3例SARS患者的RT-PCR与ELISA确认

目的 为了对SARS疑似患者进行快速早期诊断和进行血清学确认。方法 从SARS疑似患者含漱液与细胞病毒分离上清液中提取病毒RNA，进行逆转录套式PCR反应，扩增SARS病毒特异性核酸片段，进行序列测定与序列比对。并对患者不同发病日期采集的血清标本进行SARS病毒ELISA抗体测定。结果 SARS患者含漱液标本和细胞病毒分离上清液中均能扩增出特异性核酸片段，经测序证实来自SARS冠状病毒。患者血清标本中SARS病毒抗体在发病后18d开始呈阳性。以后随发病日期增加而升高。结论 逆转录套式PCR是一种早期、敏感、特异、快速检测传染性非典型肺炎疑似患者临床样本中SARS冠状病毒的理想方法。浙江省3例SARS临床诊断病例的含漱液和血清标本经SARS病毒核酸和抗体检测。证实为SARS病例。     

随机引物聚合酶链反应法鉴定2例无菌性脑炎的未知病毒

目的建立一种可应用于准确检测未知病毒的分子生物学方法。方法2例无菌性脑炎患者的脑脊液,接种人横纹肌肉瘤细胞,收集感染细胞液,将细胞液离心去除细胞碎片,超速离心沉淀病毒颗粒后,用脱氧核糖核酸酶处理,提取核酸后,用随机引物进行聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）扩增,将扩增产物克隆至pGEM-TEsay载体中测序,序列通过BLAST（Basic Local Alignment Search Tool）最终确定未知病毒。结果经BLAST比对证明,该病毒是人类肠道致细胞病变孤儿病毒4型。结论成功建立了一种基于随机引物PCR的未知病毒鉴定方法,为快速检测不明原因疾病和新发传染病病原提供了新的技术方法。     

SARS病毒核酸检测中不同引物对灵敏度的影响

目的筛选灵敏、特异的SARS病毒核酸检测方法。方法采用世界卫生组织(WHO)和中国疾病预防控制中心(中国CDC)推荐的9对SARS病毒核酸检测引物，同时又选择市售的2种SARS荧光定量PCR试剂，分别对不同稀释度的SARS病毒核酸进行RT—PCR、巢式PCR和荧光定量PCR扩增，比较其检测灵敏度和特异性。结果两种荧光定量PCR试剂可检测SARS病毒核酸灵敏度均为0．1TCID50，与普通RT—PCR方法检测灵敏度(0.1TCID50)相同，而较巢式PCR法(0．01TCID50)略低；采用RT—PCR方法扩增SARS核酸时，以WHO推荐的SAR1s／SAR1as、BNIinS／BNIAs、BNIoutS/BnoutAs与中国CDC推荐的CDC-P1 ／P1-灵敏度最高。结论RT—PCR扩增时各引物对之间存在明显差异；荧光定量PCR可作为SARS疑似样本检测的首选方法，必要时再采用RT—PCR和巢式PCR法加以确认。     

1999-2012年浙江省乙型流行性感冒病毒血凝素与三个内部基因的变异分析

目的 探讨乙型流行性感冒病毒(简称乙型流感病毒)分离株血凝素(hemagglutinin,HA)、核蛋白(nucleoprotein,NP)、基质蛋白(matrix protein,M)和非结构蛋白(nonstructural protein,NS)基因的分子变异特征.方法 选取浙江省1999-2012年乙型流感病毒分离代表株31株,进行HA重链区(HA1)、NP、M和NS基因测序,并构建基因进化树,估算此4个基因的核苷酸进化速率并分析其氨基酸变异位点.结果 31株乙型流感病毒分离株在HA1基因进化树上分别处于Victoria系和Yamagata系两大分支,分别以B/Victoria/2/87和B/Yamagata/16/88为代表.2010年之后Victoria系分离株的NP基因与Yamagata系毒株高度同源,处于同一进化分支.估算HA1 、NP、M和NS基因的核苷酸年进化速率分别为2.29×10-3、1.39×10-3、1.78×10-3、1.30×10-3/位点.Victoria系分离株HA1氨基酸重要变异位点主要包括K48E、L58P 、N75K 、K80R、K129N/S、N165K、S172P、S197N/D和A202V,Yamagata系分离株HA1的变异位点包括R48K、S150I、N166Y、N203S、G230D和D233N.2010年之后的Victoria系分离株NP氨基酸序列与Yamagata系毒株类似,与之前的毒株存在4个特征性氨基酸位点的变异,分别为A60D、L233V、N513S和V534I.结论 1999-2012年浙江省乙型流感病毒分离株发生明显变异,表面抗原基因HA1进化速度快于内部基因,基因重配和基因突变是病毒发生变异的主要机制.     

乙型流感病毒Victoria系和Yamagata系HA1基因的分子进化研究

目的 <\b>探讨乙型流感病毒两大谱系的进化特征和进化规律.方法 <\b>从GenBank数据库下载1940-2012年乙型流感病毒流行株共126条,采用贝叶斯-马尔科夫链-蒙特卡洛(Bayesian-MCMC)和分子钟方法,对乙型流感病毒的HA1基因进行系统发育学分析,计算乙型流感病毒两大谱系可能的起源时间与分化时间.结果 <\b>1978-2010年乙型流感病毒Victoria系与Yamagata系的aa平均差异率为5.4％～ 10.2％,两谱系的aa差异和组间遗传距离随时间推移呈逐渐增大的趋势.与Victoria系毒株相比,Yamagata系全部毒株的163位aa及部分毒株的166位aa缺失,但是这些年来的乙型流感病毒HA1基因除个别位点外,尚未受到明显的正向选择压力.每年乙型流感病毒HA1基因的碱基替换速率为2.138×10-3(95％HPD:1.833×10-3～2.437×10-3)替代/位点,推算乙型流感病毒Victoria系和Yamagata系的最近共同祖先出现在1971年(95％HPD:1969-1972年),两大谱系的分化时间点分别为1973年(95％HPD:1971-1974年)和1977年(95％HPD:1975-1978年).结论 <\b>乙型流感Victoria系和Yamagata系均较以往发生大的变异,且两大谱系的差异日趋增大,将来有可能分化为不同的亚型,在流感监测中应密切关注这一变化及其流行病学意义.     

单纯性肥胖症患儿的社会心理因素探讨与干预

近年来,小儿单纯性肥胖症发病率在全球范围内呈明显上升趋势。所谓单纯性肥胖,就是当进食热量多于人体消耗量而以脂肪形式储存于体内,体重超过标准体重的20％或体重指数（kg/m3）大于24[1]。单纯性肥胖不仅影响小儿的生儿发育,导致携氧运动能力下降,易并发心血管疾病、糖尿病等,还常因心理压力过大,造成部分患儿较孤独,攻击性强     

学龄期儿童慢性胃炎的关爱护理

目的:探求关爱护理对学龄期儿童慢性胃炎的护理效果。方法:对本院110例学龄期慢性胃炎患儿作随机分组研究,观察组58例,采用由医院、家庭和学校共同实施的以满足患儿心理需求为根本的关爱护理和药物治疗相结合的方法;对照组52例,采用以药物治疗为主的一般护理方法。结果:关爱护理组症状消失和治愈时间明显缩短,复发例数明显减少。结论:关爱护理能使学龄期慢性胃炎患儿既得到有效医治,又不影响上课学习,有助于促进患儿早日康复。     

消化性溃疡病患儿的社会参与护理

目的：寻求学龄消化性溃疡病患儿有效的治疗、护理措施。方法：将62例消化性溃疡病患儿分为对照组（30例）和护理组（32例）。对照组采用常规药物治疗；护理组在常规治疗的基础上，指导家长和老师参与护理。观察6个月，比较两组治疗效果。结果：两组患儿症状消失和治愈时间比较，均P＜0．05，差异有显著性意义。结论：医护人员在对患儿进行药物治疗的同时，指导家长主导式护理和老师协同式护理，有助于儿童消化性溃疡病的治疗，促进患儿早日康复。     

忽略性因素所致的护理差错的发生与防范

引起护理差错的原因很多 ,制订防范差错的措施也很多。但在临床上我们发现某些被忽略的差错也屡屡发生。所谓忽略是指人们对其认识不足 ,从而未能采取有力的防范措施而导致差错的发生。本文就忽略性因素所致的差错进行剖析 ,以通过剖析提出防范性措施。1　差错原因1.1　习惯思维造成的差错　护理是一项细致、责任重大的工作 ,稍有疏忽就会酿成大错 ,但护理又是一项单调烦琐的工作 ,每天重复的操作 ,使护士对日常护理工作已驾轻就熟 ,并积累了一定的护理经验 ,形成了一种本能的习惯思维。致使在工作中护士对所做的一切操作产生了轻视的心理 ,…