表皮生长因子介导的NF-κB促进胰腺癌细胞MMP-9表达及侵袭的实验研究

目的 观察表皮生长因子(EGF)对胰腺癌细胞增殖、黏附及侵袭力的影响及其对核因子-κB(NF-κB)和细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响,探讨EGF促进胰腺癌侵袭的相关机理.方法 通过细胞增殖、黏附及侵袭实验,观察在EGF影响下胰腺癌细胞黏附、增殖及侵袭能力变化;通过RT-PCR、MMPs明胶酶谱分析、Western blot及EMSA,检测胰腺癌细胞的MMP-2和MMP-9 mRNA及其蛋白表达以及NF-κB活性变化;并观察NF-κB抑制物吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对EGF诱导的胰腺癌细胞NF-κB活性、MMP-9 mRNA及其蛋白表达以及肿瘤细胞侵袭力的变化.结果 EGF能够增强胰腺癌细胞的侵袭能力,具有剂量依赖性(P＜0.05).EGF对胰腺癌细胞的黏附力及增殖力无明显影响.EGF处理后,肿瘤细胞的MMP-9蛋白和mRNA表达明显升高,EGF浓度为50 ng/ml时,肿瘤细胞的MMP-9表达最强,但对MMP-2蛋白和mRNA的表达则无影响.随着EGF浓度的增加,NF-κB活性增强,具有浓度依赖性(P＜0.05).与EGF单独处理相比,经PDTC和EGF共同处理后的胰腺癌细胞NF-κB活性与MMP-9蛋白和mRNA表达均降低;PDTC和EGF共同处理后的胰腺癌细胞侵袭力较EGF单独处理和对照均减弱(P＜0.05).结论 EGF通过激活NF-κB的活性,诱导MMP-9表达,促进胰腺癌细胞的侵袭,而这一过程可以被PDTC抑制.     

真空冷冻干燥工艺中天麻干燥特性和活性成分的变化规律研究及其质量评价

目的:研究不同真空冷冻干燥工艺条件下天麻干燥特性和活性成分的变化规律;评价不同干燥条件下冻干天麻样品的质量。方法:分别以干燥速率、单位时间生产率及面积收缩率为干燥特性指标;以天麻素、天麻多糖、对羟基苯甲醇、醇溶性浸出物含量为指标成分,考察真空压强、隔板温度和切片厚度对天麻干燥特性和活性成分的影响;采用多层次分析结合正交设计优化干燥工艺;并从红外光谱、扫描电镜(Scanning electron microscope,SEM)及色度三个方面对天麻冻干样品的质量进行评价。结果:天麻的干燥特性与真空压强、隔板温度和切片厚度均呈现显著变化规律;天麻的活性成分则无显著变化规律。在优化的工艺条件(真空压强45 Pa,隔板温度55℃,切片厚度5 mm)下,天麻素、天麻多糖、对羟基苯甲醇和醇溶性浸出物含量分别为0.472%、22.54%、0.292%和31.98%,且质量优于其他干燥样品。结论:天麻的干燥特性参数与真空冷冻干燥工艺密切相关;成分指标随工艺参数改变无明显趋势;采用真空冷冻干燥工艺制备的天麻样品质量良好。     

三七提取物的制备工艺对其抗凝血生物效价的影响

目的:考察三七提取物的制备工艺对其抗凝血生物效价的影响。方法:采用不同提取/干燥方法,制备三七提取物,并测定其抗凝血活性,根据量反应平行法计算生物效价;采用HPLC法测定提取物活性成分;并对活性成分与生物效价进行线性关联分析。结果:当物料比为1∶8时,80%乙醇超声提取结合冷冻干燥法所得到的提取物生物效价最高;且生物效价与活性成分之间呈显著正相关,R^2为0.7837。结论:三七提取物的制备工艺可显著影响其抗凝血生物活性。     

不同贮藏时间硫熏天麻化学成分及二氧化硫变化规律研究

研究不同贮藏时间对硫熏天麻化学成分和二氧化硫残留量的影响,为解决硫磺熏蒸天麻药材质量和安全问题提供科学依据。将天麻与硫磺熏蒸天麻及其饮片在相同条件下贮藏,分别测定天麻8种有效成分和二氧化硫残留量。结果发现,硫熏后天麻及其饮片中天麻素类含量相比未硫熏天麻显著降低,且硫熏天麻中的二氧化硫残留量显著高于硫熏天麻饮片中的,即在相同条件下,硫熏对天麻质量的影响程度显著大于天麻饮片。在8个月的贮藏时间内,天麻药材中8种化学成分含量整体变化不大。但贮藏4个月后,天麻、硫熏天麻及其饮片中的化学成分和二氧化硫残留量均出现显著变化,并且天麻药材中二氧化硫残留量降幅较大,可达50%以上。     

长链非编码RNA CCAL在肝癌中的表达及其对预后的影响

目的:检测LncRNA-CCAL在肝细胞癌(HCC)中的表达水平,并分析其与肝癌患者临床病理因素及预后的关系.方法:运用RT-PCR技术检测37例肝癌新鲜组织中CCAL的表达水平;运用原位杂交技术(ISH)检测120例肝癌患者组织切片中CCAL的表达水平,并运用卡方检验、COX回归模型、Kaplan-Meier生存曲线分析CCAL表达水平与肝癌患者临床病理因素及预后的关系.结果:37例肝癌新鲜组织标本中29例高表达,且癌组织中平均表达水平明显高于癌旁组织;120例肝癌患者组织切片中85例高表达,其表达水平与肝癌TMN分期和是否转移相关,而且CCAL较高表达的患者预后也相对较差,总生存率明显低于CCAL低表达的患者.结论:CCAL在肝细胞癌中高表达,是肝癌患者预后的独立影响因子.     

三七药渣中主要多糖成分的分离纯化及其抗氧化活性研究

目的 分离纯化三七药渣中主要多糖组分,分析其单糖组成,并对比研究各组分多糖的抗氧化活性。方法 采用水提醇沉法提取三七药渣粗多糖;经DEAE Fast Flow阴离子交换柱、Sephadex G-50柱色谱法进行分离纯化。采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）法测定其相对分子质量及纯度,通过扫描电子显微镜（ScanningElectronMicroscope,SEM）、傅里叶变换红外光谱仪（Fourier TransformInfraredspectroscopy,FT-IR）、HPLC-衍生化等方法对各组分多糖的单糖组成和初级结构进行分析。分析其抗氧化能力以及对RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用。结果 分离得到3个多糖组分（PNPS-0、PNPS-0.2、PNPS-0.3）,3者的单糖组成和比例存在差异：PNPS-0主要由D-葡萄糖（52.28%）和D-半乳糖（34.14%）组成;PNPS-0.2主要由D-半乳糖（40.89%）、D-阿拉伯糖（19.38%）和D-葡萄糖（12.25%）组成;PNPS-0.3主要由D-葡萄糖醛酸（40.43%）、D-半乳糖（22.61%）和D-葡萄糖（...     

油菜素内酯提高三七抗镉胁迫能力的生理生化机制研究

该研究以两年生三七为试验材料,通过盆栽试验研究了油菜素内酯(BR)对镉胁迫下三七生理生化的影响。结果表明,10 mg·kg^-1镉处理抑制三七的根系活力,显著提高三七叶和根部H₂O₂及丙二醛(MDA)的含量,造成三七的氧化损伤,并降低超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性;镉胁迫降低了三七叶绿素含量,提升叶片初始荧光(F_o),降低最大荧光(F_m)、最大光化学效率(F_v/F_m)和光合性能指数(PIABS),损伤了三七的光合作用系统;镉处理提高了三七叶和根部可溶性糖含量,抑制了可溶性蛋白的合成,降低了鲜干重,抑制了三七的生长。外源喷施0.1 mg·L^-1油菜素内酯降低了镉胁迫下三七叶和根部的H₂O₂和MDA含量,缓解了镉对三七的氧化损伤,提高了三七的抗氧化酶活性与根系活力,增加了三七叶绿素含量,降低了三七叶片的F_o,提高了三七F_m<...     

前列腺癌组织中TGF-β1 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在前列腺癌中的表达及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对前列腺癌组织中TGF-β1mRNA表达进行研究。结果:TGF-β1mRNA的相对含量值:在正常前列腺组织为0.74±0.11;在前列腺癌T1~T2期为(0.69±0.10),T3~T4期为(0.44±0.08);Gleason评分≤5分者为(0.70±0.12),6~8分者为(0.54±0.11),≥9分者为(0.42±0.09)。T1~T2期与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),T3~T4期与正常前列腺组织相比,差异有极显著性(P<0.01),T3~T4期与T1~T2期前列腺癌相比,差异有显著性(P<0.05)。Gleason评分≤5分者与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),6~8分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.05),≥9分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.01),≥9分者与≤5分及6~8分者相比,差异均有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论:TGF-β1的mRNA表达与临床分期、病理分级呈负相关。     

不同产地三七茎叶的质量评价

建立了高效液相色谱法测定三七茎叶中的指标性成分人参皂苷Rb1、Rc、Rb2和Rb3,综合评价不同产地来源三七茎叶的质量.使用C18色谱柱,以乙腈∶水为流动相,梯度洗脱,检测波长203 nm.人参皂苷Rb1、Rc、Rb2和Rb3在0.002～1.0 mg/ml范围内线性关系良好.回收率分别为96.0％、105.3％、103.7％和96.1％,RSD分别为1.32％、2.98％、0.95％和2.11％.     

立体栽培模式对三七产质量影响及其栽培土壤氮磷钾养分变化特征研究

以立体栽培(上中下3层)三年生三七及种植土壤为研究对象,比较分析了其与大田栽培三七产质量差异和土壤氮磷钾养分年度变化特征。结果表明,与大田栽培相比,立体栽培三七长势和相同面积产量均显著降低,但单位面积产量总和为大田栽培的1.6倍;上中下3层长势和产量均表现为上层 >中层 >下层;立体栽培三七上层剪口、主根和筋条皂苷含量均高于大田栽培,而中层和下层皂苷含量则显著低于大田栽培。立体栽培土壤有机质含量和pH变化趋势与大田一致,呈随种植时间延长而下降的趋势;上中下层有机质含量均显著高于大田土壤,pH则显著低于大田土壤。立体栽培三七土壤氮磷钾全效养分和速效养分年度变化均表现为随种植时间的延长而下降,不同栽培模式氮素和磷素含量均表现为上层 >中层 >大田 >下层,钾素含量表现上层 >中层 >下层 >大田。与大田栽培相比,氮素和磷素在上层三七的地下部(筋条、主根和剪口)所占比例升高,中下层地下部比例降低,钾素在各层地下部所占比例均显著降低。由此可见,虽然立体栽培下三七相同面积产量显著低于大田栽培,但单位面积下的总产量显著高于大田,达到了提高土地利用率的目的;立体栽培土壤养分能够满足三七生长需求,其并非造成三七长势弱、单产低的主要原因;立体栽培模式下的三七吸收氮磷钾养分能力降低,因此从调整栽培结构角度增强三七长势从而提高其养分吸收能力是今后努力方向。