不同保存温度对SE-9000型血液分析仪检测外周造血干细胞稳定性的影响

目的探讨不同条件下保存的血液对外周造血干细胞检测的影响。方法以SE-9000型血液分析仪检测不同温度、不同时间保存的血液外周造血干细胞的数量和百分率。结果4°C条件下保存12 h内造血干细胞的数量和百分率结果无明显变化;20°C条件下保存8 h内造血干细胞的数量和百分率结果无明显变化;而30°C条件下保存6 h内造血干细胞的数量和百分率无明显变化。结论血液样本在4~30°C条件下保存6 h对SE-9000型血液分析仪检测外周造血干细胞无影响。     

全面加强儿童青少年近视防控和视力健康管理

党中央、国务院对青少年健康特别是视力健康高度重视,教育部门和学校切实把儿童青少年视力健康管理提上重要议程.该文阐明了当前我国儿童青少年近视防控和视力健康管理工作面临的形势,以及儿童青少年近视形成的主要原因.介绍了近年来教育部推动儿童青少年近视防控和视力健康管理开展的主要工作.并在此基础上提出下一步全面加强儿童青少年近视防控工作的重点任务,充分发挥卫生健康部门专业优势和教育部门的组织优势,从而更加有效地达到改善儿童青少年视力不良状况的目的.     

HPLC-MS/MS同时测定广金钱草中8种成分在大鼠胆汁中的浓度及其排泄动力学研究

建立同时测定灌胃给予大鼠广金钱草提取物后胆汁中7种黄酮和1种酚酸类化合物浓度的HPLC-MS/MS,并用于胆汁排泄研究。大鼠灌胃给予广金钱草提取物后,分别在0~1,1~2,2~4,4~6,6~8,8~12,12~24 h时间段收集胆汁。色谱柱采用Diamonsil C18column(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温40℃。以甲醇-0.01%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.8 m L·min~(-1)。质谱采用电喷雾离子源(ESI),负离子模式下检测,多反应离子监测(MRM)模式进行定量。结果表明8种成分在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.991 5),日内、日间精密度RSD15%,准确度RE-15%~15%,稳定性良好。提取回收率63.2%,内标归一化的基质因子RSD均未超过15%,符合要求。大鼠胆汁排泄研究结果显示,8种成分在胆汁中的原型排泄率均比较小,并且不同个体之间差别较大。该研究方法灵敏度高,选择性好,样品处理简单,可用于灌胃给予大鼠广金钱草提取物后胆汁中8种成分的排泄动力学研究。     

窠囊、窝囊肺与肺癌

窠囊肺病因病机为内外多种因素导致的气血津液运行失常,进一步痰瘀胶结,日久邪实正虚,施治不易,缠绵顽固。中医治疗在改善调节其气、血、津、液的运行,改善"窝囊肺"是有优势的,然如何运用中医理论,正确的辨证施治,调整机体阴阳,需要医者长期的临床实践、积累与领悟。肺癌的治疗,历来也是医学界的难题,需要进一步通过科学研究及临床实践来探索攻克。     

基于因子分析与聚类分析对溃疡性结肠炎中医证候规律的研究

目的观察溃疡性结肠炎中医证型分类及分布规律。方法收集溃疡性结肠炎患者441例,采用自拟《溃疡性结肠炎的中医证候流行病学调查表》进行一般情况、中医证候、舌象等临床资料的调研,基于因子分析及聚类分析探讨溃疡性结肠炎中医证候规律。结果本研究收集调查问卷的58个症状条目因子分析,KMO统计量为0.916,Bartlett球型检验P0.0001,适于因子分析。应用最大似然估计法共提取出13个公因子,筛选出具有意义的症状46项,根据病性、病位证素归纳出基本中医证型分为6类。聚类分析显示证型分布比例为:脾胃气虚证占27.66%(122/441),大肠湿热证占26.30%(116/441),脾肾阳虚证占17.69%(78/441),肝郁脾虚证占15.65%(69/441),阴虚肠燥证占8.39%(37/441),血瘀肠络证占4.31%(19/441)。不同病情分期和临床类型的证型分布比例为:大肠湿热证在活动期占48.00%(108/225),脾胃气虚证在缓解期占41.20%(89/216),大肠湿热证在初发型占53.55%(83/155),脾胃气虚证在慢性复发型占45.11%(60/133),脾肾阳虚证在慢性持续型占40.52%(47/116),其他证型分布相当。结论溃疡性结肠炎基本中医证型为6类,活动期以大肠湿热证为主,缓解期以脾胃气虚证为主,初发型以大肠湿热证为主,慢性复发型以脾胃气虚证为主,慢性持续型以脾肾阳虚证为主。     

氧化应激条件下克癃胶囊对PC-3细胞内GSH、ROS水平的影响

目的:研究克癃胶囊对双氧水诱导的PC-3细胞氧化应激反应的保护作用。方法:体外培养PC-3细胞,建立双氧水诱导PC-3细胞氧化应激的模型,给予克癃胶囊进行干预。分为4组:正常组、模型组(H_2O_2 100μmol/L)、阴性对照组(tBHQ50μmol/L+H_2O_2100μmol/L)、克癃胶囊组(克癃方100μg/m L+H_2O_2 100μmol/L)以DCFH-DA为荧光探针,利用流式细胞仪检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量,利用化学显色法测定PC-3细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量,评价细胞氧化应激水平。结果:ROS、GSH水平模型组与正常组比较,阳性对照组、克癃胶囊组与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01);ROS水平阳性对照组与克癃胶囊组比较,差异有统计学意义(P0.01),但两组GSH水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:克癃胶囊对双氧水诱导的PC-3细胞氧化应激具有保护作用。     

原发免疫性血小板减少症动物模型研究进展

原发免疫性血小板减少症(ITP)是一种以血小板减少、伴或不伴皮肤黏膜瘀紫、鼻衄、内脏出血等为特征的自身免疫性疾病,ITP动物模型是深入研究ITP发病机制与治疗方法的主要手段,在ITP的研究中一直发挥着重要作用。因此,如何制备与临床接近的动物模型是ITP研究领域的关键问题。目前原发免疫性血小板减少症动物模型的研究方法众多,主要有免疫造模、自发免疫模型、转基因造模以及其他造模方法。免疫造模是最常用的方法,实验用动物主要是小鼠,常用的注射途径是腹腔注射,常用的免疫原有抗血小板血清、单克隆/多克隆抗体、血小板等,自发模型与转基因模型比较少用。此外也有结合中医理论开展病证结合模型的研究,主要有ITP热盛证模型,ITP肾阴虚证模型,ITP气不摄血证模型等,为该病的证候研究提供了基础。本文对近些年来ITP疾病、病证结合动物模型的研究进展进行了比较系统的分析与总结,希望对该疾病的动物模型的进一步研究提供参考。     

融合防龋DNA疫苗pGLUA-P的构建及其细胞表达研究

目的 将变形链球菌（Streptococcus mutans)表面蛋白PAc编码A区和P区（A－P）的序列克隆到真核载体pGLU中，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗，并检测其在原核细胞和真核细胞中的表达。方法 将pCIA-P质粒中A－P片段序列与pGLU质粒连接，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。将pGLUA-P转化大肠杆菌BL21（DE3），以SDS－PAGE电泳鉴定目的蛋白GLUA－P的表达。通过脂质体将pGLUA-P转染大鼠原代肌母细胞，以免疫组织化学检测GLUA－P的表达。结果 GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P经酶切分析证实携带GLU和A－P片段。pGLUA-P转化的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导能够表达完整的融合蛋白。pGLUA-P转染的大鼠原代肌母细胞中可检测到融合蛋白的表达。结论 成功地构建了融合防龋DNA疫苗pGLUA-P，所携带的基因序列正确，能够在原核和真核细胞中表达正确的融合蛋白。     

口腔鳞癌浸润前沿、中心和癌间质TP53、RPS6基因变化的研究

目的检测微卫星位点TP53、RPS6在口腔鳞癌浸润前沿、中心及癌间质细胞中的基因变化，揭示口腔鳞癌的生物学行为。方法运用激光捕获显微切割分别获取同一肿瘤浸润前沿、中心及癌间质足量的细胞，提取DNA，PCR-变性PAGE电泳检测TP53和RPS6位点的基因变化。结果浸润前沿、中心和癌间质中TP53和RPS6存在杂合性缺失（10ssofheterozygosity，LOH）和微卫星不稳定（microsatelliteinstability，MI），发生率从23．5％（4／17）到64．7％（11／17），且LOH和（或）MI的模式存在不同。上皮TP53和RPS6的LOH和MI发生率分别为70．6％（12／17）和64．7％（11／17），间质为43．8％（7／16）和23．5％（4／17），癌实质较间质发生率高，差异有统计学意义（P〈0．05）。浸润前沿TP53的LOH发生率为64．7％（11／17），中心为60．0％（9／15）。RPS6在浸润前沿的LOH和MI为58．8％（10／17），中心为29．4％（5／17）。两位点总发生率分别为62．5％（20／32）和44．1％（15／34），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论部分口腔鳞癌样本浸润前沿、中心和肿瘤间质的基因变化不同，癌实质基因变化率与肿瘤分化程度有关。     

靶向融合防龋DNA疫苗研究(Ⅱ)-编码人Ig基因的质粒pJIg的构建

目的:构建编码人免疫球蛋白Igγ1铰链区和恒定区基因的质粒pJIg,为进一步研制靶向融合防龋DNA疫苗做准备.方法:从人外周淋巴细胞中获得细胞总RNA并合成cDNA第一链,利用半巢式PCR扩增Igγ1恒定区序列,进行T-A克隆,构建pJIg质粒,酶切电泳,并测序鉴定.结果:RT-PCR获得了目的基因,质粒pJIg携带有Igγ1目的片段基因.结论:成功构建编码人免疫球蛋白Igγ1恒定区基因的质粒pJIg.