脉冲超声辐照微泡增强脂质体介导基因转染的体外实验研究

目的 探讨脉冲超声辐照微泡超声造影剂提高脂质体介导增强型绿色荧光蛋白质粒在肝癌,细胞(HepG2)中转染率的可行性.方法 将HepG2接种在24孔板中,随机分为以下6组:①空白对照组;②质粒+脂质体组;③超声+质粒组;④超声+质粒+微泡组;⑤超声+质粒+脂质体组;⑥超声+质粒+脂质体+微泡组.荧光显微镜及流式细胞仪检测增强型绿色荧光蛋白表达及转染效率;MTT法检测此转染方法对HepG2生长活性的影响.结果 超声+质粒+脂质体组的转染效率最高,并对细胞活性无明显影响;而超声+质粒+脂质体+微泡组转染效率与超声+质粒+脂质体组比较差异无统计学意义(P＞0.05),但细胞活性与空白组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脉冲超声辐照可介导基因转染,并能提高脂质体基因转染效率.同时,在一定条件下,超声微泡造影剂可提高超声介导基因转染效率,此方法可为基因转染提供新的思路.     

兔血管内膜增生过程中核因子κB活性与氯沙坦的影响

背景：核因子κB可参与细胞增殖反应，其复杂的机制需深入研究。目的：研究氯沙坦对血管内膜增生及核因子κB活性的影响。设计：以实验动物为研究对象，完全随机分组设计，探索性实验研究。单位：一所大学医院心内科。对象：本实验于2001—11／2002-06在武汉大学人民医院实验室及实验动物中心完成。实验选用雄性日本大耳白兔24只，随机取8只作为正常组，始终饲以普通饲料；另外16只造成腹主动脉内皮损伤并以高脂饮食饲养8周后再随机分为对照组、氯沙坦组，每组8只。方法：术后氯沙坦组给予氯沙坦10mg／(b&;#183;d)口服，对照组喂生理盐水。4周后取腹主动脉行组织形态学观察及用免疫组织化学方法分析核因子κB、α-平滑肌肌动蛋白、巨噬细胞、细胞间黏附分子1。主要观察指标：3组动物经不同干预措施后血管内膜厚度、内膜面积、内膜核因子κB，细胞间黏附分子1的表达和平滑肌细胞、巨噬细胞数量比较。结果：对照组兔血管氯沙坦组血管内膜厚度、内膜厚度／中膜厚度、内膜面积、内膜面积／中膜面积明显大于正常组(P&;lt;0．01)。氯沙坦组兔血管内膜厚度、内膜厚度／中膜厚度、内膜面积．内膜面积／中膜面积[(0．42&;#177;0．08)mm，0．43&;#177;0．10，(3．18&;#177;0．83)mm。，0．54&;#177;0．11]均明显小于对照组[(1．35&;#177;0．35)mm，0．67&;#177;0．15，(5．30&;#177;1．71)mm^2，0．77&;#177;0．14](P均&;lt;0．01)。氯沙坦组新生内膜中巨噬细胞、平滑肌细胞数均明显少于对照组(P&;lt;0．01，0．05)。氯沙坦组兔血管核因子KB及其靶基因产物细胞间黏附分子1的水平也明显低于对照组(P&;lt;0．01，0．05)。结论：氯沙坦可阻断血管紧张素Ⅱ受体，进而抑制核因子κB，从而抑制平滑肌细胞迁移、增殖和新生内膜形成。     

再次肝移植单中心16例分析

目的 研究再次肝移植术的手术适应证、临床效果和预后.方法 回顾性分析2004年4月至2013年4月我中心进行的612例肝移植临床资料.结果 共有16例再次肝移植,再次肝移植率2.61％(16/612).两次移植间隔时间(即首次移植物存活时间)为(16.2±18.3)个月(10 d至64个月,中位时间9.5个月).再次肝移植后总体病死率50％(8/16),围手术期病死率18.75％(3/16);再次移植物存活时间为(37.4±34.3)个月(3d至94个月,中位时间39.5个月);受者平均生存时间(53.6±33.9)个月(10 d至94个月,中位时间57个月),5年总体生存率48.3％.结论 对于肝移植术后常规方法难以治疗的严重并发症,再次肝移植是合理、必要和可行的救治手段.再次肝移植在首次移植6个月后进行,有利于降低再次肝移植的围手术期病死率.     

胆道感染中大肠埃希菌的耐药ββ性分析

胆道系统的多种疾病与胆道感染密切相关，其中大肠埃希菌是最常见的病原菌，对常见抗生素的耐药性也呈现明显的上升趋势，尤其是产超广谱β-内酰胺酶的菌株也越来越多。了解胆道感染中大肠埃希菌的耐药性，对临床抗感染治疗有很大的指导意义。因此我们分析了近三年我院胆道感染患者胆汁培养分离的大肠埃希菌对常见抗生素的耐药性进行分析，现报道如下。     

探讨动态增强MRI强化曲线对椎管内肿瘤的诊断价值及其病理基础

目的探讨动态增强MRI(DCE-MRI)强化曲线对各种椎管内肿瘤的诊断价值及其病理学基础。方法用DCE-MRI方法对已手术和病理证实的62例椎管内肿瘤(包括髓内肿瘤12例;髓外硬膜下肿瘤49例;硬膜外肿瘤1例)进行前瞻性研究,并对16例椎管内肿瘤(包括神经鞘瘤10例,脊膜瘤3例,星形细胞瘤、室管膜瘤及血管母细胞瘤各1例)的多种病理指标与强化曲线进行相关性分析。结果将椎管内肿瘤CER-Time曲线分为快升快降型、快升慢降型、较快升持续型、缓慢上升型4型,其中血管母细胞瘤属于快升快降型;骨母细胞瘤、原始神经外胚层肿瘤属于快升慢降型;脊膜瘤、室管膜瘤属于较快升持续型;星形细胞瘤、神经鞘瘤、神经纤维瘤、神经节细胞瘤属于缓慢上升型。对16例椎管内肿瘤病理指标与动态增强结果的相关性分析显示强化曲线类型与大血管数、30sCER呈负相关,与8minCER呈正相关;30sCER与小血管增生、内皮增生、大血管数呈正相关;8minCER与小血管增生、大血管数呈负相关;最大增强率与出血、小血管数呈正相关。结论 DCE-MRI不仅有助于各类椎管内肿瘤的鉴别诊断,还能提供肿瘤的血供等微观情况,为临床选择治疗方案及估计预后提供较为可靠的依据。     

超声激活血卟啉对肝癌细胞抗失巢凋亡的影响

目的 探讨超声激活声敏剂血卟啉对肝癌细胞株HepG2抗失巢凋亡的影响.方法 将HepG2细胞悬液随机分为4组:血卟啉组,培养液中加入血卟啉40μl孵育30 s;超声辐照组,以1.0 MHz、1.5 W/cm2超声辐照30 s;血卟啉与超声辐照组,同样方法予以血卟啉与超声联合处理;及空白对照组.各组处理后细胞一部分在软琼脂培养2周后观察其失巢生长能力,另一部分在铺有多聚羟乙基甲基丙烯酸树脂(polyhydroxy-ethylmethacrylate,poly-HEMA)的孔板中悬浮培养12 h后以Annexin V-FITC/PI双染法及24 h后以琼脂糖凝胶电泳检测其失巢凋亡情况.结果 血卟啉与超声辐照组HepG2细胞在软琼脂中不能形成集落,琼脂糖凝胶电泳显示出细胞凋亡特征性DNA ladder,其凋亡率为(14.89±2.82)%,与其余3组相比,差异均具有显著性.结论 血卟啉经超声激活后能抑制肝癌细胞株HepG2的抗失巢凋亡.     

超声实时三平面法评价右房容积的临床初步研究

目的 探讨超声实时三平面法（Triplane）评估右房容积的可行性及准确性。 方法 应用超声实时Triplane法与二维超声心动图（2DE）测量15例健康志愿者（正常对照组）和18例右房扩大患者（右房扩大组）的右房舒张末期容积、右房收缩末期容积、右房射血分数，分别在正常对照组和右房扩大组组内及组间比较2DE与实时Tri—plane法的测量结果。 结果 （1）正常对照组、右房扩大组组内比较，2DE和实时Tri—plane法测值无显著性差异（p〉0．05）；（2）正常对照组与右房扩大组组间比较，2DE与实时Tri—plane法测值差异有显著性意义（P〈0．05）。 结论 超声实时三平面法能准确测量右房容积，具有重要的临床应用价值。     

光动力治疗促进反义bcr-abl寡核苷酸K562细胞核内转染的实验观察

目的:体外研究光动力治疗(photodynamictherapy,PDT)对b3a2型反义bcr-abl寡核苷酸(assntisenseoligonucleotides,ASO)慢性髓细胞性白血病(chronicmyelogenousleukemia,CML)细胞株K562转染的影响,为PDT合并反义技术应用于CML患者治疗以及体外骨髓净化提供实验基础。方法:半导体激光,波长650nm,剂量9J/cm2垂直照射。光敏剂为血卟啉单甲醚(hematoperphyrinmonomethylether,HMME),采用体外细胞培养技术,荧光显微镜检测荧光标记的反义bcr-abl寡核苷酸在K562细胞中的分布情况。结果:PDT6h后,细胞内荧光物质主要以明亮的点状聚集在胞核和部分胞浆中,而直接转染时,胞内荧光物质则弥散分布于胞浆中。结论:PDT可以使反义bcr-abl寡核苷酸K562细胞转染主要集中于细胞核内。     

拇趾毁损伤的再造

目的介绍逆行足内、外侧双岛状瓦合皮瓣加髂骨植骨再造足拇趾外伤性缺损的临床经验。方法对拇趾及踌、第2趾毁损且跖趾关节完好者,采用以足背动脉跖底深支为蒂,以内踩前或跗内侧血管、外踝前或跗外侧血管为分支的足内、外侧分叶皮瓣瓦合加髂骨植骨再造足拇趾。结果术后皮瓣顺利成活,经6～18个月随访,再造足拇趾外形满意,皮瓣两点辨别觉6-8mm,X线示髂骨与残端趾骨骨性愈合,髂骨未见吸收征象．拇趾跖趾关节背伸达40°,屈曲达30°。结论采用逆行足内、外侧分叶瓦合皮瓣加髂骨植骨再造拇趾是一种简单有效的方法。     

血液透析患者低血压发生时间与季节分布特征及护理

目的 分析尿毒症患者血液透析中出现低血压的时间和季节分布特征,旨在提出相应的护理对策,以减少低血压的发生.方法 对2010年1月至2010年12月在本院进行血液透析的147例(1642例次)尿毒症患者进行回顾性分析,探讨在血液透析过程中发生低血压的时间与季节分布情况.结果 血液透析时第1个小时为低血压发生的第1个高峰期,血液透析最后1个小时为低血压发生的第2个高峰期,冬、春季低血压发生率明显高于夏、秋季,且冬季最高,春秋季其次,夏季最低,各季节比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血液透析中低血压的发生时间和季节分布呈现规律性变化,应采取相应的护理措施,减少低血压的发生,提高血液透析患者的治疗效果.