NT4-Al融合基因原核表达载体的构建

目的构建神经营养素（NT4）与肿瘤血管抑制肽Alphastatin融合基因的原核表达载体pBV220-NT4-Al。方法采用非对称互补引物（模板）法,依据GenBank提供的Alphastatin基因序列,设计合成并扩增出肿瘤血管抑制肽Alphastatin的cDNA;将其连接到NT4的信号肽和前导序列3’端,组成融合基因NT4-Al,再将该融合基因亚克隆于表达载体pBV220,构建pBV220-NT4-Al。结果经DNA测序、限制性内切酶酶切等方法证实Alphastatin成功重组到NT4信号肽和前导序列3’端,并将融合基因亚克隆于pBV220内。结论成功构建原核表达载体pBV220-NT4-Al,为进一步研究肿瘤基因治疗奠定了基础。     

纠正性大血管错位并发心肌致密化不全1例

患者,男,44岁,因发作性胸痛3年余,加重1周于2006年4月12日入院.体检:血压120/83mmHg(1 mmHg=0.133 kPa),胸廓对称无畸形,双肺呼吸音清,未闻及干湿性啰音.心前区无隆起,叩诊心浊音界不大,未及震颤,心率70次/min,律齐,心尖部心音低钝,心脏各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音.心电图示:窦性心律,完全性左束支传导阻滞,左心室肥厚伴心肌劳损,Ⅰ、aVL、Ⅱ、Ⅲ、V2～6导联ST段下移0.15～0.4 mV,Ⅱ、Ⅲ、V2～6导联T波倒置.     

分泌表达神经保护短肽重组慢病毒对SK-N-SH细胞的保护作用

目的构建分泌表达神经保护短肽NAP的重组慢病毒载体,观察重组慢病毒对APPsw转基因人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)的保护作用。方法采用PCR方法克隆融合基因NT4-NAP cDNA;磷酸钙沉淀法包装重组慢病毒Lent/NT4-NAP;平行包装含有报告基因EGFP的报告病毒;SK-N-SH细胞分为正常对照组、单纯APPsw转基因组、空慢病毒载体 APPsw转基因组和NT4-NAP慢病毒 APPsw转基因组,在倒置相差显微镜下观察形态学改变;MTT检测细胞增殖活力;AnnexinV/PI法流式细胞术检测各组细胞凋亡和坏死情况。结果基因测序证明克隆的NT4-NAP cDNA与实验设计完全一致;FACS检测重组病毒滴度为2×106U/L;单纯APPsw转基因组,大量细胞出现凋亡及坏死(与正常对照组比较P<0.01);NT4-NAP慢病毒 APPsw转基因组的细胞数量和活力明显较单纯APPsw转基因细胞改善(P<0.01);FACS检测无论凋亡还是坏死细胞的比率保护组都明显低于加害组(P<0.01)。结论成功构建了能够分泌表达NAP的重组慢病毒载体;重组病毒能够高效转染人神经母细胞瘤细胞;重组病毒表达的蛋白能对AD细胞模型起到很好的保护作用。     

融合蛋白CAC免疫的小鼠血清可抑制β-淀粉样肽的纤维形成

目的 观察融合蛋白CAC（HBcAg与β-淀粉样肽基因重组的原核表达产物）免疫的小鼠血清对β-淀粉样肽（Aβ）纤维形成的抑制作用。方法 用融合蛋白CAC免疫BALB/C小鼠，通过ELISA方法检测其血清中抗-Aβ抗体的滴度。当滴度大于1：10000时，经小鼠眼球采血分离血清。以不同稀释度的血清与终浓度为0．5mg／ml的AB混合，37℃孵育（老化）5d后，透射电镜观察A13的聚集和纤维形成。结果 融合蛋白免疫3次后，小鼠血清中抗-Aβ抗体的滴度达到了1：16000。电镜观察可见，加未免疫的对照鼠血清时，经过5d的老化，Aβ聚集成空心管状纤维，纤维密集，呈网状，几乎充斥于整个视野。当加入稀释度为1：2000的高滴度免疫血清时，开始出现明显的抑制作用，随着血清浓度的增加，形成的Aβ纤维逐渐减少；到1：500时，镜下见不到Aβ纤维的存在。结论 CAC免疫的小鼠血清可抑制Aβ的纤维形成。     

表达胰高血糖素样肽1重组腺伴随病毒载体的构建

背景：胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1, GLP-1)在人体内半衰期过短限制了其应用。 目的：构建可表达GLP-1的重组腺伴随病毒。 方法：将NT4-GLP-1融合基因插入腺伴随病毒包装质粒pSSHG-CMV中,构建pSSHG/NT4-GLP-1重组腺伴随病毒包装质粒。采用磷酸钙共沉淀法将辅助质粒pAAV/Ad、腺病毒质粒pFG140及pSSHG/NT4-GLP-1转染至293细胞系,用其感染Hela细胞。 结果与结论：重组质粒pSSHG/NT4-GLP-1经限制性内切酶EcoRⅠ酶切鉴定可见342 bp的目的片段,说明NT4-GLP-1融合基因已经成功重组于腺伴随病毒包装质粒pSSHG-CMV内。免疫细胞化学结果显示,转染pSSHG/NT4-GLP-1重组腺伴随病毒包装质粒的Hela细胞内有大量棕黄色颗粒,阳性率达到70%以上,说明NT4-GLP-1重组腺伴随病毒在细胞中可以表达GLP-1。     

安徽省2008～2009年84消毒液质量调查报告

为了解84消毒液消毒效果,我们于2008、2009年对辖区内84消毒液进行了监督抽检,主要通过检测其有效氯含量,了解安徽省内流通的84消毒液的质量。1对象与方法     

安徽省部分城市夏季蝇类调查研究

目的 了解安徽省蝇类的分布特点及生态习性,更好地控制蝇类的孳生与繁殖,为蝇类防治工作提供科学依据.方法 采用笼诱法进行蝇类调查.结果 本次调查共诱捕成蝇1999只,分属4科12属15种.大头会蝇、丝光绿蝇、市蝇和棕尾别麻蝇为宿州市、合肥市和马鞍山市2009年夏季优势蝇种或常见蝇种.三城市的蝇类种群结构有较大差异;不同的...     

冠状动脉介入特征与冠心病中医证型变化规律的相关性研究

目的 探讨冠心病患者冠状动脉介入特征与其手术前后中医证型变化规律之间的相关性.方法 对189例冠心病患者进行介入治疗,并对其中104例进行随访,同时对纳入病例进行了介入术前、术后1周及1个月的中医证候的观察,将其介入时的冠脉特征与后者进行统计学比较.结果 ①介入术前冠心病中医证候中以血瘀证165例(87.2%)、气虚证145例(76.5%)及痰浊证90例(47.5%)最为常见.介入术后1周及术后1个月,冠心病中医证候中仍以血瘀证、气虚证及痰浊证最为常见.②冠心病患者冠脉病变以双支病变为最多见,其中又以阳虚、痰浊、血瘀及气虚等证型病变支数为最多:阳虚(平均2.32支)＞痰浊(平均2.16支)＞血瘀(平均2.15支)＞气虚(平均1.96支);气虚、血瘀、痰浊及阳虚等证型的冠脉狭窄程度较重.在冠脉Gensini评分上,标实证型中以痰浊证及血瘀证为最高,本虚证中则以阳虚证为最高.结论 冠心病患者冠脉病变的介入特征与其中医证型之间存在一定的相关性.     

中西医结合治疗直肠癌术后早期炎性肠梗阻疗效分析

粘连性肠梗阻是腹部手术后常见并发症,术后早期炎性肠梗阻又称假性肠梗阻,是由于各种原因导致肠内容物不能顺利向远端运行而产生的一系列临床症状和严重的病理生理变化,其发生率约为20%[1],多发生于术后5～14 d。粘连性肠梗阻常见于腹部手术、炎症和创伤后,是腹部手术后一个长期、不可预测的问题,随腹部手术增多,     

风湿性关节炎的治疗与康复

风湿性关节炎是指风湿热中,以关节炎为主要表现的一种常见的、反复发作的全身性结缔组织病,常伴有心脏炎。多发于青少年,属中医“痹证”范畴。现就本病的治疗与康复简述如下。