香烟烟为抗原刺激巨噬细胞株细胞,再用其上清液刺激人脐带静脉内皮细胞。采用ELISA法分别测定了经抗原刺激后3h、6h、12h、24h的巨噬细胞上清液中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α);采用同样方法分析用抗原刺激巨噬细胞株细胞的上清处理血管内皮细胞3h、6h、9h、12h、24h培养基中可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)。结果随着处理时间的延长,TNF-α的表达量增多,实验组(4.967±0.802)pg/ml较对照组(3.181±0.214)pg/ml含量明显增加。统计结果提示,随孵育时间延长,sICAM-1表达的量增加,并且观察组(均数为0.0684ng/ml)比对照组(均数0.0459ng/ml)增加49%。结论香烟烟可以刺激人体最主要的抗原递呈细胞-巨噬细胞表达TNF-α,进一步使血管内皮细胞表达ICAM-1增加。     

下丘脑室旁核CRH神经元激活在慢性充血性心力衰竭中的交感兴奋作用

目的:观察慢性心衰时下丘脑室旁核(PVN)内促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)表达变化及其与交感神经活动之间的关系。方法:健康雄性SD大鼠,冠脉结扎制备心衰模型,侧脑室插管渗透压泵持续给药。假手术组和心衰组给予人工脑脊液0.25μL/h,心衰给药组给予CRH抑制剂αh-CRH 15 mg/h。同时,选取健康雄性体内CRH合成不足的Lewis大鼠与同源纯种Fischer 344大鼠分别制备心衰模型和假手术对照进行对比研究。4周后,测定左室舒张末压(LVEDP)、左室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、右心室/体重比(RV/BW)、肺/体重比(lung/BW)、肾交感神经放电活动(RSNA)、血浆去甲肾上腺素(NE)浓度和PVN内CRH阳性神经元数目。血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)含量。结果:与假手术组相比,SD心衰大鼠PVN内CRH阳性神经元数目明显增加,血浆ACTH浓度升高,RSNA增强,血浆NE浓度增加,LVEDP、lung/BW和RV/BW增加,±dp/dtmax降低;心衰模型后给予αh-CRH可明显逆转上述各种变化(P0.05)。Fisher 344大鼠心衰组和假手术对照相比,PVN内CRH阳性神经元数目明显增加,血浆ACTH浓度升高,RSNA增强,外周血NE浓度升高,LVEDP、RV/BW和lung/BW增加,±dp/dtmax下降(P0.05)。但Lewis大鼠心衰组和假手术对照相比,以上各指标改变均不明显。结论:慢性心衰时,下丘脑室旁核CRH神经元被激活,激活的CRH神经元可增强外周交感神经活动,加重心功能恶化。     

染料木黄酮抑制多柔比星诱导的多药耐药膀胱肿瘤T24细胞增殖的实验研究

 【摘要】　目的　建立膀胱肿瘤T24细胞多药耐药（MDR）模型并鉴定其耐药特性,观察染料木黄酮对多柔比星（ADM）诱导的多药耐药T24（T24／ADM）细胞增殖的影响。方法　体外培养膀胱肿瘤T24细胞,采用ADM浓度梯度诱导,培养出具有稳定MDR表型的T24／ADM耐药细胞株,光镜观察新建细胞株的形态学特点,MTT法检测多种药物对耐药细胞株的增殖活性以及染料木黄酮对T24／ADM细胞增殖的有效作用浓度。结果　用ADM诱导6个月后的T24／ADM细胞形态无明显改变;T24／ADM细胞对多种化疗药物的耐受能力均明显提高,与亲本细胞株T24相比,耐药细胞株T24／ADM对ADM的耐药指数达15.79,对5-氟尿嘧啶、顺铂、环磷酰胺的耐药指数依次为4.68、3.81、5.53。用染料木黄酮作用于T24／ADM细胞后,对T24／ADM细胞的半数抑制浓度为40 μg／ml,质量浓度为20～100 μg／ml的染料木黄酮具有抑制T24／ADM细胞增殖的作用。结论　建立的T24／ADM细胞具有多药耐药性,达到实验要求。质量浓度为20～100 μg／ml的染料木黄酮可部分抑制人类膀胱肿瘤T24／ADM细胞的增殖。     

体外培养子宫腺肌病在位内膜腺上皮细胞中HPA和metastin的表达及米非司酮对其表达的影响和意义

子宫腺肌病即子宫内膜侵入肌层达1个高倍视野以上,病理诊断子宫内膜基底层下≥3mm处出现子宫内膜腺体和间质。其病因和发病机制不清,可能与机械因素、内分泌因素、细胞凋亡、免疫因素等有关。随着研究的进展,多数学者认为子宫腺肌病的发生与子宫内膜的腺体和基质具有侵袭性有关。     

白细胞介素-7受体α联合细菌鞭毛蛋白对异基因骨髓移植小鼠急性移植物抗宿主病作用的初步探讨

目的 分析白细胞介素（IL）-7受体α（IL-7Rα）、细菌鞭毛蛋白单用及联合作用于小鼠异基因骨髓移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）模型的疗效,探讨其可能机制.方法 以BALB/C（H-2d）雌性小鼠为受鼠,均接受9 Gy 60Co全身照射,取C57BL/6（H-2b）供鼠骨髓细胞1×107个和脾细胞2×107个经尾静脉输注给受鼠.将受鼠分为单纯照射移植组（A组）、IL-7Rα干预组（B组）、细菌鞭毛蛋白干预组（C组）、IL-7Rα联合细菌鞭毛蛋白干预组（D组）,每组6只,观察受鼠的症状、体征、生存时间及造血功能恢复情况.结果 A组小鼠生存期为（22.5±2.30）d,30d生存率为50.0％（3/6）, 、且出现明显的倦怠、食欲缺乏、脱毛、弓背等aGVHD表现;B组小鼠生存期为（25.83±3.49）d,30 d生存率为33.3％（2/6）,aGVHD表现较A组轻;C组小鼠生存期为（26.33±3.52）d,30 d生存率为33.3％（2/6）,亦出现aGVHD表现,程度同B组;D组小鼠生存期为（30.17±2.86）d,30 d生存率为66.7％（4/6）,aGVHD表现较前3组轻.4组小鼠外周血白细胞计数均于移植后第7天降至最低,后逐渐恢复,A组较3组干预组恢复慢,B、C两组移植后第14、21、28、30天外周血恢复比较,差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）;D组小鼠外周血较B、C组恢复快,差异均有统计学意义（均P＜ 0.05）.4组小鼠移植后第2周CD3＋T细胞比例均明显下降,第3周开始逐渐上升,与A组比较,B、C、D3组小鼠CD3＋T细胞比例上升明显,B、C两组移植后第2、3、4周比较,差异均无统计学意义（均P＞ 0.05）;D组小鼠较B、C组小鼠T细胞亚群CD3＋T细胞恢复快（均P＜0.05）.结论 通过全身照射能成功建立aGVHD小鼠模型;外源性IL-7Rα、细菌鞭毛蛋白均可减轻aGVHD的发生,两者单用无明显差异,二者联合干预aGVHD小鼠模型与单一干预比较,aGVHD发生更轻,造血恢复会更快.     

对氧磷酶2基因多态性与脑梗死的相关性研究

目的探讨对氧磷酶2（PON2）基因的标签住点（tagSNP）rs17876171多态性与脑梗死的相关性。方法应用多聚酶链反应一限制性片段长度多态性分析法（PCR—RFLP），对110例脑梗死患者（脑梗死组）及100名性别、年龄相匹配的健康体检者（对照组）的PON2rs17876171位点多态性进行检测。结果PON2基因型在两组人群中的分布符合H-W平衡；脑梗死组和对照组PON2S311C（C→G）CC、CG、GG三种基因型分布差异有统计学意义（x2=7．67，P〈0．05），且脑梗死组G等位基因频率高于对照组（x2=4．14，P〈0．05）。非条件Logistic回归分析表明，携带G等位基因的人群脑梗死的发生风险为OR=2．179，95％CI（1．527～3．108），P〈0．01。结论PON2S311C多态性的G等位基因可能是中国山西地区汉族人群脑梗死的危险因子。     

细胞周期蛋白A与p27蛋白在子宫腺肌病中的表达及其意义

目的检测体外培养子宫腺肌病在位内膜腺上皮细胞中细胞周期蛋白A(CyclinA)与p27蛋白的表达,探讨CyclinA及p27蛋白与子宫腺肌病的发病关系。方法体外培养子宫腺肌病在位内膜腺上皮细胞,用Western-blot法定量检测CyclinA和p27在子宫腺肌病组、对照组(子宫肌瘤组)培养细胞中的表达。结果子宫腺肌病组腺上皮细胞中CyclinA表达高于对照组(P<0.05),p27表达低于对照组(P<0.05)。结论子宫腺肌病的发病也可能与细胞周期调节失控导致细胞不正常生长,增殖活性改变有关。     

龈沟液中基质金属蛋白酶-9的量与牙周炎的关系

目的 观察慢性牙周炎患者在牙周基础治疗前后龈沟液中基质金属蛋白酶-9水平的变化。方法 采用滤纸条方法取30例牙位治疗前与龈上洁治和龈下刮治等牙周基础治疗，治疗结束后两周再次采集龈沟液样本，同时取30例健康人牙位的龈沟液标本，用酶联免疫法检测其中的MMP-9的水平。结果 牙周基础治疗后MMP-9的总量均较治疗前显著下降（P〈0．01），治疗前后MMP-9的总量均与对照组有显著差N（P〈0．01）。结论 龈沟液中MMP-9的总量在牙周基础治疗后降低，其水平可反映牙周组织的病变状况，基质金属蛋白酶-9的活性与牙周炎关系密切。     

MTT法在检测细胞增殖方面的探讨

目的 了解MTT（四甲基偶氮唑盐）法在检测细胞增殖性方面的作用。方法 采用酶标仪在570min波长附近（500—600nm）处测定光吸收值，以反映活细胞的数目。结果 吸光度值在0．75—1．25时，这样才能保证数据有线性关系，MTT比色法才可灵敏、准确地反映出细胞数量上的变化。结论 MTT比色法是一种检测细胞存活和增殖性方面有效的方法，具有操作简便、经济、快速、易自动化的优点。     

三氧化二砷联合丁硫氨酸亚砜胺对K562/ADM细胞的作用及其机制研究

目的 研究三氧化二砷（As2O3）联合γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂丁硫氨酸亚砜胺（BSO）对肿瘤多药耐药细胞株K562／ADM细胞的诱导凋亡效应，及对P糖蛋白（P—gp）和mdr1mRNA表达的抑制作用，探讨谷胱甘肽（GSH）的含量变化与As2O3作用效果的关系。方法As2O3（0．5、2．0、5．0μmol／L）单独及联合100μmol／LBSO作用于K562／ADM细胞，应用MTT比色法检测K562／ADM细胞的增殖活性；膜联蛋白V／碘化丙锭（AnnexinV／PI）标记法观察K562／ADM细胞的凋亡效应；分光光度法检测K562／ADM细胞内GSH含量变化；流式细胞术（FCM）检测P—gp水平变化；RT—PCR方法检测mdr1mRNA的表达变化。结果 K562／ADM细胞内的GSH含量为（81．13±3．91）mg／g蛋白，在BSO降低GSH含量后，临床剂量（0．5、2．0μmol／L）As2O3联合BSO（100μmol／L）24h内即可抑制K562／ADM细胞的增殖活性，诱导K562／ADM细胞发生凋亡，处理48h凋亡率分别为（59．29±6．01）％，（65．06±8．29）％；72h凋亡率分别为（82．15±9．28）％，（92．72±9．41）％；其诱导凋亡效果均明显强于单用As2O3，临床剂量和高剂量（5．0μmol／L）组。K562／ADM细胞P—gp表达阳性率为98．1％，mdr1mRNA的相对表达水平为1．85±0．13，临床剂量As2O3联合BSO处理48h，其抑制mdr1mRNA表达的作用效果以及处理72h对P—gP的抑制作用均明显强于单用高剂量As2O3组。结论 GSH的含量变化与As2O3的作用效果密切相关，As2O3联合BSO可有效诱导K562／ADM细胞发生凋亡，有效抑制P—gP及mdr1mRNA的表达。