以PPARγ2为靶点的传统中药细胞学筛选方法的建立和应用

目的构建含人PPARγ2基因启动子的荧光素酶表达质粒,通过建立稳定转染该质粒的细胞系,建立传统中药细胞学筛选方法。方法首先以p GL3-Basic-Luc和p GL3-Enhancer-Luc为载体构建含不同长度人PPARγ2基因启动子序列的荧光素酶表达质粒。脂质体转染,建立稳定转染上述质粒的3T3-L1细胞系。选取红花和茜草等28种可能具有减肥作用的中药制备成中药水溶性提取物(ECMH),观察不同浓度ECMH对3T3-L1细胞中荧光素酶表达的影响。结果 p GL3-Enhancer-PPARγ2 625 bp-Luc质粒稳定转染的细胞荧光素酶表达最高,是本底的200倍左右。故采用此细胞系进行传统中药筛选,红花ECMH在10、100和1 000μg/m L时均可使3T3-L1细胞中荧光素酶的表达明显增加,分别为对照组的1.63倍、1.90倍和2.30倍(P0.05)。在10~1 000μg/m L荷叶、茜草ECMH也均能促进3T3-L1细胞中荧光素酶的表达,在浓度为1 000μg/m L时荷叶和茜草对3T3-L1细胞中荧光素酶的表达作用最强,分别为对照组的2.03倍(P0.01)和2.00倍(P0.01)。结论成功构建p GL3-Enhancer-PPARγ2625 bp-Luc质粒,并建立稳定转染的3T3-L1细胞系。红花、荷叶和茜草的ECMH能明显促进3T3-L1细胞中人PPARγ2基因启动子的活性,它们可能成为未来潜在的减肥药物。     

生长分化因子15与肥胖症及相关代谢性疾病的研究进展

生长分化因子15(GDF15)是一种主要由活化的巨噬细胞分泌的蛋白质,能够参与调控肿瘤发生、炎症反应、组织损伤等多种生物学效应。近年来研究发现,脂肪细胞也能分泌GDF15,并在肥胖症及相关代谢性疾病中发挥重要作用。在肥胖症患者中,GDF15水平代偿性升高,其不仅能够作用于中枢神经系统抑制食欲、减少摄食,还能作用于周围神经系统激活迷走神经延缓胃肠排空,刺激交感神经促进脂肪分解和产热,从而达到减重的目的。另外,在肥胖症相关代谢性疾病的发生发展中,GDF15不仅能改善糖尿病患者的胰岛素抵抗和炎症反应,抑制胰岛β细胞凋亡;还能促进非酒精性脂肪性肝病患者肝脏脂肪分解和减轻肝脏炎症反应。因此,GDF15非常有望成为未来研发肥胖症及其相关代谢性疾病药物的重要靶点。     

特纳综合征患者早期雌激素替代治疗改善骨密度

目的探讨早期雌激素替代治疗对特纳综合征(TS)患者骨密度(BMD)改善的效果。方法选取2005年8月到2015年8月就诊于北京协和医院内分泌科矮小门诊的27例TS患者,全部测量身高、体质量,雌激素治疗前后的骨密度由LUNAR-PRODGIY型骨密度仪进行测量。比较TS患者雌激素替代治疗前后骨密度的差异,治疗起始年龄对骨密度的影响。结果应用雌激素治疗后1年内、1~3年、3年L2-4的骨密度分别为(0.96±0.13)g/cm~2、(0.92±0.13)g/cm~2、(0.93±0.14)g/cm~2,显著高于基线水平分别为(0.73±0.08)g/cm~2、(0.70±0.13)g/cm~2、(0.75±0.07)g/cm~2;治疗起始年龄18岁组L2-4骨密度(0.96±0.14)g/cm2显著高于治疗起始年龄≥18岁组(0.90±0.10)g/cm~2。结论早期雌激素替代治疗可更有效地改善TS患者骨密度,但影响骨密度的其他因素仍需进一步深入探究。     

先天性肾上腺皮质增生症94例诊治分析

目的:探讨先天性肾上腺皮质增生症(CAH)的误漏诊原因,提高对该症的认识和诊断水平.方法:回顾性分析我院确诊的94例CAH的临床资料.结果:本组明确诊断为21-羟化酶缺乏症单纯男性化型(SV-21-OHD)58例(61.7%),21-羟化酶缺乏症失盐型(SW-21-OHD)11例(11.7%).17α-羟化酶缺乏症(17α-OHD)21例(22.3%),11β-羟化酶缺乏症(11β-OHD)4例(4.3%).43例曾在外院就诊,其中8例明确诊断,18例误诊,17例诊断不明;余51例发病即在我院就诊,均明确诊断.各型患者的误漏诊情况各异,SW-21-OHD误诊为肾小管酸中毒1例;SV-21-OHD误诊为外阴畸形4例,真性性早熟3例.先天性幽门狭窄1例;17α-OHD误诊原发性醛固酮增多症2例,格林-巴利综合征、睾丸女性化和慢性肾炎、高血压心脏病、原发性闭经、先天无子宫各1例;11β-OHD误诊为尿道下裂1例.结论:临床工作中应提高对本病的认识及警惕性,详细的查体和必要的医技检查有助于提高诊断率.     

肥胖相关黑棘皮病的发病机制

黑棘皮病是肥胖患者常见的皮肤过度角化伴局部肤色加深的特征性改变,是高胰岛素血症和胰岛素抵抗的可靠皮肤标志.该病是由于循环中过量的胰岛素通过直接或间接途径激活胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R),促进角化细胞和成纤维细胞生长所致.近年来的研究发现,肥胖患者皮肤的慢性炎性反应、维生素D浓度减低、瘦素分泌增加、色素上皮衍生因子(PEDF)水平升高、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路过度活化与皮肤稳态受损等,也参与了黑棘皮病的发生和发展.探讨肥胖相关黑棘皮病的发病机制可以为临床诊断和治疗提供依据.     

新型减重药物氯卡色林的疗效与安全性的研究进展

肥胖及其并发症对健康和寿命的影响巨大,因此减重药物的研发始终是内分泌领域的热点。氯卡色林(lorcaserin)是2012年获美国FDA批准上市的新型减重药物。它是高度选择性的5-羟色胺2C受体激动剂,通过激动下丘脑抑制食欲的阿片-促黑素细胞皮质素原神经元,抑制食欲,减少能量摄入,进而达到减重的目的。氯卡色林除治疗肥胖之外,对肥胖引起的2型糖尿病、肾功能不全等也具有一定的改善作用。另外,氯卡色林在临床应用中耐受性良好,不良反应程度较轻、发生率较低,对心血管系统的安全性也已经得到证实。因此,氯卡色林与饮食调节、体育锻炼相结合,可以有效地提高患者的减重效果。     

北京地区汉族人FGF23基因SNP与青年女性峰值骨量和血磷的关系

目的 骨量与遗传关系紧密,FGF23是体内重要的调磷因子,但其与骨密度关系的研究还很少,因此本研究目的 在于探讨中国北京汉族健康青年女性FGF23基因rs7955866位点SNP与骨密度关系.对象和方法选取202名北京汉族健康青年女性,进行血钙、磷、PTH和骨密度(BMD)检查,同时检测血DNA标本FGF23基因rs7955866位点SNP情况.结果 FGF23基因型频率为CC 64.4%,CT 33.2%,TT2.5%,所有202名受试者经调整年龄、身高和体重后的BMD、PTH、钙和磷与FGF23等位基因无相关性.结论 FGF23基因单个SNP变异与人群峰值骨量无明显直接相关.     

西布曲明对肥胖小鼠葡萄糖代谢的影响

目的:探讨西布曲明干预对高脂饮食诱导肥胖ICR小鼠葡萄糖代谢的影响。方法:高脂饲料喂养雄性ICR小鼠8周,建立肥胖小鼠模型。西布曲明(7 mg.kg-1.day-1)灌胃干预8周。然后行腹腔注射葡萄糖耐量试验(IPGTT)、胰岛素耐量试验(ITT)及microPET显像;测量小鼠的体重、脂肪组织重量及血生化指标;实时荧光定量RT-PCR方法检测肌肉组织中糖代谢相关基因的相对表达量。结果:西布曲明干预组小鼠体重显著减轻(P<0.05),皮下脂肪、内脏脂肪重量显著降低(P值均小于0.01),空腹血糖显著降低(P<0.05)。ITT试验中,西布曲明干预组小鼠各时间点血糖均低于对照组,差异在90分钟时有显著性(P<0.05);血糖的曲线下面积也显著低于对照组(P<0.05)。另外,西布曲明干预组小鼠的棕色脂肪摄取葡萄糖增多(P<0.05),但肌肉组织内糖代谢相关基因GLUT4、GYS1、HK2、PGC1、IRS1和MSTN的表达量没有显著改变。结论:西布曲明可以减轻小鼠体重,减少白色脂肪重量,增加棕色脂肪代谢能力并在一定程度上改善肥胖小鼠的胰岛素敏感性;西布曲明改善肥胖小鼠葡萄糖代谢的作用可能与肌肉组织中的GLUT4、GYS1、HK2、PGC1、IRS1和MSTN的表达水平无关。     

国产和进口奥利司他治疗超重和肥胖症疗效和安全性比较

目的 比较国产奥利司他片和进口奥利司他胶囊治疗超重和肥胖症患者的疗效及安全性.方法 中国7个中心228例年龄18～65岁、BMI 24～<40 kg/m~2的受试者,在轻度低热卡饮食基础上随机双盲给予国产奥利司他片或进口奥利司他胶囊,治疗24周后评价两种奥利司他的减重疗效以及不良事件.结果 经过24周的治疗,国产奥利司他组受试者体重显著降低(5.0±3.7)kg,进口奥利司他组下降(4.5±3.5)kg(P=0.3922).国产奥利司他片减重治疗后受试者收缩压、血TC、LDL-C与基线比较,P值均<0.0001.收缩压降低(4.4±11.5)mm Hg(1 min Hg=0.133 kPa),血TC下降(0.54±0.79)mmol/L,LDL-C下降(0.32±0.64)mmol/L,下降幅度与进口奥利司他组相比差异无统计学意义.国产奥利司他组和进口奥利司他组不良事件发生率分别为73.7%和63.7%(组间比较P=0.1167),多为轻度脂肪排泄增多的胃肠道症状,可自行缓解.试验中未发生与药物相关的严重不良事件.结论 国产奥利司他片与进口奥利司他胶囊结合轻度低热卡饮食治疗具有相同的减重疗效,并能改善部分肥胖相关疾病,安全性和耐受性好.     

356例念珠菌性阴道炎复查结果与取样时间的关系

目的探讨念珠性阴道炎不同体征和症状的发生率,以及白带取样距离末次给药时间对念珠菌性阴道炎复查结果的影响。方法门诊念珠性阴道炎复查患者中,快速革兰氏染色,镜下找到念珠菌孢子和菌丝或单找到孢子都确认为阳性。结果356例患者中,23.04%无明显症状;复查阳性率随末次给药距离白带标本取样时间的延长逐步下降,〈24h阳性率最高,为83.90%,72～96h后趋于稳定,各组间差异有显著性（P〈0.05）,〈24h时假阴性率最高（35.50%）,与其他各组差异明显（P〈0.05）。结论念珠菌性阴道炎复查阳性率随末次给药距离白带标本取样时间的延长逐步下降,停药4d后结果趋于稳定