基于因子分析与聚类分析对溃疡性结肠炎中医证候规律的研究

目的观察溃疡性结肠炎中医证型分类及分布规律。方法收集溃疡性结肠炎患者441例,采用自拟《溃疡性结肠炎的中医证候流行病学调查表》进行一般情况、中医证候、舌象等临床资料的调研,基于因子分析及聚类分析探讨溃疡性结肠炎中医证候规律。结果本研究收集调查问卷的58个症状条目因子分析,KMO统计量为0.916,Bartlett球型检验P0.0001,适于因子分析。应用最大似然估计法共提取出13个公因子,筛选出具有意义的症状46项,根据病性、病位证素归纳出基本中医证型分为6类。聚类分析显示证型分布比例为:脾胃气虚证占27.66%(122/441),大肠湿热证占26.30%(116/441),脾肾阳虚证占17.69%(78/441),肝郁脾虚证占15.65%(69/441),阴虚肠燥证占8.39%(37/441),血瘀肠络证占4.31%(19/441)。不同病情分期和临床类型的证型分布比例为:大肠湿热证在活动期占48.00%(108/225),脾胃气虚证在缓解期占41.20%(89/216),大肠湿热证在初发型占53.55%(83/155),脾胃气虚证在慢性复发型占45.11%(60/133),脾肾阳虚证在慢性持续型占40.52%(47/116),其他证型分布相当。结论溃疡性结肠炎基本中医证型为6类,活动期以大肠湿热证为主,缓解期以脾胃气虚证为主,初发型以大肠湿热证为主,慢性复发型以脾胃气虚证为主,慢性持续型以脾肾阳虚证为主。     

氧化应激条件下克癃胶囊对PC-3细胞内GSH、ROS水平的影响

目的:研究克癃胶囊对双氧水诱导的PC-3细胞氧化应激反应的保护作用。方法:体外培养PC-3细胞,建立双氧水诱导PC-3细胞氧化应激的模型,给予克癃胶囊进行干预。分为4组:正常组、模型组(H_2O_2 100μmol/L)、阴性对照组(tBHQ50μmol/L+H_2O_2100μmol/L)、克癃胶囊组(克癃方100μg/m L+H_2O_2 100μmol/L)以DCFH-DA为荧光探针,利用流式细胞仪检测细胞内活性氧自由基(ROS)含量,利用化学显色法测定PC-3细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)含量,评价细胞氧化应激水平。结果:ROS、GSH水平模型组与正常组比较,阳性对照组、克癃胶囊组与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01);ROS水平阳性对照组与克癃胶囊组比较,差异有统计学意义(P0.01),但两组GSH水平比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:克癃胶囊对双氧水诱导的PC-3细胞氧化应激具有保护作用。     

原发免疫性血小板减少症动物模型研究进展

原发免疫性血小板减少症(ITP)是一种以血小板减少、伴或不伴皮肤黏膜瘀紫、鼻衄、内脏出血等为特征的自身免疫性疾病,ITP动物模型是深入研究ITP发病机制与治疗方法的主要手段,在ITP的研究中一直发挥着重要作用。因此,如何制备与临床接近的动物模型是ITP研究领域的关键问题。目前原发免疫性血小板减少症动物模型的研究方法众多,主要有免疫造模、自发免疫模型、转基因造模以及其他造模方法。免疫造模是最常用的方法,实验用动物主要是小鼠,常用的注射途径是腹腔注射,常用的免疫原有抗血小板血清、单克隆/多克隆抗体、血小板等,自发模型与转基因模型比较少用。此外也有结合中医理论开展病证结合模型的研究,主要有ITP热盛证模型,ITP肾阴虚证模型,ITP气不摄血证模型等,为该病的证候研究提供了基础。本文对近些年来ITP疾病、病证结合动物模型的研究进展进行了比较系统的分析与总结,希望对该疾病的动物模型的进一步研究提供参考。     

融合防龋DNA疫苗pGLUA-P的构建及其细胞表达研究

目的 将变形链球菌（Streptococcus mutans)表面蛋白PAc编码A区和P区（A－P）的序列克隆到真核载体pGLU中，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗，并检测其在原核细胞和真核细胞中的表达。方法 将pCIA-P质粒中A－P片段序列与pGLU质粒连接，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。将pGLUA-P转化大肠杆菌BL21（DE3），以SDS－PAGE电泳鉴定目的蛋白GLUA－P的表达。通过脂质体将pGLUA-P转染大鼠原代肌母细胞，以免疫组织化学检测GLUA－P的表达。结果 GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P经酶切分析证实携带GLU和A－P片段。pGLUA-P转化的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导能够表达完整的融合蛋白。pGLUA-P转染的大鼠原代肌母细胞中可检测到融合蛋白的表达。结论 成功地构建了融合防龋DNA疫苗pGLUA-P，所携带的基因序列正确，能够在原核和真核细胞中表达正确的融合蛋白。     

口腔鳞癌浸润前沿、中心和癌间质TP53、RPS6基因变化的研究

目的检测微卫星位点TP53、RPS6在口腔鳞癌浸润前沿、中心及癌间质细胞中的基因变化，揭示口腔鳞癌的生物学行为。方法运用激光捕获显微切割分别获取同一肿瘤浸润前沿、中心及癌间质足量的细胞，提取DNA，PCR-变性PAGE电泳检测TP53和RPS6位点的基因变化。结果浸润前沿、中心和癌间质中TP53和RPS6存在杂合性缺失（10ssofheterozygosity，LOH）和微卫星不稳定（microsatelliteinstability，MI），发生率从23．5％（4／17）到64．7％（11／17），且LOH和（或）MI的模式存在不同。上皮TP53和RPS6的LOH和MI发生率分别为70．6％（12／17）和64．7％（11／17），间质为43．8％（7／16）和23．5％（4／17），癌实质较间质发生率高，差异有统计学意义（P〈0．05）。浸润前沿TP53的LOH发生率为64．7％（11／17），中心为60．0％（9／15）。RPS6在浸润前沿的LOH和MI为58．8％（10／17），中心为29．4％（5／17）。两位点总发生率分别为62．5％（20／32）和44．1％（15／34），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论部分口腔鳞癌样本浸润前沿、中心和肿瘤间质的基因变化不同，癌实质基因变化率与肿瘤分化程度有关。     

靶向融合防龋DNA疫苗研究(Ⅱ)-编码人Ig基因的质粒pJIg的构建

目的:构建编码人免疫球蛋白Igγ1铰链区和恒定区基因的质粒pJIg,为进一步研制靶向融合防龋DNA疫苗做准备.方法:从人外周淋巴细胞中获得细胞总RNA并合成cDNA第一链,利用半巢式PCR扩增Igγ1恒定区序列,进行T-A克隆,构建pJIg质粒,酶切电泳,并测序鉴定.结果:RT-PCR获得了目的基因,质粒pJIg携带有Igγ1目的片段基因.结论:成功构建编码人免疫球蛋白Igγ1恒定区基因的质粒pJIg.     

转化生长因子β1对体外成牙本质细胞分化的影响

目的：观察转化生长因子β1（transforming growth factorβ1，TGF－β1）对体外培养鼠牙乳头成本本质细胞分化的影响。方法：取17d胎龄小鼠下颌第一磨牙牙胚，胰腺蛋白消化分离牙乳头，置半固态培养基培养6d，半固态培养基中加入重组转化生长因子β1和肝素，组织学观察。结果：TGF－β1加肝素可诱导牙乳头周边细胞发生极化，并分泌胸外基质，单独加入TGF－β1未见细胞极化，但基质分泌增加，结论：TGF－β1能诱导前成牙本质细胞的细胞学和功能上分化。     

特异性IgY抗体对人牙菌斑中变形链球菌的影响

目的:研究抗变形链球菌葡糖基转移酶过表达株IgY抗体对人牙菌斑中变形链球菌的影响。方法:采用双盲法,选择自愿受试者41名,分为对照组和试验组两组。分别给予含抗变形链球菌葡糖基转移酶过表达株IgY抗体和非特异性IgY抗体的喷雾剂,每日两次,共4周。试验前、试验后1周、试验后4周分别取口腔内指定牙位的菌斑样本,在厌氧的环境中培养,检测变形链球菌菌落数及总厌氧菌菌落数,并计算变形链球菌占总厌氧菌的百分率。结果:使用抗变形链球菌葡糖基转移酶过表达株IgY抗体1周及4周变形链球菌计数较试验前有显著性减少,变形链球菌占总厌氧菌的百分率分别降低12.99%和12.70%,而对照组中的变形链球菌计数和变形链球菌占总厌氧菌的百分率试验前后无显著性差异。结论:抗变形链球菌葡糖基转移酶过表达株IgY抗体可明显减少人牙菌斑中的变形链球菌,改变人牙菌斑的微生物组成,可为防龋提供新的思路。     

防龋疫苗人工自动免疫研究进展

免疫学防治是控制龋病的有效手段,随着分子生物学和免疫学研究的迅速发展,防龋疫苗的研究也逐渐进入新的领域。本文对多肽防龋疫苗等6种人工自动免疫制剂的研究进展作了综述。     

Thermafil根管充填技术的临床评价

目的 :研究Thermafil根管充填技术的效果。方法 :选择牙髓病或根尖周病患者 60例 ,按就诊顺序随机分为 2组。即Thermafil根管充填组 (TC组 )和冷牙胶侧方加压充填组 (LC组 )。对 2组的根管充填时间、术中疼痛情况和根管充填效果进行比较。术后 3个月和 6个月进行复查 ,并拍摄X线片。结果 :以牙为单位 ,TC组适充 18颗 ,超充 11颗 ,欠充 1颗 ;在LC组中 ,适充 2 7颗 ,超充 3颗 ,无欠充 (P <0 .0 5)。TC组术中不适 4颗 ,LC组 2颗 (P >0 .0 5)。以根管为单位 ,根管充填时间Thermafil充填技术组平均 3 6.6s/根管 ,LC组平均 2 47.4s/根管 (P <0 .0 1)。结论 :Thermafil充填技术临床操作简便省时 ,但容易造成超充